Synthesis and physico‐chemical properties of peptides in soil humic substances

Abstract: Soil humic substances (HS) are heterologous, polydispersive, and multi‐functional organometallic macromolecules ubiquitous in soils and sediments. They are key players in the maintenance of the belowground ecosystems and in the bioavailability of both organic and inorganic contaminants. It is widely assumed that the peptidic substructures of HS are readily degraded and therefore do not contribute significantly to interactions with contaminants such as toxic metals. To investigate the turnover of humified peptides, laboratory soil aging experiments were conducted with ¹³C‐glucose or ¹⁵N‐nitrate for 8.5 months. Evidence for random‐coil peptidic structures in the labeled HS was obtained from 2‐D nuclear magnetic resonance (NMR), pyrolysis gas chromatography‐mass spectrometry (pyro‐GC‐MS), and circular dichroism data. Interaction of metals with the peptidic carbonyls of labeled HS was rationalized from the solid‐state NMR data. Detailed ¹³C and ¹⁵N labeling patterns of amino acid residues in the acid hydrolysates of HS acquired from NMR and GC‐MS revealed two pools of peptides, i.e. one extant (unlabeled) and the other, newly humified with little isotopic scrambling (fully labeled). The persistence of pre‐existing peptidic structures indicates their resistance to degradation while the presence of fully labeled peptidic amino acids suggests wholesale incorporation of newly synthesized peptides into HS. These findings are contrary to the general notion that humified peptides are readily degraded.     

人单核巨噬细胞泡沫化抑制剂筛选模型的建立及应用

目的: 建立人单核巨噬细胞泡沫化抑制剂筛选模型,筛选得到可抑制细胞泡沫化的抑制剂.方法: U937单核细胞经100 nmol·L-1佛波酯(PMA)诱导72 h分化为巨噬细胞后,换无血清培养液于96孔板中,每毫升含巨噬细胞1×106个,每孔再加入80 mg·L-1氧化的低密度脂蛋白(ox-LDL),37 ℃培养48 h,建立单核巨噬细胞泡沫化模型.利用微生物发酵液,或单一的化合物样品与其共孵育,油红.染色后观察细胞胞内变化,寻找对泡沫细胞形成有抑制作用的样品.利用基因工程技术表达的人清道夫受体A类II型的胞外部分,在本模型中可抑制巨噬细胞泡沫化的形成,进一步验证了模型的可行性.结果: 从2000 个微生物发酵液中筛选到6株微生物发酵液为阳性,从10个化合物中发现一个有抑制巨噬细胞泡沫化活性的新化合物.结论: 本模型可用于细胞泡沫化抑制剂的高通量筛选.     

妊娠晚期人类小DNA病毒B19感染情况,母婴传播及与早产或小于胎龄儿关系的研究

为了解妊娠晚期人类小ＤＮＡ病毒Ｂ１９（ＨＰＶＢ１９）感染情况、母婴传播及与早产或小于胎龄儿的关系，将１０４例母亲及其新生儿分成两组，试验组包括１９例早产儿、３２例小于胎龄儿及其母亲；对照组包括５３例正常新生儿及其母亲。采用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）检测母血、脐血和胎盘组织ＨＰＶＢ１９ＤＮＡ；用鼠抗Ｂ１９单克隆抗体和Ｂ１９联合抗原（ＶＰ１＋ＶＰ２）建立了捕获式ＥＬＩＳＡ法检测母血和脐血ＨＰＶＢ１９特异性ＩｇＭ抗体。结果：１０４例母血中，ＨＰＶＢ１９ＩｇＭ阳性２例（１．９％），１０４例脐血中阳性３例（２．９％）。在母血、脐血及胎盘组织各１０４例中检出ＨＰＶＢ１９ＤＮＡ阳性分别为６例、４例、６例。因此试验组５１对母婴共１０２例中６例有ＨＰＶＢ１９感染（５．９％）；对照组５３对母婴共１０６例中２例有ＨＰＶＢ１９感染（１．９％）。两组Ｂ１９感染率差异无显著意义。提示：在北京地区，妊娠晚期存在Ｂ１９急性感染，应引起重视；Ｂ１９感染与早产或小于胎龄儿的发生可能不相关；新生儿Ｂ１９感染是通过胎盘传播的。对有Ｂ１９感染证据的新生儿进行随访及研究如何阻止胎盘传播很重要。     

儿童期单纯肥胖症的行为治疗

为研究适合中国肥胖儿童的行为治疗方案及效果，对２４例（男女各１２例）１３岁单纯肥胖儿童进行３年行为治疗纵向研究。２４名同年龄、性别、年级非肥胖儿童为正常对照组。观测参数有身高、体重、四处皮脂、腰、臀围及其比例、有氧运动能力（最大耐受时间和运动距离）。体育测试成绩包括引体向上、跳远、８００米跑、仰卧起坐，满分为３０分。按运动处方每天运动２小时，每周５天。在医生指导下肥胖儿童写行为分析和行为矫正方案。有关肥胖指标年减少率（男／女）体脂含量为２３％～４２％，肥胖度２．８％～２．１％，腰／臀比２．５％～２．６％，四处皮脂和５．７％女０．８％～１．０％），有氧能力明显进步。体育成绩肥胖干预组３０％达满分，７０％为２７～２９分。肥胖对照组６０％为２０分，３０％为１５～１９分。提示儿童期单纯肥胖症的干预方案应以健康教育和运动处方为基础，行为治疗为核心技术；在家庭日常生活中持续进行，家长、教师、医务人员应共同参与。     

长期应用小剂量米非司酮对子宫内膜形态和雌、孕激素受体的影响

本文利用HE染色和免疫组化方法结合计算机辅助图象分析技术观察了长期服用小剂量米非司酮对子宫内膜形态和雌、孕激素受体（ER、PR）的影响，15例子宫肌瘤患者于早卵泡期服用来非司酮（10例，10mg／日；5例，20mg／日）治疗，1～3个月后取内膜，另10例肌瘤患者取内膜作对照。结果：用药后所有的患者均闭经，内膜变薄，发育不良，无周期性改变，大部分基质致密，基质与腺体发育不同步，同时相间存在增殖与分泌期样改变，以增殖期样改变为主，腺体以分泌期样改变为主，腺体大小形态不一，但分泌不良。免疫组化显示内膜ER、PR明显分布不均，图象分析结果表明用药后内膜ER、PR相当于对照组增殖早中期水平。结果表明每日10mg米非司酮可明显抑制排卵并影响内膜成熟，在无孕激素存在的情况下，米非司酮有微弱的孕激素样作用。     

复方蚁酒的抗炎补肾阳作用研究

复方蚁酒能明显抑制二甲苯、琼脂引起的小鼠耳、足肿胀、抑制蛋清引起的大鼠足肿胀和佐剂性关节炎，并能对抗氢化考的松引起的肾阳虚症，同时还具有增强免疫功能的作用。     

乳腺癌肿瘤血管生成的临床病理学意义

肿瘤血管生成（ＴｕｍｏｒＡｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ，ＴＡ）是目前肿瘤研究的重要课题，其研究目的在于探讨ＴＡ的预后价值以及预测肿瘤对抗血管生成药物的反应。本文应用第八因子相关抗原多克隆抗体对６５例乳腺浸润性导管癌（以下简称乳腺癌）进行了微血管的定量研究。结果显示：腋下淋巴结阳性病例组织的微血管密度（ＭｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌＤｅｎｓｉｔｙ，ＭＶＤ）（１２９．７±４４．９）明显高于腋下淋巴结阴性（ＮｏｄｅＮｅｇａｔｉｖｅＢｒｅａｓｔＣａｎｃｅｒ，ＮＮＢＣ）病例组的ＭＶＤ（７９．６±３３．６），差异呈极显著性（Ｐ＜０．００１）；发生术后复发及远处转移的病例的ＭＶＤ均值高达１４５．３；以上结果提示乳腺癌ＭＶＤ与肿瘤转移、复发均密切相关。我们认为乳腺癌ＭＶＤ可反映其血供状态，ＭＶＤ高的病例微血管丰富，肿瘤组织生长快，癌细胞易于进入微循环而发生转移     

ODC反义寡核苷酸对K562细胞生长抑制作用

鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)是催化多胺生物合成的限速酶.过去的研究表明多胺在维持肿瘤恶性表型中起着重要作用.用ODC不可逆抑制剂抑制多胺生物合成不仅能抑制肿瘤细胞的增殖而且还诱导细胞分化.近年我们采用反义技术,以ODC反义RNA转染肿瘤细胞,通过对ODC表达的封闭,成功地使其恶性表型得到了逆转.提示抑制肿瘤细胞的多胺合成可能是抗癌的有效途径.本文用ODC反义寡核苷酸控制肿瘤细胞的多胺生物合成,观察了其对K562细胞生长特性的影响,以期为ODC反义寡核苷酸在肿瘤临床的应用提供实验依据.     

PTEN蛋白和CyclinD1在垂体瘤中的表达和相关性研究

目的:探讨垂体瘤中抑癌基因PTEN和CyclinD1表达的临床意义。方法:应用免疫组织化学技术检测56例垂体肿瘤,5例正常垂体组织中PTEN和CyclinD1蛋白的表达情况。结果:5例正常垂体组织和22例非侵袭垂体瘤中PTEN表达阳性率和强阳性率比34例侵袭性垂体瘤中PTEN的强阳性率和阳性率强度明显增加,有显著性差异(P<0.01)。正常垂体组织和非侵袭性垂体瘤细胞内CyclinD1蛋白表达较弱,甚至不表达,侵袭性垂体瘤细胞内CyclinD1的表达率和强度明显增加(P<0.01),并且发现在PTEN蛋白表达显著减少的病例中伴随CyclinD1蛋白表达增加,经过相关性分析发现两者呈显著性相关关系(P<0.05)。结论:抑癌基因PTEN的失活和CyclinD1蛋白表达增加与垂体瘤的侵袭性有一定的相关性。