粉防己碱逆转大肠癌耐药细胞株LOVO/5-Fu多药耐药性的实验研究

目的 探讨粉防己碱(tetrandrine,Tet)逆转人大肠癌多药耐药细胞LOVO/5-Fu的多药耐药性(multidrug resistance,MDR)及其机制.方法 Tet作用于LOVO/5-Fu细胞48 h后,用噻唑蓝法检测LOVO/5-Fu细胞耐药性,流式细胞术检测细胞凋亡、周期变化及其p-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达水平,实时荧光定量PCR检测各组细胞MDR1 mRNA表达水平,Western blot检测各组细胞P-gp蛋白的表达水平.结果 经过Tet作用48 h后,大肠癌LOVO/5-Fu细胞株的IC50降低为(4.15±0.31)μg/ml(P＜0.05),细胞凋亡率增加为(3.44%±0.28%)(P＜0.05),MDR1 mRNA转录水平降低为(570 ±85)(P＜0.05),P-gp的表达水平下降.结论 Tet能逆转大肠癌多药耐药细胞LOVO/5-Fu的MDR,其机制可能是抑制MDR1基因的表达,使P-gp的表达降低,从而增强了LOVO/5-Fu细胞对5-Fu的敏感性.

Abstract：

Objective To explore the reversal effect on MDR1 gene-mediated multidrug resistance in human colon carcinoma LOVO/5-Fu cells by tetrandrine ( Tet) and to clarify its molecular mechanism.Methods LOVO/5-Fu cells were treated for 48 h with Tet.Drug sensitivity was measured by MTT.The cell cycle, apoptosis of cells and expression of P-glycoprotein (P-gp) were determined by flow cytometry assay.Expression of MDR1 mRNA was detected by real-time quantitative PCR (real-time PCR).P-gp expression was detected by Western blot.Results After LOVO/5-Fu cells were treated for 48 h with Tet, the IC50 of 5-Fu decreased to ( 4.15 ± 0.31 ) μg/ml ( P ＜ 0.05 ) ; and the apoptotic rate increased to (3.44% ± 0.28% ) ( P ＜ 0.05) ; the expression of MDR1 mRNA reduced to (570 ± 85) (P ＜ 0.05 ).Conclusions Tetrandrine reverses MDR1 gene-mediated multidrug resistance in human colon carcinoma LOVO/5-Fu cells possibly by inhibiting the expression of MDR1, decreasing the expression of P-gp, thus enhancing the sensitivity of LOVO/5-Fu cells to 5-fluorouracil.     

磷酸肌酸对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注时细胞凋亡的影响

目的 探讨磷酸肌酸对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注时细胞凋亡的影响.方法 雄性SD大鼠,体重150～170 g,采用高脂饲养联合腹腔注射链脲佐菌素的方法制备糖尿病模型,造模成功的27只大鼠饲养2周后,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=9):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)和磷酸肌酸组(PP组).I/R组和PP组采用结扎左冠状动脉前降支30 min再灌注2 h的方法制备心肌缺血再灌注模型,PP组于缺血前30 min腹腔注射磷酸肌酸1g/kg,I/R组给予等容量生理盐水.再灌注2 h时采集静脉血样,测定血浆肌钙蛋白T(cTnT)的浓度,然后处死大鼠,取心肌组织,采用免疫组化法测定Bcl-2、Bax和Caspase-3表达的水平,并计算Bcl-2与Bax表达的比值(Bcl-2/Bax 比),采用TUNEL染色法检测细胞凋亡情况,计算凋亡指数(AI);电镜下观察心肌细胞超微结构.结果 与S组比较,I/R组血浆cTnT浓度升高,心肌组织Bcl-2、Bax和Caspase-3表达上调,Bcl-2/Bax比降低,AI升高(P＜0.05或0.01);与I/R组比较,PP组血浆cTnT浓度降低,心肌组织Bcl-2表达上调,Bax和Caspase-3表达下调,Bcl-2/Bax比升高,AI降低(P＜0.01).PP组心肌病理学损伤程度轻于I/R组.结论 磷酸肌酸可抑制细胞凋亡,从而减轻糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制与上调Bcl-2表达、下调Bax和Caspase-3的表达有关.

Abstract：

Objective To investigate the effects of phosphocreatine on apoptosis following myocardial ischemia-reperfusion (I/R) in diabetic rats. Methods Male SD rats weighing 150-170 g were used in this study.Diabetes mellitus was induced by high fat diet and intraperitoneal streptozotocin. Twenty-seven rats in which diabetes mellitus was successfully induced were randomly divided into 3 groups ( n = 9 each): sham operation group (group S);myocardial I/R group(group I/R )and phosphocreatine group (group PP). Myocardial I/R was induced by 30 min occlusion of left anterior descending branch of coronary artery followed by 2 h reperfusion in I/R and PP groups. In group PP phosphocreatine 1 g/kg was given intraperitoneally 30 min before myocardial I/R. Blood samples were collected at the end of 2 h reperfusion for determination of plasma concentration of calcium troponin T (cTnT). The animals were then sacrificed and iscbemic myocardial specimens were isolated. The expression of Bcl-2, Bax and Caspase-3 in isehemic myocarcdium was determined and Bcl-2/Bax ratio was calculated. Myocardial apoptosis was detected by TUNEL and apoptotic index was calculated. The ultrastructure of cardiomyocytes was examined with electron microscope. Results Myocardial I/R significantly increased plasma cTnT concentration and Bcl-2, Bax and Caspase-3 expression in myocardium and apoptosis index and decreased Bcl-2/Bax ratio. Phosphocreatine significantly attenuated I/R-induced above-mentioned changes and myocardial damage. Conclusion Phosphocreatine can reduce myocardial I/R injury in diabetic mellitus rats by reducing myocardial apoptosis through up-regulation of Bcl-2 expression and down-regulation of Bax and Caspase-3 expression.     

谷氨酰胺对2型糖尿病大鼠血糖和胰岛素抵抗的影响

目的 观察L-谷氨酰胺对2型糖尿病大鼠血糖变化和胰岛素抵抗的影响并探讨可能机制.方法 SD雄性大鼠47只,按随机数字表法分为4组:空白对照组(C组)10只、谷氨酰胺(glutamine,Gln)组(Gln组)10只、2型糖尿病组(DM组)12只、2型糖尿病+谷氨酰胺组(DM+Gln组)15只.实验动物分组饲养,2型糖尿...     

经腹腔镜经肛门括约肌间直肠切除结肠肛管吻合术治疗超低位直肠癌13例

目的 探讨经腹腔镜经肛门括约肌间直肠切除结肠肛管吻合术对超低位直肠癌保肛手术的治疗效果.方法 从2005年6月到2007年12月期间对13例患者施行该手术.其中男8例,女5例,平均年龄53岁(41～69岁).肿瘤距离肛缘均小于5 cm.结果 13例手术全部成功,无手术死亡,无吻合口漏发生.随访时间为1～30个月,平均随访17个月,1例盆腔复发,1例肝转移;无戳孔种植转移,术后6个月肛门括约肌功能达优良者9例.结论 经腹腔镜经肛门括约肌间直肠切除结肠肛管吻合术是治疗超低位直肠癌的一种微创、安全、疗效可靠、肛门括约肌功能满意的较理想保肛手术.     

大隐静脉转流术治疗髂股静脉栓塞

目的：总结大隐静脉转流术治疗髂股静脉栓塞的临床应用经验。方法：1998年9月至2005年12月，应用大隐静脉转流术治疗6例髂股静脉栓塞，男5例，女1例；年龄36~52岁，平均41岁；均为单侧股和小腿肿胀，伴有疼痛。从对侧切取正常的大隐静脉，经耻骨上隧道转移至患侧，在髂股静脉栓塞段以远与股静脉或大隐静脉近端吻合，将患侧静脉血经大隐静脉引流至对侧股静脉。结果：手术顺利，术后仅1例供区伤口发生表浅感染，经换药处理愈合。随访1—3．5年，平均1．8年，所有患者疼痛消失，水肿明显减轻，但仍有轻度肿胀。结论：大隐静脉转流术是治疗髂股静脉栓塞的有效方法。手术操作相对简单和安全。     

微泡介导下超声开放血脑屏障的新进展

目的血脑屏障通过紧密连接和代谢屏障阻止大分子物质的自由通过，维持中枢神经系统内环境的稳定。但是这一功能却阻止了具有潜在治疗作用的大分子药物通过血脑屏障，降低了药物的疗效。近期研究显示，微泡介导下超声能有效开放血脑屏障，本文就这一新技术的研究进展作一综述。     

Survivin蛋白在肝门部胆管癌中的表达及其与p53相关性的研究

目的：检测肝门部胆管癌中凋亡抑制因子Survivin蛋白的表达，研究其与肝门部胆管癌的临床特征的关系，并探讨其与p53的相关性。方法：采用免疫组织化学方法检测86例肝门部胆管癌组织、10例癌旁组织（距肿瘤边缘约1．0cm）及10例正常胆管组织中Survivin蛋白和p53蛋白的表达，结合临床病理学资料进行统计学分析。结果：86例肝门部胆管癌组织中，Survivin蛋白阳性率为82．6％（71／86），p53蛋白阳性率为76．7％（66，86），Survivin与p53在癌旁组织和正常胆管组织中均呈阴性表达，与癌组织相比差异有统计学意义（P〈O．05）；Survivin表达与肝门部胆管癌病理分级、Bismuth分型、患者的性别及年龄和肿瘤大小均无关（P〉0．05），但淋巴结转移阳性组Survivin蛋白表达水平明显高于淋巴结转移阴性组，差异有统计学意义（P〈0．05）；p53蛋白在肝门部胆管癌中与肿瘤组织病理分级、淋巴结有无转移相关（P〈0．05），与其他病理学特征无关（P〉O．05）。71例Survivin阳性表达者中同时表达p53阳性者58例，15例阴性表达者中表达p53阳性者8例，两者差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：肝门部胆管癌组织中Survivin和p53的表达显著高于癌旁组织和正常胆管组织，其在肝门部胆管癌的发展、转移过程中可能具有重要作用。     

CT引导下经皮穿刺臭氧消融治疗腰椎间盘突出症

目的 探讨CT引导下经皮穿刺椎间盘内、外注射臭氧治疗腰椎间盘突出症的疗效.方法 在CT导向下经皮穿刺盘内注射医用臭氧(60 mg/L)5～10 ml、盘外(椎间孔)注射医用臭氧(40 mg/L)10 ml治疗腰椎间盘突出症38例.结果 38例随访6个月,按照改良MacNab疗效评定标准进行评定:优15例,良21例,差2例,优良率94.5%.结论 CT引导下经皮穿刺臭氧注射治疗腰椎间盘突出症具有定位准确、操作简单、疗效确切、并发症少等优点.     

镍钛记忆合金网状支架在前列腺增生中应用

目的：探讨对年老体弱高危前列腺增生排尿困难患者简单有效的治疗方法。方法：采用国产镍钛记忆合金网状支架置入前列腺增生梗阻部位。结果：250例高危前列腺增生性排尿困难患者经置入镍钛记忆合金网状支架后 ,84.2%患者排尿比较满意,尿流率及剩余尿量明显改善。结论：网状支架置入法是治疗并发严重心、肺、脑血管疾病不能耐受开放性手术及电切术的前列腺增生排尿困难患者的有效方法,对前列腺中叶增生较大及神经源性膀胱者效果欠佳。     

乳腺外佩吉特病七例报告

目的 对乳腺外佩吉特（Paget)病的临床表现、治疗方法及其预后进行分析。方法 对收治的7例乳腺外Paget病例资料进行回顾性分析。结果 3例有腹股沟淋巴结转移的患者均在5年内死亡,无腹股沟淋巴结转移者均存活。结论 乳腺外Paget病首选手术切除。一旦有淋巴结转移,其5年生存率极低。