蛋白质组学在心血管研究中的应用

随着基因组数据库的不断完善和蛋白质组学技术的不断发展，已有越来越多的研究者将蛋白质组学运用到心血管疾病研究中，即运用2—DE、质谱等手段来观察心肌缺血、高血压、心肌肥大、心衰、心肌梗塞导致的心肌细胞蛋白质表达水平和翻译后修饰(PTM)的改变，对这些急慢性心血管疾病的分子机制给予独特的解释。与此同时，各种心血管疾病模型相关蛋白质组数据库也在建设之中，这将大大方便更多的蛋白质组研究。本文综述了近年来使用蛋白质组学在心血管研究中所取得的进展。     

用RACE技术对一株肠道病毒3''端进行扩增和序列分析

目的 应用3′RACE技术对一株本室分离肠道病毒基因组3′末端进行扩增，并对其核苷酸序列进行比较分析。方法 提取病毒总RNA，以锚定oligdT（17）引物进行逆转录，用特异引物及锚定引物进行3′RACE扩增，将PCR产物进行克隆、测序和序列分析。结果 获得了该病毒的3′端核苷酸序列，同源性分析结果显示该肠道病毒的核苷酸序列与肠道病毒76、89、90、91型的同源性最高为90％左右，而与其他型别的肠道病毒的同源性均小于80％；推导的氨基酸同源性与肠道病毒76、89、90、91型均在90％以上。结论 用RACE技术对肠道病毒3′端进行扩增及序列分析，证明该病毒属新型肠道病毒类，为进一步研究该病毒的分子生物学特性奠定了基础。     

新型mucA基因突变的铜绿假单胞菌生物被膜的形成和藻酸盐相关基因表达的研究

目的 确定黏液型铜绿假单胞菌PA17的mum基因突变位点，研究藻酸盐合成相关基因在其生物被膜形成过程中的表达，并观察PAl7生物被膜形成过程和形态。方法 PCR方法扩增铜绿假单胞菌PA17的mueA基因全长并测序；改良平板培养法建立PA17的生物被膜模型，半定量RT-PCR测定生物被膜形成24h、3d．6d时藻酸盐合成相关基因,algD、algU和algR的表达，并进行统计学分析；扫描电镜观察不同时间点的生物被膜形态。结果 PA17的mucA基因第166～333位核苷酸片段缺失，第342位A→G；其藻酸盐相关基因algD和algU均在生物被膜形成过程的第6天表达水平最高，algR在24h表达最高，单因素方差分析显示，上述基因在生物被膜形成过程不同时间点表达的差异有统计学意义；PA17于第6天形成成熟生物被膜，形态为薄膜状。结论 PA17是一株含新型mucA突变基因的黏液型铜绿假单胞菌，其藻酸盐相关基因在生物被膜形成的不同时间点的表达差异具有统计学意义，其生物被膜形态为薄膜状。     

miR-30a-3p靶向NOD1对心肌细胞缺氧复氧损伤的影响

目的　探究miR-30a-3p与NOD1的靶向关系，及其对心肌细胞缺氧复氧损伤的影响和机制。 方法　将细胞分为Ctrl组、H/R组、miR-30a-3p mimic组和miR-30a-3p inhibitor组，经过缺氧复氧处理后，转染相应的miRNA处理细胞，RT-PCR检测miR-30a-3p和NOD1基因表达水平，荧光素酶报告检测miR-30a-3p和NOD1靶向关系，Western blot检测NOD1、p-RPI2、p38 MAPK、NF-κB（p65）、cl-caspase-3蛋白表达水平，CCK8法检测细胞活性，Hoechst检测细胞凋亡，试剂盒检测LDH、CK、MDA、T-SOD水平。 结果　miR-30a-3p表达水平随缺氧复氧处理时间增长而下降，NOD1基因表达水平随缺氧复氧处理时间增长而升高。在荧光素酶报告实验中，NOD1 WT+miR-30a-3p mimic荧光素酶活性显著低于NOD1 WT+NC组。与Ctrl组比较，H/R组miR-30a-3p基因表达水平、细胞活性、T-SOD水平降低，NOD1、p-RPI2、p38 MAPK、NF-κB（p65）、cl-caspase-3蛋白表达水平、LDH、CK、MDA水平、细胞凋亡率升高；与H/R组比较，miR-30a-3p mimic组miR-30a-3p基因表达水平、细胞活性、T-SOD水平升高，NOD1、p-RPI2、p38 MAPK、NF-κB（p65）、cl-caspase-3蛋白表达水平、LDH、CK、MDA水平、细胞凋亡率降低，miR-30a-3p inhibitor组miR-30a-3p基因表达水平、细胞活性、T-SOD水平降低，NOD1、p-RPI2、p38 MAPK、NF-κB（p65）、cl-caspase-3蛋白表达水平、LDH、CK、MDA水平、细胞凋亡率升高。 结论　miR-30a-3p可靶向作用于NOD1，缓解心肌细胞缺氧复氧造成的损伤，其作用机制可能与调控NF-κB信号通路有关。     

初中生自我认同对即时通讯与互联网使用关系的调节作用

目的：考察初中生自我认同对即时通讯与网络成瘾之间关系的调节作用。方法：使用即时通讯服务偏好问卷、自我认同问卷和青少年病理性互联网使用量表对北京市某中学初一年级学生进行调查。结果：即时通讯服务偏好能够显著正向预测病理性互联网的使用；自我认同能够显著负向预测病理性互联网的使用：自我认同对即时通讯与网络成瘾之间关系的调节作用显著，对于高自我认同者，即时通讯不能够显著预测病理性互联网的使用，而对于低自我认同者，即时通讯能够显著正向预测病理性互联网的使用。结论：自我认同完成能够减缓即时通讯与病理性互联网使用之间的正向关系，对个体起到保护作用。     

放射卫生机构在核辐射卫生应急体系作用探讨

分析和探讨放射卫生机构在核辐射卫生应急体系中发挥的作用。通过对比发现,核辐射紧急医学救援基地多由取得放射卫生技术服务（甲级）资质或放射性疾病诊断机构资质的单位承担建设任务。放射卫生机构在平时工作中积累的辐射监测、污染检测、剂量估算、健康效应评价等技术能力可在核辐射卫生应急处置中发挥重要作用,实现能力建设的“平急结合”。建议各级放射卫生机构继续发挥自身所长,通过参加放射卫生监测项目的机会提高自身能力,并积极参与放射卫生技术机构检测能力考核,为核辐射卫生应急工作做好人才和技术储备。     

2018—2021年成都市非EV - A71感染手足口病患者住院费用及其影响因素研究

目的 了解成都市非EV - A71手足口病患者住院费用及其影响因素。方法 通过成都市公共卫生临床中心病案管理系统,收集2018—2021年手足口病住院病人信息。采用秩和检验、多元线性回归分析不同血清型患者费用的影响因素。结果 共纳入2 310例手足口病患者,直接医疗费用中位数为4 187元。秩和检验结果显示,CV - A10患者的住院天数、重症的费用差异有统计学意义（U = - 4.40, - 3.59; P＜0.05）;CV - A16患者的住院天数、高热的费用差异有统计学意义（U = - 4.90, - 2.51; P＜0.05）;CV - A6患者的性别、住院天数、并发症、重症、支付方式的费用差异有统计学意义（U = - 2.81, - 13.54, - 4.00, - 4.28;H = 13.65; P＜0.05）;其他肠道病毒患者的住院天数、并发症、重症、支付方式的费用差异有统计学意义（U = - 7.46, - 3.25, - 2.45;H = 13.14;P＜0.05）;混合感染患者高热的费用差异有统计学意义（U = - 2.40, P＜0.05）。多元线性回归结果显示,除混合感染外,住院天数是所有患者费用的影响因素。在CV - A10、CV - A6和其他肠道病毒中重症患者的费用更高;在CV - A6和其他肠道病毒中有并发症的患者费用更高。高热是混合感染患者费用的影响因素。结论 成都市非EV - A71感染手足口病患者的病毒血清型不同,费用的影响因素也有所不同。     

中学生抑郁症状的影响因素分析

目的 探讨中学生出现抑郁症状的影响因素,建立风险预测的列线图模型,为防控中学生抑郁提供理论依据。方法 采用分层整群抽样的方法,抽取大连市城市和农村中学生共3 470名,使用学生健康行为调查表及抑郁量表进行问卷调查;采用多因素logistic回归分析抑郁症状的影响因素,并建立列线图,预测中学生出现抑郁症状的风险。 结果 中学生的抑郁症状检出率为24.12%,肯定有抑郁症状的检出率为16.22%。遭受校园欺凌（OR = 2.748,95%CI:2.257～3.346）、被家长打骂（OR = 2.025,95%CI:1.679～2.433）、学段（职高:OR = 1.883,95%CI:1.286～2.758;高中:OR = 1.242,95%CI:1.001～1.541）、上网时间越长（≥3 h:OR = 1.773,95%CI:1.366～2.302;2～＜3 h:OR = 1.525,95%CI:1.190～1.954）、女生（OR = 1.352,95%CI:1.141～1.603）、农村地区（OR = 1.351,95%CI:1.126～1.622）均是中学生抑郁症状检出的危险因素;体育课时数多（2 节:OR = 0.685,95%CI:0.504～0.931;≥3 节:OR = 0.583,95%CI:0.425～0.799）、睡眠时间充足（OR = 0.676,95%CI:0.562～0.812）都是中学生抑郁症状检出的保护因素;基于以上影响因素建立的列线图模型具有较好的区分度（一致性指数C - index = 0.700,95%CI:0.680～0.721）和准确度（Hosmer - Lemeshow检验χ2 = 2.885,P = 0.941）。 结论 遭受校园欺凌、被家长打骂、职高或高中、上网时间越长、女生、来自农村地区、体育课时数少、睡眠时间不足的中学生更容易出现抑郁症状,可以利用列线图直观、有效地预测中学生出现抑郁症状的风险,从而有针对性地对高危群体及时采取干预措施。     

基于UHPLC-Q-TOF-MS/MS及谱效学的坤宁颗粒抗凝血活性质量标志物预测

目的：对坤宁颗粒发挥抗凝血活性的质量标志物(Q-Marker)进行预测分析。方法：采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(UHPLC-Q-TOF-MS/MS)对坤宁颗粒的化学成分进行分析,检测条件为Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相乙腈(A)-25 mmol·L^-1乙酸铵水溶液(B)梯度洗脱(0～5 min,5%～22%A;5～10 min,22%～30%A;10～15 min,30%～95%A;15～20 min,95%～5%A;20～30 min,5%A),流速0.2 m L·min^-1,柱温30℃,进样量1μL;电喷雾离子源(ESI),正、负离子检测模式。通过网络药理学方法对化学成分的靶点与异常子宫出血(AUB)的靶点进行交互分析,利用网络拓扑分析筛选出关键成分;通过高效液相色谱法(HPLC)建立10批坤宁颗粒的指纹图谱,采用血液凝固法及纤维蛋白原平板法测定坤宁颗粒的抗凝血活性,建立其谱效关系;选择拓扑分析与谱效关系中共有的成分作为Q-Marker,并对其...     

基于UPLC-Q-TOF-MS的建昌帮砂仁陈皮制熟地黄适宜炮制时间分析

目的：研究建昌帮砂仁陈皮制熟地黄炮制过程中差异代谢物和苷类分解产物还原糖的相对含量变化,为揭示该特色品种的炮制原理奠定基础。方法：以建昌帮砂仁陈皮制熟地黄的0～54 h炮制过程样品为研究对象,运用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法（UPLC-Q-TOF-MS）检测其次级代谢产物,以0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相进行梯度洗脱（0～1 min,1%～3%B;1～10 min,3%～9%B;10～15 min,9%～12%B;15～22 min,12%～18%B;22～31 min,18%～24%B;31～35 min,24%～100%B;35～36 min,100%～5%B;36～40 min,5%～1%B;40～45 min,1%B）,柱温40℃,进样量3μL,流速0.3 mL·min-1;运用电喷雾离子源（ESI）,在负离子模式下进行扫描并采集MS数据,扫描范围m/z 50～1 250,利用PeakView 1.2进行数据分析,结合文献信息及化学成分数据库对砂仁陈皮制熟地黄化学成分进行鉴定;MS数据通过MarkerView 1.2归一化处理后应用多元统计分析方法找出差...