杜仲内生真菌EL09次生代谢产物的研究

目的对杜仲内生真菌EL09次生代谢产物进行研究。方法采用色谱技术进行分离纯化内生真菌EL09的代谢产物,理化性质及波谱分析技术确定化合物的结构,通过最小抑菌浓度法测定化合物的抑菌活性。结果从杜仲内生真菌EL09次生代谢产物中分离并鉴定了6个化合物,分别是麦角甾醇(1),5-hydroxymethylfuran-3-carboxylic acid(2),fumiquina-zoline C(3),赤藓醇(4),D-甘露醇(5),尿嘧啶(6)。结论次生代谢产物中化合物2对黄瓜枯萎病菌有效。     

风湿宁胶囊对类风湿关节炎风寒湿痹动物模型的关节保护及抗炎作用

目的:从抗炎及关节保护方面探讨风湿宁(FSN)胶囊治疗类风湿性关节炎(RA)的药物作用机制。方法:将120只雄性新西兰白兔随机分为正常组、模型组、甲氨蝶呤组、风湿宁低、中、高剂量组,每组20只。除正常组外,其余各组建立胶原诱导性关节炎(CIA)加风寒湿刺激的风寒湿痹动物模型,造模成功以后,风湿宁低、中、高剂量组分别按剂量0.33,0.66,1.32 g·kg~(-1)给予风湿宁胶囊水溶液,甲氨蝶呤组给予1.0 mg·kg~(-1)的甲氨蝶呤片水溶液,正常组灌胃生理盐水,各组按剂量4 m L·kg~(-1)灌胃,每日1次,连续7 d。观察风湿宁胶囊对RA白兔风寒湿痹模型的一般情况、关节肿胀程度,实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测各组关节滑膜组织炎症因子白细胞介素(IL)~(-1)β,IL-6,肿瘤坏死因子(TNF)-α信使核糖核酸(mRNA)的表达量及核转录因子-κB(NF-κB)受体激活剂配体(RANKL)mRNA的表达量。结果:风湿宁胶囊可明显改善RA兔生存状态,减轻RA兔后肢膝关节的肿胀,降低膝关节表面温度和关节炎积分,能够显著降低RA兔滑膜组织IL~(-1)β,IL-6,TNF-α,RANKL mRNA的表达。结论:风湿宁胶囊具有抑制关节滑膜组织中炎症因子和RANKL的表达的作用,可有效减轻RA的炎症反应和骨质破坏,从而对RA取得疗效。     

清肠泡腾栓对溃疡性结肠炎模型大鼠细胞因子的影响

目的探讨中药清肠泡腾栓治疗溃疡性结肠炎的免疫学疗效机制。方法实验分设正常对照组、模型对照组、空白泡腾栓组、清肠泡腾栓组、清肠栓组、柳氮磺胺吡啶栓组共6个组,ELISA法检测血清、结肠上清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-13(IL-13);免疫组化、原位杂交检测白细胞介素8(IL-8)mRNA阳性表达。结果模型对照组血清TNF-α较正常对照组升高(P<0.05),结肠黏膜IL-8 mRNA阳性表达明显增强(P<0.01);清肠泡腾栓明显降低结肠上清TNF-α含量以及IL-8 mRNA阳性表达,与模型对照组比较差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01);清肠泡腾栓对IL-13的调控作用不明显,与模型对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论清肠泡腾栓通过抑制促炎细胞因子而对溃疡性结肠炎产生治疗作用。     

中药活性成分生物转化的研究思路与方法

结合本课题组近几年来的研究结果,对中药活性成分的生物转化方法进行总结,并对今后生物转化的研究思路进行了展望。目前,生物转化在有机合成领域的应用比较广泛,而该技术用于中药活性成分的结构修饰还处于初级阶段,尤其缺乏对某类中药活性成分系统的生物转化研究,因此有很多方面的研究值得关注,尤其是生物催化酶的研究将是生物转化的重要发展方向。此外,生物转化在中药活性化合物合成中的应用以及利用“微生物模型”研究中药活性的体内代谢,也将成为今后生物转化研究中不可忽视的领域。     

土家药天珠散防治血管性痴呆的有效成分与作用机制研究

采用双侧颈总动脉永久结扎复制慢性低灌注型血管性痴呆大鼠模型,常规饲养60 d后灌胃给予天珠散0.1 g·kg^-1,给药体积0.02 mL·g^-1,连续3 d,制备含药血清;采用UPLC检测天珠散入血成分并推测其结构;使用Discovery Studio 3.5软件进行反向找靶,并将获得的潜在靶标基因在线提交DAVID数据库进行基因富集分析。该文共推断获得天珠散5个入血成分,鉴定其中4个成分为parishin B,parishin C,parishin,偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖苷;经反向找靶,获得Fit value≥0.6的药效团模型861个,从KEGG,BIOCARTA获得经文献验证的信号通路Cytokine-cytokine receptor interaction,Apoptosis等 9条,提示天珠散改善血管性痴呆的药理作用与机制可能与上述入血成分及相关信号通路有关。对于少数民族传统经验方,在药效验证的前提下,综合采用血清药物化学、计算机辅助药物设计、系统生物学等技术,将有益于民族效验方物质基础、作用机制的快速发现。     

我国中药材企业发展策略探讨

结合我国中药材产业现状,分析了中药材企业发展的特点,提出中药材企业发展策略,如生产规范化,开发高附加值产品,加大人才储备,重视知识产权保护,加快信息化建设等,并为我国中药材企业的产业政策提出了几点建议.     

“易层”贴敷疗法治疗急性软组织损伤的“药物分层”参数水平优化研究

目的:选择影响"易层"贴敷疗法临床疗效的主要技术参数——"药物分层",设定不同水平进行评价,找出最优技术参数水平,优化"易层"贴敷技术操作规程。方法:总计100例踝关节急性软组织损伤患者入选,随机分为两组,每组各50例。治疗方案为第1组:(每天换药)+(三色敷药层联合三黄油膏层);第2组:(每天换药)+(单用三黄油膏层)。治疗观察时间均为6天。评价主要疗效指标:局部疼痛、肿胀、皮肤温度、功能障碍;次要疗效指标:失眠、筋脉拘急及舌苔脉象。全部病例治疗观察结束后进行统计分析。结果:治疗结束,经过统计分析显示,两组治疗后均较治疗前疗效积分有显著改善(P<0.01)。但第1组疗效积分最优,与第2组比较有显著差异(P<0.01)。结论:第1组方案(每天换药+三色敷药层联合三黄油膏层)治疗急性软组织损伤疗效明显优于第2组。提示临床在应用"易层"贴敷疗法治疗疾病的时候应该采用联合药物层次水平的方案治疗最为有效。应该依据此最佳技术参数水平制定"易层"贴敷技术操作规程。     

那保胶囊质量标准研究

目的:建立那保胶囊(黄芪、当归、延胡索、白花蛇舌草、铁棒锤等)的质量标准。方法:采用TLC对处方中当归、延胡索及白花蛇舌草进行鉴别,对毒性药材铁棒锤进行限量检查,采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)法测定黄芪甲苷的含量。结果:TLC鉴别分离度好,专属性强;铁棒锤中乌头碱含量不超过规定;黄芪甲苷在1～10μg的范围内线性关系良好(r=0.9990),平均回收率为99.05(RSD=2.48,n=6)。结论:所建立的质量标准方法可靠、准确、专属性强,可有效控制那保胶囊的质量。     

刺老苞根皮黄酮对骨折模型大鼠骨质代谢的影响研究

目的研究刺老苞根皮黄酮对胫骨骨折模型大鼠骨质代谢变化的影响。方法将50只6周龄SD（雌雄各半）大鼠随机分成5组,即对照组（A组）、模型组（B组）、刺老苞根皮黄酮低剂量组（C组）、刺老苞根皮黄酮中剂量组（D组）、刺老苞根皮黄酮高剂量组（E组）,每组10只。其中刺老苞根皮黄酮低、中、高剂量组给予刺老苞根皮黄酮相应剂量灌胃（分别为10mg/kg、20mg/kg、30mg/kg）,对照组和模型组以等量的0.9%NaCl溶液灌胃。观察各组灌胃第4天、7天、14天、21天、28天不同时间点其他骨代谢相关参数（碱性磷酸转移酶、骨钙素、羟脯氨酸以及骨盐）变化情况。结果与对照组比较,模型组不同时间点的骨碱性磷酸转移酶（ALP）、骨钙素、羟脯氨酸、骨钙、骨磷含量均降低,差异有统计学意义（P〈0.01）。与模型组比较,刺老苞根皮黄酮各剂量组除骨折第4天外其他时间点的ALP、羟脯氨酸、骨钙、骨磷含量均升高,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）;而刺老苞根皮黄酮各剂量组骨钙素的含量在骨折第14天、第21天及第28天升高,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。与低剂量组比较,中、高剂量组除骨折第4天外其他时间点的骨碱性磷酸转移酶（ALP）、骨钙素、羟脯氨酸、骨钙、骨磷含量均升高,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。与中剂量组比较,高剂量组除骨折第4天外其他时间点的骨碱性磷酸转移酶（ALP）、骨钙素、羟脯氨酸、骨钙、骨磷含量均升高,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论刺老苞根皮黄酮可以改善胫骨骨折大鼠骨代谢状况,有利骨折愈合修复。     

山茱萸萜类甲羟戊酸合成途径关键酶CoHMGS基因的克隆与分析

目的克隆得到山茱萸Cornusofficinalis萜类合成途径的关键酶CoHMGS基因的cDNA序列,并进行相应的生物信息学分析,为深入研究CoHMGS基因的功能奠定基础。方法以山茱萸转录组筛选出的c102453_g2序列为参考序列设计特异引物,以山茱萸叶片总RNA,通过RT-PCR扩增获得CoHMGS基因序列,序列纯化回收后连接到pTOPO-T载体上,转化至大肠杆菌DH10B,选取阳性克隆测序。利用生物信息学软件预测CoHMGS基因及其编码蛋白质的功能。结果克隆得到长度为1645 bp的CoHMGS序列,包含1413 bp的完整开放阅读框,编码470个氨基酸。蛋白整体带负电荷,为不稳定亲水性蛋白,定位于细胞质内,不含跨膜结构。结论首次克隆得到山茱萸CoHMGS基因,对其编码蛋白质进行了初步的分析和预测,为深入揭示CoHMGS基因在山茱萸萜类物质合成途径中的功能奠定了基础。