HSV-TK/GCV系统对人肺癌细胞株的杀伤效应

目的观察单纯疱疹病毒胸苷激酶基因HSV-TK／GCV系统对人肺癌细胞H446的体外杀伤作用。方法利用脂质体(1ipofectin)将重组逆转录病毒载体pLXSN-TK导入包装细胞PA317，G418筛选至抗性克隆出现，收获病毒液。加入聚凝胺感染H446细胞，并筛选出含TK基因的H446细胞。观察GCV对H446和不同比例混合的H446、H446／TK的杀伤作用及旁观者效应。结果经电镜及PCR检测证实TK基因已导入PA317、H446细胞。H446／TK细胞对GCV的敏感性明显高于H446细胞；随着TK 细胞比例的增加，存活率进一步减低，提示GCV不仅杀死TK 细胞，也杀死混合培养的未转导TK基因的H446细胞，表明HSV-TK基因转导的H446细胞具有明显的旁观者效应。结论HSV-TK／GCV系统赋予人肺癌细胞对GCV的高敏感性及旁观者效应。     

吡喹酮杂质的研究

用LC-MS和HPLC法以对照品对照,确定吡喹酮合成过程中产生的主要杂质是(1,11b)-位不饱和的吡喹酮,利用催化氢化法可把含该杂质过量的吡喹酮粗品转化为合格品.     

Effect of nitric oxide modulation on TGF-beta1 and matrix proteins in chronic cyclosporine nephrotoxicity

BACKGROUND: Chronic cyclosporine (CsA) nephrotoxicity is characterized by interstitial fibrosis and afferent arteriolar hyalinosis. L-arginine (L-Arg), the substrate for nitric oxide (NO) synthase and N-nitro-L-arginine-methyl ester (L-NAME), the NO synthase inhibitor, were shown to modulate acute CsA nephrotoxicity. However, the mechanism of fibrosis in chronic CsA nephrotoxicity remains unclear. Thus, we examined the effect of NO modulation on fibrosis and the expression of transforming growth factor-beta1 (TGF-beta1) and matrix proteins in chronic CsA nephrotoxicity. METHODS: Rats were administered CsA (7.5 mg/kg), CsA + L-Arg (1.7 g/kg), CsA + L-NAME (3.5 mg/kg), vehicle (VH), VH + L-Arg, and VH + L-NAME, and were sacrificed at 7 or 28 days. NO production, physiologic parameters, and histology were studied in addition to the mRNA expression of TGF-beta1, plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) and the matrix proteins biglycan and collagens type I and IV by Northern and the protein expression of PAI-1 and fibronectin by enzyme-linked immunosorbent assay. RESULTS: While L-NAME strikingly reduced NO biosynthesis and worsened the glomerular filtration rate and CsA-induced fibrosis, L-Arg had the opposite beneficial effect. In addition, the CsA-induced up-regulated expression of TGF-beta1, PAI-1, and the matrix proteins biglycan, fibronectin, and collagen I was significantly increased with L-NAME and strikingly improved with L-Arg. Collagen IV expression was not affected. Also, NO modulation did not affect VH-treated rats. CONCLUSIONS: Chronic CsA nephrotoxicity can be aggravated by NO blockade and ameliorated by NO enhancement, suggesting that NO maintains a protective function. NO modulation was associated with a change in TGF-beta1 expression, which, in turn, was associated with alterations in matrix deposition and matrix degradation through its effect on PAI-1.     

气管颗粒细胞瘤1例报告及文献复习

颗粒细胞瘤（ＧｒａｎｕｌａｒＣｅｌＴｕｍｏｒ，ＧＣＴ）是一种罕见的肿瘤。常发生于舌、皮肤及皮下组织、乳腺等部位。呼吸道ＧＣＴ发生率低，若累及呼吸道则以喉和支气管较多见。原发部位位于气管的ＧＣＴ极少，截止到１９８６年英文文献仅有１０例气管ＧＣＴ报道，国内近１３年未有气管颗粒细胞瘤报道，。本文报道１例３０岁女性气管ＧＣＴ患者，结合文献对气管ＧＣＴ的组织发生、临床表现、病理特点、诊断与鉴别诊断以及治疗方法等问题进行讨论。     

HLA—DRB1等位基因与我国北方类风湿关节炎的关系

为了观察ＨＬＡ－ＤＲＢ１等位基因在类风湿关节炎（ＲＡ）临床及发病中的作用，对８６例ＲＡ患者和１０６名正常对照的ＨＬＡ－ＤＲＢ１等位基因进行分型。用序列特异性引物体外基因扩增法测定ＨＬＡ－ＤＲ特异性，用序列特异性寡核苷酸探针进行ＨＬＡ－ＤＲ４亚型的测定。并根据ＨＬＡ－ＤＲＢ１等位基因的分型结果分析ＲＡ的临床表现和血清学特点及其与ＲＡ患者预后的关系。结果表明：同对照组相比，ＲＡ患者中ＨＬＡ－ＤＲ４基因频率明显增高（４８．８％比１７．９％，Ｐ＜０．００１），而ＨＬＡ－ＤＲ５基因频率降低（１６．３％比２７．４％，Ｐ＝０．０６）。ＤＲ４阳性ＲＡ中主要的ＤＲ４亚型为ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊０４０５（６１．９％比２１．１％，Ｐ＜０．０１）。在ＤＲ４阳性和ＤＲ４阴性两组患者中，其发病年龄、病程和关节外表现无明显差异，但ＤＲ４阳性组的类风湿因子阳性率高于ＤＲ４阴性组（Ｐ＜０．０５），并且ＤＲ４阳性的ＲＡ患者腕和（或）指关节Ｘ线片分期明显重于ＤＲ４阴性者（Ｐ＜０．０５）。本研究结果表明，我国北方ＲＡ患者和ＨＬＡ－ＤＲ４基因明显相关，其主要亚型为ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊０４０５。ＲＡ患者ＨＬＡ－ＤＲ４基因的检测可作为一项有用的预后判断指标。     

骨髓基质细胞与玻璃陶瓷复合培养体内成骨的实验研究

目的 观察骨髓基质细胞（BMSC）与钙磷陶瓷（BGC）复合后形成骨组织的生物学机制,为形成组织工程化新生骨组织提供理论依据。方法 将BMSC与BGC复合植入动物体内后进行大体观察、组织学染色,观察其成骨过程。结果 一定浓度的BMSC与BGC复合植入动物体内可产生成熟新生骨组织,其成骨过程与局部血运、材料孔隙、孔径有关。结论 利用组织工程学方法可以形成新生骨组织,为进一步研究组织工程化新生组织的体内移植手段和方法提供了新的思路和可能。     

人肿瘤裸鼠移植瘤株模型转移抑制基因nm23-H1mRNA的表达

目的ｎｍ２３基因与肿瘤移植瘤株转移的关系。方法应用地高辛标记的ｎｍ２３┐Ｈ１反义ｃＲＮＡ探针原位杂交方法对人克隆化肝癌，人骨肉瘤，肾癌三种不同肿瘤的裸鼠移植瘤株模型（Ｈ┐ＣＳ，Ｍ┐ＯＳ，Ｍ┐ＲＣＣ）中瘤内ｎｍ２３┐Ｈ１进行检测。结果ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ在三模型中均有不同程度快的表达，其中有较强转移能力的Ｈ┐ＣＳ，和潜伏期短、侵袭生长速度快的Ｍ┐ＲＣＣ杂交信号５０％为弱阳性，而Ｍ┐ＯＳ仅有２５％为弱阳性。结论ｎｍ２３的弱阳性表达可能和Ｈ┐ＣＳ生长速度及转移倾向有一定联系。     

丹参酮诱导HL—60细胞分化及凋亡的流式细胞术分析

应用体外细胞培养及流式细胞仪技术，分析了丹参酮作用前后HL－60细胞的细胞周期分布、细胞增殖指数、p53、c－myc、c－fos及bc1－2基因产物的表达变化，并以全反式维甲酸为对照。结果表明：0．5μg．ml－1的丹参酮作用后，HL－60细胞趋向粒细胞系统分化，有部分细胞发生凋亡（11．8％），丹参酮通过阻止HL－60细胞进入S期而抑制其DNA合成，其作用的分子机制与c－fos基因的表达增高、c－myc基因及bc1－2基因的表达降低有关，诱导分化与细胞凋亡的关系尚有待进一步探讨。     

黄连与黄芩、甘草配伍前后对金黄色葡萄球菌生长抑制作用的观察

以ＭＩＣ相对值为指标，观察黄连、黄芩、甘草煎液单味或不同比例配伍后对金黄色葡萄球菌生长的抑制作用。结果显示：黄连与黄芩配伍，黄芩的抑菌作用有所降低，但黄连则未见降低；黄芩多于黄连时，黄连的抑菌作用似有增强。黄连与甘草配伍，无论比例如何，配伍后的抑菌作用均呈降低趋势。当三药同时配伍时，黄连、甘草的抑菌作用不变，或反增强，只有黄芩的抑菌作用有减弱趋势。黄连与黄芩、甘草两两配伍，单独使用时，其抑菌作用似不如组成三药配伍。其机制值得进一步研究。     

大鼠脑神经干细胞神经巢蛋白表达的流式细胞术检测

检测胎鼠及成年大鼠脑内神经干细胞特异性抗原神经巢蛋白的表达,判明啮齿类哺乳动物脑内神经干细胞存在的可能性及相应的部位。方法：显微手术下采取胎鼠及成年大鼠大脑与皮质下脑组织,间接荧光法标记ｎｅｓｔｉｎ,以流式细胞术检测。结果胎鼠脑内普遍存在ｎｅｓｔｉｎ阳性细胞,成年大鼠脑室旁组织中也存在ｎｅｓｔｉｎ阳性细胞。