Cancer stem-like cells contribute to paclitaxel resistance in esophageal squamous cell carcinoma

Objective: To examine the role of esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) stem cells in paclitaxel resistance through the molecular characterization of ESCC stem cells. Methods: A resistant cell line (RR-ECl09) of cells were established using intermittent induction and time increments of high-dose paclitaxel in a human esophageal squamous cell carcinoma line (EC109). The multidrug resistance of RR-ECl09 cells to anticancer agents was evaluated by MTT assay. The RR-EC109 and EC109 cells were used for sphere formation assays, clonogenicity assays, stem cell gene expression, and the expression of epithelial-mesenchymal transition markers. Results: The RR-EC109 cells were established over 7 months. RR-ECl09 cells had 67.258 fold resistance to paclitaxel. The percentage of sphere formation and clone proliferation ability of RR-EC109 cells was higher than that of EC109 cells (P < 0.05). The amount of side population cells in RR-EC109 cells was higher than that of EC109 cells (P < 0.05). RR-EC109 cells produced more mRNA for Bmi1, Nanog, Oct4, Sox2, ABCG2, Nestin, and Ki-67 than EC109 cells (P < 0.05). E-cadherin expression was lower in RR-EC109 cells than in EC109 cells, while N-cadherin, Snail, and Twist expressions were higher in RR-EC109 cells than in EC109 cells (P < 0.05). Conclusions: Cancer stem cell (CSC)-like cells exist among paclitaxel-resistant cells in ESCC and may play a role in ESCC drug resistance.     

海洋低温溶菌酶的急性毒性试验

①目的 对海洋杆菌产低温溶菌酶进行安全性评价。②方法 应用小鼠急性毒性试验,观察海洋低温溶菌酶对小鼠一次灌胃后和尾静脉注射后所产生的急性毒性反应。③结果 小鼠一次灌胃的最大耐受量为10400．00mg／kg体质量;小鼠一次尾静脉注射的LD50为4530．54mg／kg体质量,LD50的95％可信限为4193．19～4867．89mg／kg体质量,LD50的99％可信限为4088．24～4972．84mg／kg体质量。④结论 海洋低温溶菌酶为实际无毒物。     

血浆脑钠素水平对心血管病患者远期病死率的预测作用

目的 本研究主要探讨血浆BNP水平对心血管患者远期病死率及预后的影响.方法 对笔者医院2003年5月~2005年2月期间住院的患者,共276例,失访2例,随访7年,根据BNP水平分为BNP<100ng/L、101~1000ng/L、1001~5000ng/L、>5000ng/L 4组,比较各组间病死率,绘制生存曲线.结果 随访期间,91例患者死亡,其中心源性死亡50例,非心源性死亡41例.4组比较,各组间病死率比较差异有统计学意义(P=0.000),随BNP浓度的增加,病死率逐渐升高.在多因素比较中,BNP、年龄和EF值差异均有统计学意义(P<0.05),BNP是影响患者预后的独立危险因素,BNP>5000ng/L组,3个月的病死率为超过50%,5年的病死率为100%.结论 BNP水平是影响病死率的一个独立危险因素,BNP>5000ng/L,近期及远期预后均严重不良.     

姜黄素纳米粒促进药物支架植入后内皮功能恢复的实验研究

目的 探讨姜黄素纳米粒在促进药物支架植入后内皮功能恢复的可行性.方法 雷帕霉素支架植入后以每周2次的频率静脉注射姜黄素纳米粒,于4周后评价内皮功能.结果 4周后联用姜黄素纳米粒的支架组内皮功能明显优于不使用姜黄素纳米粒的支架组.结论 姜黄素纳米粒可显著提高支架植入后内皮功能的恢复速度,有望降低药物支架不良事件的发生率.     

实时荧光聚合酶链反应检测HBV基因型B～D方法的建立

目的建立实时荧光聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒(HBV)基因型B～D方法并验证其准确性。方法比较GenBank中已发表的明确分型的143株HBV全序列，设计特异的组合引物探针，应用实时荧光聚合酶链反应HBV基因分型法对兰州地区128例慢性乙型肝炎患血清标本进行基因型B、C、D检测，并随机对检测的基因型各3株标本进行S基因测序验证。结果128例标本中B型检出率为20.3％(26／128)，C型71．9％(92／128)，D型7．8％(10／128)：18株HBV克隆标本S基因测序结果与本分型法完全一致。结论实时荧光聚合酶链反应HBV基因分型法能够简便、灵敏、快速、准确地鉴定HBV基因型，适宜用于HBV基因型的大规模临床和流行病学调查。     

血管内皮生长因子基因支架预防球囊扩张术后再狭窄的实验研究

近年研究表明,内膜增厚致再狭窄的始动因素是内皮细胞的损伤。我们利用血管内皮生长因子(VEGF)可以促进损伤内膜内皮化这一特性,将携带VEGF基因的多聚赖氨酸涂层支架置人球囊扩张术后的动脉粥样硬化兔腹主动脉,旨在评估在质粒介导下,由该涂层支架向血管内局部转基因的可行性及VEGF修复内膜、抑制再狭窄的效果。     

慢性肾脏病患者血游离脂肪酸的变化及与其他血脂的相关性

目的：研究慢性肾脏病(CKD)患者血游离脂肪酸(FFA)的变化,并探讨其与标准(常规)血脂谱的相关性。方法：对入选 CKD 患者236例(非透析)的临床及实验室资料进行回顾性分析。根据 K/DOQI 慢性肾脏病临床实践指南,通过 MDRD 简化公式估算肾小球滤过率( eGFR),将 CKD 患者分为CKD1-5期共5组。收集血 FFA 及三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白 A1(apoA1)、载脂蛋白 B(apoB)、脂蛋白 a [Lp(a)]标准(常规)血脂谱等相关数据进行统计分析。结果：入选 CKD 患者共236例,血 FFA 水平从 CKD1期至 CKD5期逐渐升高[CKD1期(0.21±0.05)mmol/ L,CKD2期(0.24±0.04) mmol/ L,CKD3期(0.35±0.06) mmol/ L,CKD4期(0.42±0.10) mmol/ L,CKD5期(0.47±0.13) mmol/ L],且前后组比较均有统计学意义( P<0.05)。经Pearson 相关分析,FFA 与 TG(r＝0.141,P<0.05)、Lp(a)(r＝0.225,P<0.01)呈正相关,与 apoA1(r ＝-0.214, P<0.01)、eGFR(r ＝-0.728,P<0.01)呈负相关。多元逐步回归分析显示,FFA 与 eGFR(β＝-0.714,P<0.01)、apoA1(β＝-0.090,P<0.05)呈负相关。结论： FFA 可早期反映 CKD 患者的脂代谢紊乱;可作为评估 CKD进展的指标之一;CKD 患者血 FFA 代谢异常可能与 apoA1相关,肾功能减退可能是导致血 FFA 升高的危险因素。     

病毒性心肌炎患儿血清IMA、h-FABP 水平变化及与心肌损害的相关性

目的 探讨病毒性心肌炎患儿血清缺血修饰白蛋白（IMA）、心型脂肪酸结合蛋白（h-FABP） 水平变化,并分析血清IMA、h-FABP 水平与心肌损害的相关性。方法 选取2016 年10 月—2019 年10 月 在绵阳市中心医院确诊的病毒性心肌炎患儿96 例作为观察组,根据临床表现和相关检查,将观察组分为轻症 组（54 例）和重症组（42 例）。选取同期该院健康体检儿童50 例作为对照组。采用白蛋白钴结合试验检测 血清IMA 浓度,酶联免疫吸附试验检测血清h-FABP 水平,化学发光免疫分析法测定血清心肌肌钙蛋白I 水 平。采用Pearson 法分析血清IMA、h-FABP 水平与心肌损害的相关性。结果 观察组血清IMA、h-FABP 水平较对照组高（P <0.05）。重症组血清IMA、h-FABP 水平较轻症组高（P <0.05）。病毒性心肌炎患儿血 清心肌肌钙蛋白I 水平为（0.26±0.12）ng/ml。病毒性心肌炎患儿血清IMA、h-FABP 水平与心肌肌钙蛋白I 水平呈正相关（r =0.803 和0.851,P <0.05）。结论 病毒性心肌炎患儿存在血清IMA、h-FABP 的高表达, 血清IMA、h-FABP 水平随病情严重程度的增加而升高,且与心肌损伤程度呈正相关,具有良好的临床早期 诊断及病情评估价值。     

原癌基因Pim-3对烧伤及内毒素引起的肠黏膜损伤保护作用的实验研究

目的研究Pim-3基因在烧伤及内毒素引起的肠黏膜损伤中的保护作用。方法体内实验在成年Wistar大鼠中进行,分为A组（烧伤组）,B组（脂多糖组）,C组（正常对照组）。各组依次在处理后3、6、12、24、48h取小肠,提取总RNA及蛋白质,并进行逆转录（RT）．PCR及Western印迹分别检测内源性Pim-3、细胞间黏附分子（ICAM-1）、紧密连接蛋白闭锁蛋白（oecludin）在肠道的表达。观察烧伤和内毒素对内源性Pim-3基因在肠道表达的影响及Pim-3基因与肠黏膜损伤的相关性。体外实验部分,首先原代肠上皮细胞分离培养,再重组质粒pEGFP—N2／Pim-3转染和内毒素处理原代肠上皮细胞。实验分为6组：①正常对照＋内毒素处理组（5μg／ml）;②空载质粒pEGFP—N：转染＋内毒素处理组（5μg／ml）;③重组质粒pEGFP-N2／Pim-3转染＋内毒素处理组（5μg／ml）;④正常对照组;⑤空载质粒pEGFP-N2转染组;⑥重组质粒pEGFP-N2／Pim-3转染组;内毒素处理6h后,提取各组总RNA,利用逆转录（RT）．PCR检测各指标,并利用流式细胞仪观察各组细胞凋亡情况。结果（1）体内实验部分：A、B组内源性Pim-3基因在3h表达开始增多,分别为C组的（12．25±1．01）和（15．08±1．07）倍,6h到达顶点,分别为C组的（21．13±1．78）和（25．24±1．80）倍,以后逐渐减少。A、B组ICAM．1在6h后一直处于高表达的位置,12h达高峰,分别为C组的（88±7）和（58±5）倍,差异有统计学意义（P〈0．05）。A、B组闭锁蛋白在3h表达开始增多,6h达顶点,分别为C组的（6．65±0．24）和（6．25±0．26）倍,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。（2）体外实验部分：⑥组的Pim-3及闭锁蛋白的表达与④⑤组之间的差异均有统计学意义（均P〈0．05）,而④⑤⑥组之间ICAM-1表达及细胞凋亡差异无统计学意义。③组Pim-3、闭锁蛋白和ICAM-1的表达及细胞凋亡与①②组之间的差异有统计学意义（P〈0．05）。另外,①②③组的ICAM—1表达与④⑤⑥组之间的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论原癌基因Pim-3不但能抑制肠上皮细胞凋亡,而且还能够增强闭锁蛋白的表达,抑制脂多糖引起的肠道局部炎症反应,从而达到保护肠道机械屏障的作用。