起始密码下游序列与16srRNA3′端序列的匹配性对基因表达效率的影响

目的 :研究起始密码下游序列与 16srRNA 3′端 +146 9——— +1482局部序列间的匹配关系对基因表达效率的影响。方法 :我们一方面对人IL_2、人IL_8、人IL_6 ,人GM_CSF、人G_CSF、人IL_1ra、人IL_9等全长cDNA序列及 5′末端局部序列与 16srRNA 3′端 +146 9——— +1482序列进行匹配性进行分析 ,寻找序列匹配性与表达效率间的关系 ;另一方面 ,对人IL_6、人GM_CSFcDNA 5′端序列进行沉默突变 ,增强其与 16srRNA 3′端 +146 9——— +1482序列间的匹配性 ,并克隆入pKpL4表达型质粒载体 ,通过大肠杆菌进行表达 ,实验验证序列匹配性与基因表达效率的关系。结果 :分析发现起始密码下游局部序列与 16srRNA 3′端 +146 9——— +1482核酸匹配性越好 ,则目的蛋白表达效率越高 ;目的基因编码区内与 16srRNA 3′ +146 9——— +1482间的最大匹配区域越靠近 5′末端 ,目的蛋白表达效率越高。通过对人IL_6、人GM_CSFcDNA 5′末端序列进行沉默突变 ,改善其与 16srRNA 3′端 +146 9——— +1482序列的匹配性后 ,目的蛋白的表达量均呈不同程度地提高。结论 :提高起始密码下游序列与 16srRNA 3′端 +146 9——— +1482局部序列间的匹配性 ,可增强目的基因的表达效率。     

星形细胞瘤中PTEN和CB表达与侵袭性的关系

目的 探讨ＰＴＥＮ和组织蛋白酶－Ｂ（ＣＢ）表达与星形细胞瘤恶笥程度和侵袭性的关系。方法 应用免疫组化方法检测５６例星形细胞瘤标本中ＰＴＥＮ和ＣＢ的表达,分析其与肿瘤恶笥程度和侵袭性的关系。结果 ＰＴＥＮ阳性染色主要定位于细胞质中,５６例星形细胞瘤中ＰＴＥＮ阳性表达３４例（６１％）,高分化组（Ⅰ和Ⅱ组）２３／２７例（８５％）和低分化组（Ⅲ和Ⅳ级）１１／２９例（３８％）之间差异显,明显高于低分化组（     

有否静脉溶栓的急性心肌梗死63例尸解病理分析

探讨溶栓治疗的并发症。方法急性心肌梗死住院死亡并行尸体解剖６３例,２６例曾给予溶栓治疗,３７例行常规治疗。结果两组性别、年龄、ＣＨＤ的危险因素,梗死次数,心肌酶学、梗死部位及血管狭窄程度均无明显差异。结论ＡＭＩ早期溶栓治疗心脏破 发生率较非溶栓组明显升高。     

MTT显色反应实验条件分析

目的 :检验分析MTT实验方法本底高、灵敏度低、稳定性差的影响因素 ,改进实验条件提高灵敏度和稳定性 ,降低本底。方法 :用MTT比色方法 ,细胞毒试验及细胞增殖实验 ,分析比较不同条件下MTT显色反应的性能特点。结果 :比较了 13种溶剂对Formazan的溶解性能。分析检验了琥珀酸脱氢酶在细胞上的分布特点、pH值对MTT反应体系的影响、酚红和牛血清对检验结果的影响 ,提出相应对策。检测了MTT反应时间曲线和细胞活力曲线。分析了改进后的MTT实验方法的灵敏度和稳定性。结论 :以MTT为底物的酶在细胞代谢中主要分布在细胞膜表面。MTT反应体系的pH值为 6 7,比较好的Formazan溶剂是正丙醇、异丙醇和乙二醇乙醚。去掉细胞培养上清 ,检测细胞上的酶 ,用溶剂使蛋白质变性 ,经沉淀去掉蛋白质影响 ,能使MTT实验方法的本底降低 ,灵敏度提高。通常情况下该方法检测K 5 62细胞和人淋巴细胞的灵敏度分别为 10 0 0和 10 0 0 0个细胞左右。     

聚苯胺在防腐领域的应用

综述导电聚苯胺用于金属防腐蚀领域的最新进展,并且探讨了其相关的防腐机理。     

全喉切除术后早期经口进食的临床观察

目的 :对喉癌、梨状窝癌行全喉切除术后早期经口进食进行可行性研究。方法 :42例行全喉切除术的患者 (其中喉癌 34例 ,梨状窝癌 8例 )随机分为两组 :观察组 2 1例 ,术后 48～ 72h经口进食 ;对照组 2 1例 ,按常规 10～ 12d经口进食。结果 :观察组咽瘘发生率为 4.8%(1/ 2 1) ,对照组为 9.5 %(2 / 2 1) ,两者差异无显著性意义(P >0 .0 5 ) ;观察组术后平均住院天数较对照组明显缩短。结论 :术前未行放疗的喉癌、梨状窝癌患者行全喉切除术后 48～ 72h经口进食是安全可行的。     

原位聚合酶链反应检测在B细胞系非霍奇金病中的作用

目的 探讨用原位聚合酶镇反应(PCR)检测B细胞系非霍奇金病的意义。方法 用免疫球蛋白重链(IgH)第三互补决定区引物，生物素标记扩增产物直接原位PCR扩增15例非霍奇金病患儿外周血淋巴细胞。结果 15例非霍奇金病中，12例检测到特异性基因重排，4例呈现淋巴瘤性白血病，治疗后骨髓完全缓解，2例间期细胞原位PCR仍显示有IgH基因重排，分别于3个月及6个月复发。结论 原位聚合酶镇反应检测非霍奇金病不失为一种简单、快速、灵敏的方法，并能帮助预测复发。     

高效液相色谱法测定牛葛口服液中葛根素的含量

目的 　建立牛葛口服液中葛根素的含量测定方法。方法 　用 Nova-Pak C1 8色谱柱 ( 3 .9mm× 15 0 mm,4μm)为固定相 ,甲醇 -水 2 5∶ 75 ( V/V)为流动相 ,检测波长为 2 5 0 nm。 结果 　葛根素 0 .40 4～ 2 .0 2 0μg范围内呈良好的线性关系 ,r=0 .9999;葛根素的加样回收率为 99.2 3 %,RSD= 1.2 9%;连续进样的精密度是 RSD=0 .2 6%。 结论 　该方法能消除其它成分的干扰 ,准确可靠、重现性好 ,操作简便快速     

食管癌微血管密度与临床病理特征的关系及其临床意义

目的 :观察食管鳞状细胞癌组织中微血管密度 (microvessel density,MVD) ,分析其与临床病理特征的关系和临床意义。方法 :采用免疫组织化学法 (imm unohistochem istry,IHC) ,检测 6 2例食管癌组织中微血管密度 ,并对其与临床病理特征的关系进行统计学分析。结果 :肿瘤组织 2 0 0倍视野内微血管计数平均值为 5 6 .32± 15 .4 1。肿瘤大小在 2 cm～ 5 cm和≥ 5 cm两组的 MVD与≤ 2 cm组相比 ,其差异分别具有显著性意义和非常显著性的意义 (P<0 .0 5和 P<0 .0 1) ;淋巴结转移 >3个者MVD显著高于淋巴结阴性者 (P<0 .0 1) ;复发转移者 MVD显著高于无病生存者 (P<0 .0 1) ;MVD与肿瘤的部位和组织学分级未见显著性差异 (P>0 .0 5 )。结论 :MVD与肿瘤的大小、淋巴结转移数目、复发转移密切相关 ,有可能成为食管癌的另一个预后预测因素。     

脐带血单个核细胞体外诱导成CIK细胞及其抗肿瘤效应的实验研究

目的:探索建立CIK细胞的原代培养方 法并阐明其生物学特性,为该细胞在肿瘤生物过 继免疫治疗中的运用奠定基础。方法:通过加入 4种细胞因子(IFN γ、IL 2、IL 1及OKT3)将脐带 血单个核细胞(CBMNCs)诱导成CIK细胞;利用 流式细胞仪测定细胞表型、细胞增殖情况及细胞 周期的分布;利用改良的MTT法测定效应细胞 的体外细胞毒活性。结果:四种细胞因子的联合 运用,可诱导出大量的CIK细胞,其相对百分率 增长了163倍(从0.14%到22%),增殖高峰位 于第10～12天,针对K562、Hela和YTMLC肿瘤 细胞株,CIK细胞在效靶比为64∶1时的杀伤活 性分别为78.57±3.48、77.7±1.90和81.2± 1.51,在32∶1时分别为62.00±2.31、60.83± 2.80和64.07±2.87,在16∶1时分别为51.43± 2.51、52.87±2.91和54.10±3.11,均显著高于 LAK细胞及CBMNCs,P=0.001;而在效靶比为 8∶1(25.10±2.66、21.4±1.55和28.77±3.56) 及4∶1(17.10±2.10、11.93±1.86和9.49±2.92) 时与后两者差异无统计学意义,P=0.083。结 论:1)脐带血可作为诱导CIK细胞的重要来源 2)联合运用细胞因子能诱导出大量的CIK细胞 其增殖高峰位于培养的第12天,适宜在此期进 行临床运用;3)CIK细胞较LAK细