不可逆性电穿孔介导HPV16 E6 shRNA干扰质粒对宫颈癌SiHa细胞增殖的影响

目的:探讨利用治疗剂量脉冲电场产生不可逆电穿孔(IRE)介导HPV16 E6 shRNA干扰质粒进入细胞的可行性,阐明二者共同作用对宫颈癌SiHa细胞增殖的影响及其作用机制。方法:将HPV16 E6基因特异性干扰序列插入pGenesil-1质粒,构建HPV16 E6 shRNA真核表达载体,将10个电压为800 V、脉宽100 μs、频率1 Hz的IRE作用于SiHa细胞与HPV 16 E6 shRNA干扰质粒的混悬液,根据处理因素组合,分为空白对照组、IRE处理组、pGenesil-N组、pGenesil-N+IRE组、pGenesil-E6组和pGenesil-E6+IRE组。在荧光显微镜下观察SiHa细胞绿色荧光蛋白(GFP)的表达,计算GFP表达效率;RT-PCR法检测HPV 16 E6 mRNA表达水平,Western blotting法检测HPV16 E6蛋白、P53及PCNA蛋白表达水平,CCK-8法检测各组SiHa细胞增殖能力的变化。结果:成功构建HPV16 E6 shRNA真核表达载体,IRE处理后24 h细胞即可见到绿色荧光;与IRE组比较,pGenesil-E6+IRE组E6 mRNA表达水平下降(P<0.05),E6蛋白表达水平降低(P<0.05),P53蛋白表达水平增高(P<0.05),PCNA表达水平下降(P<0.05);CCK-8法检测,与pGenesil-E6组比较,pGenesil-E6+IRE组细胞增殖活性下降更明显(P<0.05)。结论:治疗剂量的IRE可介导外源基因进入细胞,二者联合作用能明显抑制宫颈癌SiHa细胞增殖。     

白玉散联合经方医药治疗不同证型黄褐斑患者临床研究

目的对比局部外敷白玉散联合经方医药口服治疗不同证型黄褐斑患者的临床效果。方法治疗组与对照组黄褐斑患者依据证型分为肝郁气滞证、肝肾阴虚证、脾虚湿热证、气滞血瘀证组,治疗组各个证型患者采用白玉散外敷每周2次同时辨证施治口服经方医药分别为:丹栀逍遥散、六味地黄汤、参苓白术散、桃红四物汤,对照组依据证型口服经方医药同治疗组,两组均为每日一剂水煎服,4周为1个疗程,3个疗程后对比观察疗效。结果经成组设计两样本比较的秩和检验,治疗组与对照组疗效比较差异有统计学意义(z=-5.24,P<0.001),治疗组疗效好于对照组。经成组设计多样本比较的秩和检验,治疗组中各证型间疗效总的说来,差异有统计学意义(χ2=8.39,P=0.039),经采用扩展t检验进行两两比较,肝郁气滞证、脾虚湿热证、气滞血瘀证组的疗效均好于肝肾阴虚证组;肝郁气滞证、脾虚湿热证、气滞血瘀证组3个组间疗效的差异无统计学意义。同一证型疗效的比较,治疗组与对照组肝郁气滞证组、脾虚湿热证组、气滞血瘀证组疗效差异有统计学意义,治疗组好于对照组;肝肾阴虚证在治疗组与对照组疗效差异无统计学意义(P>0.05)。对照组中各证型间疗效的差异无统计学意义(χ2=2.19,P=0.534)。结论白玉散联合经方医药治疗肝郁气滞证、脾虚湿热证、气滞血瘀证黄褐斑患者效果较好。     

抗心磷脂抗体与脑血管病关系的临床研究

目的：探讨抗心磷脂抗体与急性脑血管病的关系。方法;用酶联免疫吸附试验对１７６例急性脑血管病患者和９８例健康对照者进行ＡＣＡ检测。结果;发现脑血管病各组ＡＣＡ阳性率明显增高,与对照组比较有显著性差异。     

内蒙古地区蒙汉族非小细胞肺癌放疗前后免疫功能变化的临床研究

摘要 目的 比较内蒙古地区蒙汉族非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC) 患者放疗前后淋巴细胞亚群计数及TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10含量的变化,并探讨放疗对内蒙古地区蒙汉NSCLC患者机体免疫功能的影响。方法 收集2015年10月至2017年10月就诊内蒙古医科大学附属医院行放疗的NSCLC患者共60例,其中蒙古族患者20例,汉族患者40例。采集放疗前后患者血清,利用流式细胞仪检测T淋巴细胞及其亚群、NK细胞计数,ELISA法检测TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10含量,统计分析放疗前后蒙汉族之间各免疫指标的差异以及同一民族内部各指标的改变与放疗的关系。结果 对蒙汉族NSCLC患者放疗前后机体免疫状态进行分析,发现放疗前蒙古族患者的NK细胞计数高于汉族患者的NK细胞计数,两者之间具有统计学差异（P=0.038）,其余检测指标在蒙汉族之间差异均无统计学意义（P>0.05)。在放疗后分析发现,汉族患者 IL-1β水平高于蒙古族患者,差异具有统计学意义（P=0.007）,但是其他免疫指标改变均无统计学差异（P>0.05)。同时,对蒙古族NSCLC患者放疗前后自身机体免疫指标的检测发现,与放疗前相比较,在放疗后患者的Ｔh细胞计数（P=0.013）和Th/Tc细胞比率（P=0.049）均降低,血清中IL-6（P=0.003）、IL-1β（P=0.001）、IL-10（P=0.001）的表达也降低。在汉族NSCLC患者放疗前后机体免疫状态分析后发现,其治疗前后总Th细胞（P=0.002）、IL-6（P=0.001）、IL-10（P=0.004）变化改变有统计学差异。 结论 本研究通过检测内蒙古地区蒙汉族NSCLC患者放疗前后淋巴细胞亚群计数及血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10的表达,证实蒙汉族NSCLC患者免疫功能具有差异,同时放疗对蒙汉族NSCLC患者免疫功能产生不同的影响,但仍需扩大样本量进一步探讨放疗对两者之间不同免疫通路的影响机制。     

系统性红斑狼疮患者外周血OX40和OX40L分子的表达

目的探讨OX40和OX40L分子在系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血T淋巴细胞和单核细胞上的表达及其在SLE发病机制中的可能作用。方法采用流式细胞术检测26例SLE患者和15例健康志愿者外周血T细胞上OX40和单核细胞上OX40L的表达水平。结果 SLE患者外周血CD4＋T细胞OX40表达水平为8.91±5.07,显著高于正常对照组（3.46±1.72）（P〈0.05）,而CD8＋T细胞OX40表达水平为3.89±1.94,与对照组（3.34±1.44）的差异无统计学意义（P〉0.05）;外周血单核细胞上OX40L表达水平（31.23±10.05）显著高于正常对照组（21.01±6.92）（P〈0.05）。结论 SLE患者外周血T细胞和单核细胞上存在OX40和OX40L的异常表达,提示OX40/OX40L信号在T细胞与单核细胞相互作用过程中可能有助于T细胞的持续活化,从而参与SLE的发生发展。     

中国发展护理博士教育之思考

护理博士教育在我国刚刚起步,课程设置尚待完善,培养目标定位有待商榷,师资力量相对薄弱,但其强劲的发展势头已经初露端倪。所以,为建立完善的、专业特色鲜明的护理博士教育学科体系,建立能激励创新和自由探索的培养机制,实现高水平护理博士教育质量的目标,文中从护理博士的导师队伍建设、招生与培养、课程设置与体系、学位类型与研究领域等4个方面进行分析思考,并提出了合理化建议,为发展国内护理博士教育提供参考。     

我国社区首诊和双向转诊研究的文献分析

目的 了解我国社区首诊和双向转诊的研究现状.方法 通过对2007年及以前收录于中国医院知识仓库中的关于"双向转诊"、"社区首诊"和"双诊制"的文献内容进行分析,明确我国社区首诊和双向转诊的研究现状.结果 文献内容分布:关于双向转诊的297篇,社区首诊的93篇,双诊制的3篇;时间主要集中在近两年.双向转诊文献内容以政策新闻报道和现状分析与对策讨论为主,社区首诊文献更是以报纸报道为主,涉及病种和具体机制研究的文献明显不足,双诊制相关文献非常少.结论 目前我国社区卫生服务的研究还比较基础,社区首诊和双向转诊的研究亟须加强.     

唾液蛋白与脾肾两虚、气血不足的关系

实验表明,脾肾两虚、气血不足患者唾液蛋白明显下降,与正常人相比差异明显(P<0.01);脾肾两虚患者唾液蛋白与血浆白蛋白及总蛋白量成正相关性,气血不足患者唾液蛋白与血色素、红细胞量亦成正相关性。     

稳定表达人MCHR2的SH-SY5Y细胞系的建立

目的：构建黑色素浓集激素受体2（MCHR2）/增强型绿色荧光蛋白（EGFP）融合蛋白真核表达载体pEGFPN1-MCHR2,转染人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y,建立稳定表达人MCHR2的SH-SY5Y细胞系MCHR2-SH-SY5Y。方法：采用聚合酶链反应(PCR)法从人胎脑cDNA文库扩增MCHR2全长cDNA片段。用基因重组方法将其克隆到质粒pEGFPN1,构建真核表达载体pEGFPN1-MCHR2,并用Lipofectamine^TM转染到SH-SY5Y细胞,通过G418筛选,建立稳定表达MCHR2的MCHR2-SH-SY5Y细胞系,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blotting检测MCHR2的表达并用激光共聚焦显微镜观察融合蛋白亚细胞定位。结果：扩增出人MCHR2全长cDNA;成功构建真核表达载体pEGFPN1-MCHR2;RT-PCR、Western blotting检测到MCHR2-SH-SY5Y细胞MCHR2的表达,激光共聚焦显微镜观察转染pEGFPN1-MCHR2的MCHR2-SH-SY5Y细胞融合蛋白定位于细胞膜,而转染空质粒pEGFPN1的SH-SY5Y细胞EGFP定位于细胞质。结论：成功建立稳定表达人MCHR2的MCHR2-SH-SY5Y细胞株。     

酶法检测59例尸体脏器硅藻的结果分析

目的探讨酶法硅藻检验制片新技术和防止污染措施,提高检验质量。方法用胰蛋白酶消化法对59例硅藻检验案例进行检验并分析其结果。结果硅藻检验阳性结果准确率为93．7％。阴性检验结果准确率为82％,总体准确率为91．5％。结论酶消化硅藻检验技术简便、检出率高、结果稳定可靠,有利于提高硅藻检验的质量。