靶向沉默EphA8基因对人结肠腺癌细胞凋亡及细胞周期的影响

目的:通过转染siRNA片段,研究EphA8基因沉默后对结肠腺癌Ls174T细胞凋亡和细胞周期的影响。方法:设计合成三对靶向沉默EphA8基因表达的siRNA片段,通过Lipofectamine2000介导转染人结肠腺癌细胞Ls174T。采用实时荧光定量PCR技术和Western Blot检测EphA8基因沉默效率,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期。结果:三对siRNA片段均能沉默结肠腺癌Ls174T细胞EphA8 mRNA的表达,siRNA3抑制效果最明显,抑制率为85.71%。流式细胞术检测细胞凋亡结果显示:转染48 h后,Ls174T细胞实验组细胞凋亡率为33.29%;流式细胞术检测细胞周期结果显示:转染60 h后,结肠腺癌Ls174T细胞实验组S期细胞和G2期细胞比例显著降低。结论:本实验成功筛选出特异性靶向沉默EphA8基因的siRNA片段,并初步鉴定了EphA8基因的功能。     

2型糖尿病患者血脂水平和肾功能关系的研究

目的:探讨2型糖尿病患者血脂紊乱和肾功能的关系.方法:回顾性分析399例2型糖尿病病例,分析其血脂和肾功能的关系.以MDRD公式计算肾小球滤过率.结果:甘油三酯、极低密度脂蛋白-胆固醇水平和肾小球滤过率呈负相关,高密度脂蛋白-胆固醇水平和肾小球滤过率呈正相关,而肾小球滤过率水平较低组的低密度脂蛋白-胆固醇水平高于对照组.hsCRP可作为肾功能受损的独立预测因子.结论:脂质代谢以及炎症指标和糖尿病患者肾功能减退独立相关.     

慢性肾衰患者瘦素基因表达及蛋白表达与高瘦素血症的相关病因研究

目的：探讨慢性肾衰患者高瘦素血症与瘦素基因表达及蛋白表达、肾小球滤过率、体质指数及炎症、空腹胰岛素之间的相关性.方法：检测150例分别处于不同慢性肾功能衰竭阶段患者的血清瘦素水平、肾小球滤过率、同型半胱氨酸、C-反应蛋白、空腹胰岛素的,并计算其体质指数.RT-PCR法检测15例终末期肾衰患者腹部脂肪组织瘦素基因表达;免疫组化法检测其瘦素蛋白表达.结果：肾功能损伤患者血清平均瘦素水平明显高于健康对照组（P〈0.01）,与体质量指数之间呈正相关（P〈0.01）,与肾小球滤过率呈负相关（P〈0.01）.相关性分析发现血清瘦素与C-反应蛋白、同型半胱氨酸及空腹胰岛素之间呈正相关（P均〈0.05）.终末期肾功能衰竭患者脂肪组织瘦素mRNA表达水平低于健康对照组（P〈0.01）,而蛋白表达高于健康对照组（P〈0.01）.血清瘦素水平与瘦素基因表达水平呈负相关（P〈0.05）.结论：慢性肾衰患者血清瘦素水平的升高与肾小球滤过率下降所导致的瘦素清除减少有关;终末期肾衰患者脂肪组织瘦素蛋白表达水平升高可能与慢性肾衰高瘦素血症有关.     

FGF-2/PELA/BMP-2微囊支架促进大鼠骨膜来源干细胞的成骨分化

目的：观察成纤维细胞生长因子-2/聚乳酸-聚乙二醇-聚乳酸/骨形态发生蛋白-2（FGF-2/PELA/BMP-2）微囊支架对SD大鼠骨膜来源干细胞成骨分化作用。方法提取SD大鼠骨膜来源干细胞（PDSC）,进行流式细胞学表面标记物鉴定及成骨、成软骨、成脂三系诱导并进行茜素红、甲苯胺蓝、阿利新蓝、油红O染色及免疫荧光实验。制备FGF-2/PELA/BMP-2、FGF-2/PELA、PELA/BMP-2、PELA四组材料,进行扫描电镜（SEM）观察微囊表面,通过ELISA实验制作两因子的控释曲线。将4组材料浸提液与第3代骨膜来源干细胞进行共培养,分别在7、14 d进行碱性磷酸酶（AKP）活性检测,分别在7、14、21 d进行qRT-PCR成骨基因表达检测,观察比较各组PDSC成骨分化能力,数据汇总后进行统计学分析。结果流式细胞学表面标记物鉴定显示PDSC表达间充质干细胞表面标记物,三系诱导分化染色结果表面PDSC具有成骨、成软骨、成脂等多向分化能力。AKP活性结果显示,FGF-2/PELA/BMP-2组在PDSC培养的7 d及14 d,AKP活性最高,差异显著。FGF-2/PELA/BMP-2组的qRT-PCR结果提示RunX-2、OCN表达量均高于其他组,且在第14天RunX-2表达量达到顶峰,OCN呈持续增长趋势。结论 FGF-2/PELA/BMP-2仿生控释微囊支架中的细胞因子活性得以保留,并相对其他实验组具有更高的促进PDSC成骨分化的能力。     

微小RNA-155反义寡核苷酸对乳腺癌MDA—MB-157细胞及裸鼠移植瘤的作用

目的：探讨微小RNA-155（microRNA．155,miR-155）反义寡核苷酸（antisenseoligonucleotide,AS0）对乳腺癌MDA-MB-157细胞增殖、凋亡及裸鼠移植瘤的作用。方法：设计合成化学修饰的miR-155ASO,通过Lipofectamine^TM 2000转染MDA-MB-157细胞,激光共聚焦检测转染率,real-timePCR测定转柒后miR-155表达水平的变化,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,观察miR-155ASO对裸鼠成瘤能力的影响,免疫组织化学法检测瘤体组织Caspase-3的表达。结果：激光共聚焦检测转染率达80％以上。转染miR-155AS0后,miR-155表达明显下降,细胞增殖能力降低,凋亡增加。miR-155AS0能明显抑制裸鼠移植瘤生长,抑制率为52．98％,并且能显著增加Caspase-3的表达。结论：miR-155AS0能显著下调miR-155的表达水平,继而抑制乳腺癌MDA-MB-157细胞的增殖,促进其凋亡;并且通过增加靶基因Caspase-3的表达,抑制裸鼠移植瘤的生长,为miR-155作为乳腺癌治疗靶点提供了实验依据。     

脂联素基因＋45T〉G在宁夏汉族群体中的基因频率

目的研究联素基因SNP＋45 T〉G在宁夏汉族群体中的基因型频率和等位基因频率。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术,对101例宁夏汉族人群联素基因SNP＋45 T〉G分布进行检测。结果宁夏汉族人群中脂联素基因SNP＋45TT、TG、GG基因型频率分别为57.42%、39.60%和3.00%,T、G等位基因频率分别为77.23%和22.77%。TT基因型频率和T等位基因频率与北京、黑龙江、安徽、湖北、广东和上海汉族群体相近（P〉0.05）,高于吉林（37.4%）汉族群体,差异具有统计学意义（P〈0.01）。与国外群体比较,中国人SNP＋45TT基因型频率和T等位基因频率与韩国人群相近（P〉0.05）;低于于欧洲的芬兰（89.68%）、希腊（81%）和丹麦（80.87%）人群,差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论不同种族人群联素基因SNP＋45 T〉G基因型频率和等位基因频率分布不同,具有其特有的群体遗传学特征。     

神经肌肉电刺激联合吞咽训练治疗脑梗死后吞咽障碍疗效观察

目的探讨神经肌肉电刺激（NMES）联合吞咽训练对脑梗死后吞咽障碍患者的疗效。方法将50例脑梗死后吞咽障碍的患者随机分为对照组25例和治疗组25例,2组基线资料具有可比性。所有患者接受脑梗死常规治疗,对照组给予吞咽训练,治疗组加用V italStim电刺激治疗仪进行NMES治疗,治疗前后采用洼田饮水试验、吞咽障碍程度分级进行评定。结果 2组治疗前,在洼田饮水试验及吞咽障碍程度分级评定方面差异无统计学意义（P均〉0.05）,治疗后,2组洼田饮水试验及吞咽障碍程度分级评定均有所好转（P均〈0.05）,且治疗组洼田饮水试验分级（1.92±0.95vs2.56±1.12,P〈0.05）及吞咽障碍程度分级（7.60±1.89vs6.40±2.27,P〈0.05）均优于对照组。结论 NMES联合吞咽训练治疗脑梗死后吞咽障碍有明显疗效。     

针药结合治疗风痰阻络证中风后吞咽障碍患者75例临床观察

目的 观察化痰通咽汤结合针灸治疗中风后风痰瘀阻证吞咽障碍的临床疗效.方法 选取在武汉市第一医院康复医学科住院的证属风痰瘀阻证中风后吞咽障碍患者150例,随机分为对照组和治疗组各75例.治疗组采用针刺结合化痰通咽汤进行治疗,对照组采用针刺治疗,两组均给予神经内科基本治疗和康复治疗,疗程4周,对比临床疗效.结果 治疗后两组洼田饮水试验评分,吞咽功能障碍中医评价量表评分,电视X线透视吞咽功能检查,吞咽困难生活质量测量比较差异均有统计学意义,治疗组优于对照组(P＜0.05).结论 在神经内科基本治疗和康复治疗基础上综合运用化痰通咽汤结合针灸治疗中风后风痰瘀阻证吞咽障碍患者,能提高疗效,值得推广应用.     

前哨淋巴结活组织检查技术在胃癌根治术中的应用价值

目的：探讨前哨淋巴结定位与活组织检查在胃癌根治术中的作用。方法：使用亚甲蓝对22例胃癌患者先行前哨淋巴结标识活组织检查,然后行标准胃癌根治术,术后行常规HE病理及免疫组化检查,通过前哨淋巴结计算胃癌淋巴结转移诊断的准确率、敏感性及假阴性率。结果：22例患者中21例成功捡出前哨淋巴结,检出率为95．5％（21／22）。前哨淋巴结预测胃周淋巴结转移的准确率为95．2％（20／21）,敏感性为94．1％（16／17）,特异性为100％（21／21）,假阴性率为5．9％（1／17）。结论：术中使用亚甲蓝染色定位胃癌前哨淋巴结安全可行,并能准确反映胃癌周围淋巴结的转移状态,可用于指导胃癌的淋巴结清扫范围。     

大段同种异体骨移植在四肢恶性骨肿瘤保肢术中的应用

目的分析大段同种异体骨移植在治疗四肢恶性骨肿瘤切除后骨缺损中的疗效。方法 :对 130例四肢骨肿瘤 ,切除范围以Enneking分期为原则 :异体骨移植术式分 :1/ 4关节、1/ 2关节、部分骨干、全骨段、全骨段 人工假体、1/ 2关节 自体带血管骨瓣 ;内固定分 :钢板 螺丝钉、螺丝钉、普通髓内钉、带锁髓内钉 ;疗效按Mankin提出的评定标准 ,将结果分 :优、良、中、差四等 ,差为不满意。结果 :随访 6～ 15 6个月 ,本组治疗满意率为 6 3.8% ,主要并发症是感染、骨折、骨不愈合 ,其发生率 39.2 % ,保肢率 76 .3%。结论 :大段同种异体骨移植 ,在治疗四肢恶性骨肿瘤切除后骨缺损方面 ,不失为一种有效可行的方法。其并发症发生与肿瘤外科分期、是否化疗、移植骨大小、受骨区软组织条件好坏、内固定各类有关。