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121.
Objective To explore the influence of Helicobacter pylori (Hp) on the proliferation, apoptosis and expression of p27kipl protein of gastric epithelial cells in vitro. Methods SC, C-7901 cell pro-liferation was examined by flow cytometry after incubation with different concentration of NCTC11637. The effect of NCTC11637 on cell apoptosis was also evaluated by flow cytometryo And the expression of p27kipl of gastric epithelial cells was detected by immunohistochemical analysis and in situ hybridization, respectively. Results Cell proliferation was enhanced when co-incubated with the Hp in low concentration (3.4 x 104 to 1.9 x 105 CFU/ml) but inhibited in higher concentration (≥4.8×106CFU/ml). However, cell apoptosis was increase when co-incubated with the Hp in high concentration (≥9.6 ×105 CFU/ml) showing concen-tration dependent picture. In addition, the co-incubation of SGC-7901 with Hp led to decrease of the expres-sion of p27kipl protein but not mRNA in a Hp concentration dependent way. Conclusion Hp could effect the gastric epithelial cells apoptosis and proliferation directly and influence the expression of p27kips protein which might facilitate gastric carcinoma. 相似文献
122.
高灵敏orexin A放免法的建立及其对大鼠缺血再灌注的应用 总被引:2,自引:0,他引:2
建立高灵敏orexinA放射免疫分析方法 (RIA) ,探讨肠缺血再灌注损伤对血浆及下丘脑orexinA水平的影响。采用氯胺T法制备碘标记orexinA ,抗原抗体反应采用平衡一步法 ,4℃温育 2 4h后 ,经PR试剂分离结合和游离的标记抗原 ,并用该方法测量正常人、高血脂患者血浆orexinA水平及大鼠肠缺血再灌注损伤后血浆及下丘脑组织中orexinA浓度的变化。结果表明 ,本方法测定orexinA标准曲线范围为 2 1 - 2 0 0 0 pg/mL ,最低检出量为 2 1 pg/mL ,批内和批间变异系数均小于 1 0 %。 30名正常人血浆orexinA水平为 338.4 8± 2 0 .2 4 pg/mL ,30例高血脂患者为 343.5 1± 1 5 .4 9pg/mL ;大鼠肠缺血再灌注损伤前后及不同损伤时间点orexinA的变化差异亦无显著性。本文提示orexinARIA方法灵敏度和特异性较高 ,可用于人血浆、大鼠血浆和下丘脑组织orexinA的检测 相似文献
123.
目的:探讨细胞因子Semaphorin 3a(Sema 3a)在小鼠胚胎视交叉发育过程中发挥的作用。方法:E13至E15小鼠胚胎的眼球至视束部分制备成脑厚片,置于含10%的小牛血清的DMEM/F12的培养液中,在37℃的恒温的滚动培养箱中培养5h。实验组中将Sema 3a抗体加入培养液中。培养结束后,将脑厚片以4%多聚甲醛固定,将DiI颗粒置于一侧视盘。7d后,在手术显微镜下,暴露被标记的视神经纤维,在激光扫描共聚焦显微镜下观察。结果:用Sema 3a抗体阻抑Sema 3a的功能,可引起E13跨越中线的视神经纤维减少以及神经纤维走行错误。结论:在视交叉形成的早期,Sema 3a可能吸引视神经纤维跨过中线,并且这个过程可能是短暂的。 相似文献
124.
在过去10年中,随着功能脑影像学技术在物质滥用领域的发展,越来越多的研究者运用这些技术以探讨尼古丁成瘾的神经生物学机制。本文主要总结了尼古丁急、慢性暴露下对脑功能影响的神经脑影像学研究进展,证实了尼古丁依赖与中脑边缘犒赏系统、调节注意、记忆、运动以及联想相关脑环路之间的相关性。这些研究发现将为揭示尼古丁依赖的神经生物学机制提供更多的证据支持,进一步促进今后戒烟治疗的发展。 相似文献
125.
目的:分析卵巢癌组织中白细胞介素18(IL-18)及白细胞介素1β转化酶(ICE)的基因及蛋白表达水平,探讨其与卵巢癌临床特性之间的关系.方法:分别采用RT-PCR及免疫组化染色法检测正常卵巢(n=10)、卵巢良性肿瘤(n=6)、卵巢癌(n=32)组织中IL-18、ICE的mRNA及蛋白表达;分析卵巢癌不同病理类型、临床分期及发病年龄患者之间表达是否具有差异.结果:①正常、良性肿瘤及卵巢癌组织中均有IL-18 mRNA表达(分别为1.30±0.48、1.02±0.17、0.77±0.35);ICE mRNA在正常及良性肿瘤组织中均有表达,卵巢癌组织中有29例(90.63%)表达(分别为0.96±0.51、0.73±0.34、0.63±0.34).②IL-18及ICE蛋白均表达于卵巢上皮细胞浆内.正常、良性肿瘤及卵巢癌组织的IL-18阳性表达率分别为83.3%、80.0%和31.3%;ICE阳性表达率分别为80.0%、50.0%和37.5%.③卵巢癌组织中IL-18、ICE mRNA及蛋白表达均较正常及良性肿瘤组织明显减少(均P<0.05),良性与正常组织之间相比差异均无显著性(均P>0.05).卵巢癌组织中IL-18与ICE的mRNA、蛋白表达之间呈显著正相关(分别为r=0.37,P=0.036;r=0.45,P=0.009).④IL-18、ICE mRNA及蛋白表达在不同病理类型、临床分期及发病年龄患者之间均未见显著性差异(均P>0.05).结论:卵巢癌患者局部癌组织IL-18、ICE表达减弱,可能与卵巢癌的发生发展有着一定的关系. 相似文献
126.
目的了解IFN-α对HuH7细胞固有免疫分子APOBEC3G表达的影响及其机制。方法HuH7细胞给予不同浓度的IFN-α(0 U/ml、100U/ml、400U/ml、800U/ml and 1200U/ml)刺激,10h后提取细胞总RNA,RT-PCR和实时定量RT-PCR检测HuH7细胞内APOBEC3G的mRNA水平变化,Western blot分析APOBEC3G蛋白水平的表达;分别构建不同长度的含有IRF-E(IFN regulatory factor element)位点的APOBEC3G起始密码上游序列报告质粒、不含IRF-E和IRF-E位点突变的虫荧光素酶报告质粒,报告基因分析IFN-α刺激后APOBEC3G起始密码上游IPF-E位点对APOBEC3G表达的影响。结果IFN-α上调HuH7细胞APOBEC3G mRNA和蛋白水平的表达,并具有剂量依赖的效应。序列分析发现APOBEC3G起始密码上游的-298~-283和-57~-47位碱基分别存在IRF-E和ISRE(IFN stimulated re- sponse element)序列。报告基因分析结果显示,干扰素使含有IRF-E序列的APOBEC3G启动子报告质粒的虫荧光素酶的活性增加6~8倍,而不含IRF-E序列和IRF-E位点突变的报告质粒的虫荧光素酶活性在干扰素刺激后几乎没有变化。结论IFN-α可通过IRF-E位点上调APOBEC3G mRNA和蛋白水平的表达,从而发挥抗病毒效应。 相似文献
127.
目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)感染对体外培养肺成纤维细胞(HEL)中明胶酶活性的影响。方法体外培养HEL细胞感染HCMV,分为低感染复数(MOI)组及高MOI组,每组重复6例。明胶酶谱法检测HEL细胞中MMP-2及MMP-9的明胶酶活性,用半定量RT-PCR检测各组HEL细胞中MMP-9及TIMP-1的转录水平。结果在低MOI组及高MOI组HEL细胞中MMP-9及MMP-2活性均增强(P〈0.05),高MOI组MMP-9及MMP-2活性较低MOI组显著增加(P〈0.05)。进一步检查MMP-9及TIMP-1的mRNA水平发现,正常对照组HEL细胞中MMP-9及TIMP-1的mRNA处于一个较低的水平,HCMV感染使HEL细胞中MMP-9及TIMP-1的mRNA水平均明显升高(P〈0.05),低MOI组和高MOI组差异无统计学意义(P〉0.05)。在低MOI组及高MOI组,HEL细胞MMP-9/TIMP-1的比值和正常对照组相比明显升高(P〈0.05),表明MMP-9升高更为显著。高MOI组和低MOI组中MMP-9/TIMP-1的比值差异无统计学意义(P〉0.05)。结论HCMV感染可以造成MMP-9和TIMP-1转录和MMP-9/TIMP-1的失衡,同时造成MMP-9及MMP-2明胶酶活性增强,导致肺泡结构的破坏和肺纤维化的发生,这在CMV肺炎的发病机制中起着重要的作用。 相似文献
128.
Expression of the chemokine receptors CCR4, CCR5, and CXCR3 by human tissue-infiltrating lymphocytes. 总被引:17,自引:0,他引:17
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Eric J Kunkel Judie Boisvert Kristine Murphy Mark A Vierra Mark C Genovese Andrew J Wardlaw Harry B Greenberg Martin R Hodge Lijun Wu Eugene C Butcher James J Campbell 《The American journal of pathology》2002,160(1):347-355
Differential expression of adhesion molecules and chemokine receptors has been useful for identification of peripheral blood memory lymphocyte subsets with distinct tissue and microenvironmental tropisms. Expression of CCR4 by circulating memory CD4(+) lymphocytes is associated with cutaneous and other systemic populations while expression of CCR9 is associated with a small intestine-homing subset. CCR5 and CXCR3 are also expressed by discrete memory CD4(+) populations in blood, as well as by tissue-infiltrating lymphocytes from a number of sites. To characterize the similarities and differences among tissue-infiltrating lymphocytes, and to shed light on the specialization of lymphocyte subsets that mediate inflammation and immune surveillance in particular tissues, we have examined the expression of CCR4, CXCR3, and CCR5 on CD4(+) lymphocytes directly isolated from a wide variety of normal and inflamed tissues. Extra-lymphoid tissues contained only memory lymphocytes, many of which were activated (CD69(+)). As predicted by classical studies, skin lymphocytes were enriched in CLA expression whereas intestinal lymphocytes were enriched in alpha(4)beta(7) expression. CCR4 was expressed at high levels by skin-infiltrating lymphocytes, at lower levels by lung and synovial fluid lymphocytes, but never by intestinal lymphocytes. Only the high CCR4 levels characteristic of skin lymphocytes were associated with robust chemotactic and adhesive responses to TARC, consistent with a selective role for CCR4 in skin lymphocyte homing. In contrast, CXCR3 and CCR5 were present on the majority of lymphocytes from each non-lymphoid tissue examined, suggesting that these receptors are unlikely to determine tissue specificity, but rather, may play a wider role in tissue inflammation. 相似文献
129.
目的 研究正常妊娠晚期人胎盘和胎膜水通道蛋白3(AQP3)的表达及分布.方法 收集5例正常足月妊娠剖宫分娩的胎盘和胎膜样本,用RT-PCR测定AQP3 mRNA在胎盘和胎膜组织中的表达;用Western印迹和免疫组织化学方法检测AQP3蛋白质水平在胎盘和胎膜的表达.结果 RT-PCR显示AQP3 mRNA在胎盘和胎膜组织均有表达.Western印迹结果显示胎盘组织在29 000左右有一特异性条带.免疫组织化学结果显示AQP3表达于合体滋养细胞,而在羊膜上皮细胞未见表达.结论 AQP3在胎盘母儿液体平衡中可能发挥重要作用. 相似文献
130.
基因疫苗pcDNA-AChRα211免疫小鼠建立重症肌无力动物模型 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:用基因疫苗pcDNA-AChRα211,免疫C57BL/6小鼠建立实验性自身免疫性重症肌无力模型(EAMG)。方法:将人乙酰胆碱受体α亚基N端的主要免疫区(AChRα211)的基因片段插入到穿梭载体pcDNA3.0中,构建基因疫苗pcDNA-AChRα211。大量提纯质粒pcDNA-AChRα211后肌肉注射C57BL/6小鼠。用ELISA法检测小鼠血清中抗AChRα211,的IgG(ACh-RAb),并用PCR方法检测外源基因在小鼠各组织器官中的分布情况。结果:双酶切鉴定和序列测定表明构建了含正确目的基因阅读框的重组质粒pcDNA-AChRα211,ELISA分析表明该基因疫苗免疫的C57BL/6小鼠血清中含有AChRAb,且免疫三个月后在小鼠的肌肉、肝、脾、肾中仍可检测到目的基因AChRα211的存在。结论:重组质粒pcDNA-AChRα211作为基因疫苗能够诱导实验性自身免疫性重症肌无力。 相似文献