高糖对体外培养兔视网膜Müller细胞AQP4表达的影响

目的：观察体外培养兔视网膜Müller细胞在高糖条件下水通道蛋白-4（AQP4）表达的变化。方法：采用体外培养的兔视网膜Müller 细胞,分为正常对照组及高糖组（葡萄糖浓度：30、40和50 mmol•L^-1）,分别培养1、3和5 d;采用免疫细胞化学、流式细胞术及RT-PCR方法对Müller 细胞AQP4的表达情况进行检测。结果：高糖组Müller 细胞AQP4表达的绿色荧光明显弱于正常对照组（P<0.01）;流式细胞仪检测中波峰位置明显提前,AQP4表达强度较对照组明显减弱（P<0.01）,且随着葡萄糖浓度的增高和作用时间的延长,AQP4表达强度逐渐减弱;血糖浓度50 mmol•L^-1培养3 d时,RT-PCR半定量分析显示,AQP4 mRNA的表达比对照组明显降低（P<0.01）。结论：高糖能降低视网膜Müller细胞AQP4的表达,且随着葡萄糖浓度的增高和作用时间的延长,AQP4的表达强度也逐渐减弱;高糖时AQP4的表达下降可能是机体对糖尿病视网膜病变的一种保护性反应。     

鸡蛋中卵黄高磷蛋白的提取

建立了一种简单且适合于批量提取鸡蛋中的卵黄高磷蛋白的方法．先分离出其它水溶性蛋白质,再将沉淀物脱去脂肪,然后用１０％的ＮａＣｌ溶液（ｐＨ７．０）从所得的颗粒中提取卵黄高磷蛋白．每１００ｇ蛋黄提取１ｇ卵黄高磷蛋白粗制品,含氮１１．２２％,含磷７．７％,氮磷含量比值３．６４．卵黄高磷蛋白在ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００图谱上有两个主峰,分别是α－ＰＶ和β－ＰＶ,相对分子质量为１６００００和１９００００．在聚丙烯酰胺凝胶电泳上出现相对应的两条谱带．经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳后,则出现相对分子质量从１０４～９×１０４左右的多条谱带,预示卵黄高磷蛋白是由多亚基组成的     

HPA-1a抗体SPR技术定量检测方法的建立

目的:建立针对人类血小板抗原(HPA)-1a抗体的表面等离子体共振(SPR)技术定量检测方法.方法:以氨基偶联法在芯片表面偶联重组蛋白,采用SPR方法检测不同浓度的标准抗血浆样本,优化实验条件,在检测范围内绘制标准曲线,并分析其敏感性、特异性、准确性和精密度.结果:利用SPR技术建立针对HPA-1a抗体的定量检测方法,...     

慢性肝炎和肝炎后肝硬化患者能量代谢的研究

目的了解慢性肝炎（慢肝）与肝炎后肝硬化（肝硬化）患者的物质能量代谢与摄入特点，以有效指导营养治疗。方法采用间接测热法对60例慢肝（慢肝组）和60例肝硬化患者（肝硬化组）的静息能量消耗水平进行测定，分别与Harris—Benedict公式计算的基础能量消耗和膳食调查计算的食物能量摄入进行比较；分析静息能量消耗与营养评价指标的相关性。结果肝硬化组的静息能量消耗（77±21）kJ·kg^-1·d^-1，低于基础能量消耗（95±16）kJ·kg^-1·d^-1（t=-6．49，P〈0．01），能量摄入（102±33）kJ·kg^-1·d^-1，是静息能量消耗的1．42±0．61倍，其中蛋白质摄入（0．84±0．31）g·kg^-1·d^-1，是静息蛋白质消耗[（1．11±0．42）g·kg^-1·d^-1的0．85±0．52倍，呈负氮平衡（-6．29±4．62）；慢肝组的静息能量消耗[（93±18）kJ·kg^-1·d^-1]与基础能量消耗[（98±8）kJ·kg^-1·d^-1]比较，差异无统计学意义（P〉0．05），能量摄入为（127±34）kJ·kg^-1·d^-1，是静息能量消耗的1．41±0．43倍，其中蛋白质摄入（1．02±0．29）g·kg^-1·d^-1，是静息蛋白质消耗（0．87±0．34）g·kg^-1·d^-1的1．31±0．61倍，呈负氮平衡（-2．02±4．07）；与慢肝组比较，肝硬化组的静息能量消耗、能量及三大能量营养素摄入量、血清白蛋白和前白蛋白水平均显著低下（P〈0．01），体重下降明显（P〈0．01），负氮平衡严重（P〈0．01）；肝硬化组的能量摄入与静息能量消耗和基础能量消耗的比值呈正相关（P〈0．05），血清前白蛋白与蛋白质氧化率呈负相关（P〈0．05）。结论肝硬化患者的静息能量消耗呈低代谢状态；负氮平衡是慢肝与肝硬化患者的共同营养问题；早期预防慢性肝病患者的营养不良能够改善其远期预后。     

沙门氏菌胞周蛋白二硫键异构酶DsbA对乙肝疫苗HBsAg'a'表位构象的作用研究

目的:研究沙门氏菌胞周蛋白二硫键异构酶DsbA对乙肝疫苗HBsAg'a'表位构象的形成作用.方法:将沙门氏菌胞周蛋白二硫键异构酶DsbA基因克隆于PET32b载体上,与乙肝疫苗HBsAg'a'表位载体共转BL21菌,运用流式细胞仪和荧光显微镜观察HBsAg'a'表位构象的形成.结果:在没有沙门氏菌胞周蛋白二硫键异构酶D...     

HER-2基因原位杂交方法学探讨

目的 尝试用新型自动化原位杂交仪(HS400Pro)建立规范化、标准化操作步骤.方法 可有效降低实验所需探针浓度、提高杂交效率.对5例已知HER-2阳性的乳腺癌存档蜡块,采用动态杂交技术行2种不同DNA探针标记(DIG和FITC),分别用手工和HS400Pro全自动杂交检测系统对比检测结果.结果 探针用专利杂交液按1∶40稀释后,采用新型自动化原位杂交仪37℃杂交12 h与手工37℃杂交18h结果一致.说明该仪器可以基本替代手工开展ISH.结论 自动化原位杂交仪的使用是实现ISH自动化、标准化、规范化的好方法.但要继续扩大检测样本量,找出HS400Pro的最佳杂交条件.     

The effect of folic acid on genetic damage induced by ethanol in human lymphoblast cell line

目的:探讨叶酸(folic acid,FA)对乙醇(ethanol,EtOH)诱发的人成淋巴细胞遗传损伤的影响.方法:人成淋巴细胞株GM12593培养在含有不同FA浓度(20、200、2 000 nmol/L)的RPMI-1640培养基中,并同时在每种FA浓度的培养体系中分别加入0.09％、0.36％和1.34％ (V/V)的EtOH,8 d后用细胞松弛素B(cytochalasin B,CB)处理28 h,胞质阻断微核细胞组分析(cytokinesis-block micronucleus cytome assay,CBMN Cyt)比较不同培养条件下的细胞遗传损伤,包括微核化双核细胞(micronucleated binueleated cell,MNed BNC)、核芽(nuclear bud,BUD)、核质桥(nucleoplasmic bridges,NPB)的频率差异.结果:乙醇在受试细胞中诱发MNed BNC、BUD和NBP频率显著升高(P＜0.01);2 000 nmol/L的叶酸能显著降低由乙醇诱发的MNed BNC、BUD和NBP频率(P＜0.01).结论:乙醇对细胞遗传物质具有损伤效应,叶酸对乙醇的遗传毒性具有防护效应.     

急性坏死性胰腺炎对心肾损伤的影响

目的探讨急性坏死性胰腺炎（ANP）对心肾损伤的影响。方法采用3.5％牛磺胆酸逆行注射胰胆管建立鼠的ANP模型。观察炎性介质内毒素、淀粉酶、磷脂酶A2,白细胞介素（IL－）1、肿瘤坏死因子x（TNFα）的变化和生长抑素的作用。结果ANP可以诱导炎性介质的明显升高,并与心肾损伤的严重程度呈正相关。而生长抑素能抑制ANP的炎性介质过度表达,减轻心肾损伤的程度。结论炎性介质参与了ANP对心肾器官的损伤,生长抑素对ANP的心肾损伤有治疗价值。     

大鼠氧惊厥时脑内μ-阿片受体的变化

目的　探讨大鼠氧惊厥时脑内 μ-阿片受体的变化。方法　用 [3H]-羟甲芬太尼作为特异性标记配体 ,采用放射配体受体结合实验 (radioligand binding assay,RBA) ,测定在几种不同气体及压力的暴露条件下 ,大鼠脑内 μ-阿片受体的 k D值和 Bmax值的变化。结果　大鼠氧惊厥前 ,脑内 μ-阿片受体的 k D值即有增大趋势 (但 P>0 .0 5 ) ,Bmax值减小 (P<0 .0 1) ;氧惊厥时 k D值进一步升高 (P<0 .0 1) ,Bmax值反而增大 (P<0 .0 1)。结论　结果提示 :(1)氧惊厥发作中 ,μ-阿片受体的数量增多 ,而其结合活性降低。(2 )在高压氧 (HBO)暴露中 ,μ-阿片受体参与了氧惊厥的过程     

上海市车祸死亡率研究

目的：探讨车祸的现场救治．方法：对１９８１～１９９０年上海市车祸死亡率采用数学模型研究．结果：１０年中该市死亡率波动于３．６７６～６．４９１／１０万．死亡率数学模型为：ｙ＝５＋０．８３３ｓｉｎ（２ｘ／３），其平均相对误差６．８６８％，拟合优度９３．１３２％；ｙ与ｙ的相关系数０．９４５９；１９９１、１９９２年的预测精度分别为９３．３９％和９０．９５％．郊县中嘉定、宝山及青浦三地的死亡率均＞１１．２０／１０万，其中近１／２的郊县致死性车祸发生于沪青平等十三条公路上．结论：为缩短车祸后救治的反应时间，应改善郊县公路两旁的通讯设施，尽快研制适合城乡升降的直升救护机．