胞嘧啶脱氨酶的原核表达和多克隆抗体的制备

目的：在原核系统中表达并纯化大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶（cytosine deaminase,CD)，制备鼠抗大肠杆菌CD多克隆抗体，方法：亚克隆CD基因到原核表达载体pMAL-c2和pBV222中，并转化入大肠杆菌DH5α内，诱导表达并纯化MBP-CD和6his-CD融合蛋白，用纯化的MBP-CD融合蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体。结果：通过重组质粒的酶切筛选出重组阳性克隆，成功地表达和纯化出MBP-CD和6his-CD融合蛋白，用纯化的MBP-CD成功制备了鼠抗CD多克隆抗体，并用6his-CD和GST-CD重组蛋白进行Western印迹分析，证实了抗体的正确性，结论：应用多克隆抗体可以检测体内外CD基因的表达，为临床前和临床上深入开展CD基因的生物治疗研究提供重要的实验材料。     

胃液乳酸定量测定对中晚期胃癌的意义

用比色法测定148例胃癌和非胃癌患者胃液乳酸含量,包括正常对照36例。胃癌患者胃液乳酸含量明显增高,与胃良性疾病及正常人比较,差异非常显著(p<0.001),重叠甚少,有助于初步鉴别胃良性和恶性疾病。     

重组人血小板源性生长因子增加细胞外信号调节激酶磷酸化促进糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面愈合

目的 在体观察重组人血小板源性生长因子（recombinant human platelet—derived growth factor，rhPDGF）促进糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面修复可能涉及的细胞和分子机制，研究其可能涉及的信号通路。方法 26只糖尿病大鼠，每只动物背部制备4个全层皮肤缺损创面，选取其中52个创面，随机分成3组，即对照组，创面自然愈合；rhPDGF治疗组，创面rhPDGF用量为7．0μg／cm^2；赋形剂组，创面用等量赋形剂凝胶。观察治疗后3、7和14d创面肉芽形成、胶原沉积、再上皮化速率以及炎性细胞浸润情况，并采用免疫荧光和免疫组织化学技术观察创面周围和创面修复细胞内细胞外信号调节激酶1／2（extracellular signal—regulated kinase1／2，ERK1／2）磷酸化和增殖细胞核抗原（proliferative cell nuclear antigen，PCNA）的表达。结果 组织学观察，rhPDGF治疗组创面可见大量炎性细胞浸润，毛细血管胚芽及成纤维细胞明显多于另两组（P〈0．05）；胶原沉积明显，肉芽组织生长活跃，创面收缩显著，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫学研究显示，应用rhPDGF7～14d后，rhPDGF治疗组ERK1／2明显强于对照组和赋形剂组（P〈0．05）；且损伤后3～7d rhPDGF治疗组修复细胞PCNA的表达明显高于对照组和赋形剂组（P〈0．05）。结论 rhPDGF促糖尿病大鼠刨面愈合的作用部分是通过ERK1／2信号通路的磷酸化来完成的。     

In vivo PET imaging of cardiac presynaptic sympathoneuronal mechanisms in the rat.

The sympathetic nervous system of the heart plays a key role in the pathophysiology of various cardiac diseases. Small-animal models are valuable for obtaining further insight into mechanisms of cardiac disease and therapy. To determine the translational potential of cardiac neuronal imaging from rodents to humans, we characterized the rat sympathetic nervous system using 3 radiotracers that reflect different subcellular mechanisms: (11)C-meta-hydroxyephedrine (HED), a tracer of neuronal transport showing stable uptake and no washout in healthy humans; (11)C-phenylephrine (PHEN), a tracer of vesicular leakage and intraneuronal metabolic degradation with initial uptake and subsequent washout in humans; and (11)C-epinephrine (EPI), a tracer of vesicular storage with stable uptake and no washout in humans. METHODS: We used a small-animal PET system to study healthy male Wistar rats at baseline, after desipramine (DMI) pretreatment (DMI block), and with DMI injection 15 min after tracer delivery (DMI chase). The rats were kept under general isoflurane anesthesia while dynamic emission scans of the heart were recorded for 60 min after radiotracer injection. A myocardial retention index was determined by normalizing uptake at 40 min to the integral under the arterial input curve. Washout rates were determined by monoexponential fitting of myocardial time-activity curves. RESULTS: At baseline, HED showed high myocardial uptake and sustained retention, EPI showed moderate uptake and significant biphasic washout, and PHEN showed moderate uptake and monoexponential washout. The average (+/- SD) left ventricular retention index for HED, PHEN, and EPI was 7.38% +/- 0.82%/min, 3.43% +/- 0.45%/min, and 4.24% +/- 0.59%/min, respectively; the washout rate for HED, PHEN, and EPI was 0.13% +/- 0.23%/min, 1.13% +/- 0.35%/min, and 0.50% +/- 0.24%/min, respectively. The DMI chase resulted in increased washout only for HED. DMI block decreased myocardial uptake of all tracers by less than 90%. CONCLUSION: Kinetic profiles of HED in the rat myocardium were similar to those of HED in humans, suggesting comparable neuronal transport density. Unlike in humans, however, significant washout of EPI and faster washout of PHEN were encountered, consistent with high intraneuronal metabolic activity, high catecholamine turnover, and reduced vesicular storage. This evidence of increased neuronal activity in rodents has implications for translational studies of cardiac neuronal biology in humans.     

PTEN基因敲除降低辐射敏感性及其机制

目的 探讨PTEN基因敲除对辐射敏感性的影响及机制。方法 采用流式细胞术检测MEF1和MEF1/PTEN^－/－细胞内ROS水平;采用Western blot方法,检测H₂O₂和DPI预处理后AKT激酶的表达变化;采用细胞克隆形成率试验分析细胞对⁶⁰Co γ射线的敏感性。结果 PTEN基因敲除后细胞ROS水平增加,辐射敏感性降低。H₂O₂和DPI预处理后影响MEF1细胞AKT激酶活性,但对MEF1/Pten^－/－细胞无影响。 结论 PTEN基因敲除阻断了ROS对AKT的介导,AKT激酶持续活化,可能是辐射敏感性降低的重要原因。     

中西医结合治疗急性冠脉综合征临床疗效观察

目的观察中西医结合治疗急性冠脉综合征（ACS）的临床疗效。方法将60例ACS患者随机分为两组。治疗组在抗血小板、抗凝、降脂、扩张冠状动脉、降压、保护血管内皮功能等常规治疗基础上服用中药复方苏欣康颗粒；对照组在常规治疗基础上加用复方丹参滴丸。2周为1个疗程，1个疗程结束后观察治疗前后临床症状、心电图、24h动态心电图变化，并判定疗效。结果经2周治疗后，治疗组总有效率（90．O％，27／30）显著高于对照组（83．3％，25／30），差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗组临床症状的改善程度高于对照组，其中以对心悸、自汗及心肾阳虚的改善最显著（P均〈0．05）。治疗组心律失常发生率（36．7％）低于对照组（50．0％），但差异无统计学意义（P〉O．05）。结论中药复方苏欣康结合常规手段治疗ACS疗效确切，可作为治疗ACS的有效方剂。     

新生儿腹胀98例临床分析

目的：探讨新生儿腹胀的常见原因及治疗、转归。方法：对98例腹胀新生儿进行病因分类、回顾性分析治疗转归。结果：以出院诊断为标准，98例患儿中感染性疾病42例，占42．86％；早产儿生活力低下32例，占32．65％。1～3d痊愈12例，1W内痊愈81例，3例转外科治疗，2例死亡。结论：感染性疾病是新生儿腹胀的主要原因，早产儿尤其体重低下者是腹胀的高危人群。临床医师应高度重视，尽快明确原因，给予及时、合理治疗，以提高新生儿生存率。     

当前临床正畸应予关注的几项矫正技术

口腔正畸是一门临床学科，通过基础和临床研究促使它不断得到发展，临床新技术直接推动了口腔正畸矫治水平的提高。近年来在临床口腔正畸推广应用的4项新技术——种植体支抗、自锁托槽、改进后的舌侧矫正技术和无托槽矫正技术，应该引起我们的关注。因为由此可能带来正畸发展的一个快速阶段。     

儿童频繁瞬目征的病因及综合治疗

[目的]探讨儿童频繁瞬目征的发病原因及其治疗措施。[方法]随机抽取148例门诊频繁瞬目征患儿，对其生活习惯、眼部情况进行详细询问并进行病因分析及综合治疗。[结果]通过克服不良生活习惯、去除谤因、调节心理和综合治疗措施，148例频繁瞬目征惠患儿经2周～5周的治疗，115例患儿治愈，28例好转，5例无效。[结论]频繁瞬目征与玩电脑、看电视及偏食有一定关系，针对性综合治疗可获得较满意的疗效。     

生物可降解性尿道内支架修复战伤性尿道狭窄的研究

目的建立战伤性尿道狭窄动物模型,探讨生物可降解性尿道内支架对其进行重建修复的可行性。方法将新西兰雄兔28只分为两组,实验组(n=20):以定位爆炸法建立尿道狭窄模型。一月后行逆行尿道造影、尿道镜检查,并切除狭窄段尿道,行病理组织学观察证实。后置入人工合成生物可降解尿道内支架,置入术后2、4、8、12周分别行逆行尿道造影、尿道镜检查以及尿流动力学检测。并在以上各时间点处死5只动物,取狭窄处尿道组织,观察组织学修复重建情况。对照组(n=8):于实验组爆炸处理后4周和支架置入12周,分别取对照组4只动物与实验组对比观察。结果实验组所有动物爆炸后4周在尿道球部狭窄形成稳定狭窄模型(狭窄段长5～10 mm,尿道腔缩窄50%以上)。尿道内支架置入后2周,组织学观察见黏膜上皮新生迹象,并有炎性细胞浸润;4周时上皮新生明显,炎性细胞消失;8周时出现尿道平滑肌细胞再生,12周时见损伤后尿道组织结构完全修复,与正常尿道组织比较差异无统计学意义(P>0.05)。。同时间点尿道镜检查证实尿道腔隙、黏膜形态结构无异于正常对照组。尿流动力学检测显示两组间差异无统计学意义(P>0.05)。。结论应用成功建立的战伤性尿道狭窄动物模型,证实生物可降解性尿道内支架能作为修复战伤性尿道狭窄的理想材料,具有损伤小,易操作,功能恢复快的特点。