粒细胞缺乏症患者血象及骨髓象特点分析

目的探讨粒细胞缺乏症的外周血常规、骨髓象及铁染色特点,为临床诊断治疗粒缺提供实验室依据。方法收集2010年1月至2016年4月我院108例确诊为粒细胞缺乏症患者的外周血常规、骨髓象及铁染色结果进行回顾性总结分析。结果 108例粒缺患者血常规按年龄共分为8组,>80岁组粒缺患者HGB,RBC明显减低,RDW明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05),余各组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。骨髓象按照增生情况可分为成熟障碍型和再生障碍型,其中成熟障碍型78例(72.2%),再生障碍型30例(27.8%),再生障碍型组淋巴细胞、单核细胞及浆细胞比例明显高于成熟障碍型组(P<0.05);粒系、粒红比值比明显低于成熟障碍型组(P<0.05);铁染色结果显示,粒缺患者平均外铁为1+,铁粒幼红细胞比例平均为22%,内外铁均不缺。结论加强粒细胞缺乏症患者的外周血常规及骨髓象的监测,了解骨髓中各类细胞的数量及形态变化,有助于粒细胞缺乏症骨髓象的诊断与分型,结合铁染色结果及病因分析有助于粒细胞缺乏症的及时诊断与治疗。     

改良保留灌肠法治疗溃疡性结肠炎疗效观察

目的探讨理想高效的治疗溃疡性结肠炎的保留灌肠方法。方法选择符合溃疡性结肠炎诊断标准且无并发症的患者40倒,随机分为观察组（采用改良保留灌肠法灌肠）20例和对照组（采用传统保留灌肠法灌肠）20例。比较改良保留灌肠法和传统保留灌肠法在溃疡性结肠炎患者治疗中的作用。结果根据灌肠后的便意感,灌肠药液保留时间,灌肠10min后的脉率,灌肠的依从性等评价指标,两组灌肠效果比较,经过x2检验,差异有统计学意义（P〈0．01,P〈0．05）。结论改良保留灌肠法用于溃疡性结肠炎的治疗较传统的保留灌肠法效果好。     

COL6A2基因3′-UTR区域功能单核苷酸多态性位点rs1044598参与miR-4252调节中国汉族人群先天性房间隔缺损

目的:探讨COL6A2基因3′非翻译区(3′-UTR)单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点对先天性房间隔缺损(congenital atrial septal defect,ASD)发病风险的影响及其可能的作用机制?方法:搜索PubMed及Hapmap数据库获得COL6A2基因3′-UTR区域中国汉族人群最小等位基因频率>0.05的SNP位点,随后通过miRNA-SNP功能网站预测SNP位点的功能情况并与本课题组前期ASD全基因组关联研究数据库比对,研究SNP位点与ASD的发病关联,最后对可能的功能位点进行功能学研究?结果:rs1044598位点AA基因型较野生TT基因型显著减少了36%的患病风险?HEK293T细胞?H9C2细胞以及SD乳鼠原代心肌细胞荧光素酶报告基因转染实验证实,miR-4252与COL6A2基因rs1044598不同基因型表达质粒共转染后,荧光强度在3个细胞系中均有显著差异 (P < 0.05)?结论:COL6A2基因rs1044598位点的变异可能与ASD的发病风险相关?miR-4252可通过与COL6A2的3′-UTR区域发生有效结合而下调基因的表达,而rs1044598位点的变异参与这一机制并减少ASD的发生?     

Gli抑制剂诱导胃癌细胞凋亡作用的研究

目的 研究Gli抑制剂GANT61对人胃癌细胞AZ521和AGS凋亡的作用.方法 应用不同浓度(0、10、20μmol/L)的GANT61处理AZ521和AGS细胞24 h后,蛋白免疫印迹法(Western blot)观察GANT61作用于AZ521和AGS细胞后对Gli-1、Gli-2、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达的影响.流式细胞术观察细胞凋亡及Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达.结果 Western blot结果显示GANT61可以剂量依赖性显著下调AZ521和AGS细胞Gli-1、Gli-2和Bcl-2蛋白表达和增加Caspase-3蛋白表达.流式细胞术检测显示10 μmol/L GANT61作用AZ521,AGS细胞后凋亡率为(19.37±0.81)％和(16.1±0.26)％,显著高于0 μmol/L GANT61凋亡率(4.23±0.35)％和(6.00±0.87)％(P＜0.05);10 μmol/L和20 μmol/L GAN761的AZ521细胞中Bcl-2蛋白表达水平分别为355.33±10.12、312.67±7.37,与0μmol/L GANT61 423.33±11.37相比显著降低(P＜0.05);10μmol/L和20 μmol/L GAN761的AGS细胞中Bcl-2蛋白表达水平分别为306.67±4.16、273.33±8.02,与0 μmol/L GANT61388.33±11.06相比显著降低(P＜0.05);10 μmol/L和20 μmol/L GANT61的AZ521细胞中Caspase-3蛋白表达水平分别为305±9.64、360.24±8.54,与0 μmol/L GANT61 261.12±11.53相比显著增高(P＜0.05);10 μmol/L和20 μmol/L GANT61的AGS细胞中Caspase-3蛋白表达水平分别为255.00±6.56、310.67±8.50,与0μmol/L GANT61 198.33±2.50相比显著增高(P＜0.05).结论 GANT61通过特异性抑制Gli-1,Gli-2蛋白表达从而调节AZ521和AGS细胞中Bcl-2和Caspase-3蛋白表达水平,诱导细胞凋亡.     

CVB3心肌炎CTL亚类TCR Vβ基因取用格局分析

目的探讨柯萨奇病毒（CVB3）心肌炎细胞毒T细胞（CTL）亚类（ACTL、VCTL、MCTL）TCR CDR3 Vβ基因取用格局。方法无菌摘取72h内新生Balb／c鼠心脏,培养单层心肌细胞并将其分为三组,分别用CVB3、放线菌素D处理和不经过任何处理;实验组制备CVB3心肌炎鼠模型,处死后将其肠系膜淋巴结制成单细胞悬液,分别加入上述三组单层心肌细胞,采用免疫吸附法获取ACTL、VCTL、MCTL,对照组鼠为正常小鼠处死后取肠系膜淋巴结制成单细胞悬液;采用MTT法对实验组ACTL、VCTL、MCTL和对照组T细胞进行细胞毒鉴定;常规进行RT-PCR,判断实验组细胞及对照组细胞的TCR Vβ基因取用格局。结果对照组T细胞表达Vβ基因全部20个家族,而实验组三类CTL的Vβ基因取用格局呈现明显的限制性,ACTL优势表达Vβ36、Vβ8．1、Vβ8．2、Vβ8．3,MCTL优势表达Vβ5．1、Vβ8．1、Vβ8．2、Vβ8．3,而VCTL优势表达Vβ7、Vβ8．1、Vβ8．2、Vβ8．3。结论CVB3心肌炎中导致心肌细胞损伤的CTL受到特异性抗原刺激后其TCR Vβ基因取用格局呈现明显的限制性。     

5’-氮杂-2’-脱氧胞苷对 HT-29 和 LoVo 结直肠癌细胞株中 Wif-1 基因甲基化状态、mRNA 表达及蛋白表达的影响

目的：探讨甲基化酶抑制剂5’-氮杂-2’-脱氧胞苷（5’-Aza-2’-deoxycytidine,5’-Aza-CdR）对结直肠癌细胞株HT-29和LoVo中W if-1基因甲基化水平及蛋白表达的影响。方法用不同浓度（0.5、1.0、1.5μmol/L）5’-Aza-CdR处理结直肠癌细胞株HT-29和LoVo。应用TaqMan探针为基础的实时定量PCR（Methylight）方法、SYBR Green PCR方法及蛋白印迹实验（Western blot）检测药物处理前后HT-29和LoVo细胞中W if-1基因的甲基化状态、mRNA和蛋白表达。结果 Methylight检测HT-29和LoVo细胞中Wif-1蛋白在药物作用后异常甲基化得到逆转;实时荧光定量PCR和Western Blot检测到0.5、1.0、1.5μmol/L 5’-Aza-CdR处理后W if-1基因mRNA和蛋白重新表达,实时荧光定量PCR检测DMSO对照组和不同浓度5’-Aza-CdR（0.5、1.0、1.5μmol/L）在HT-29细胞株相对表达量分别为（1.000±0.000）、（1.207±0.052）、（1.790±0.033）和（2.016±0.123）;在LoVo细胞株相对表达量分别为（1.000±0.000）、（1.294±0.048）、（1.893±0.061）和（2.204±0.041）。Western blot检测Wif-1蛋白检测DMSO对照组和不同浓度5’-Aza-CdR在HT-29细胞株相对表达量分别为（0.456±0.040）、（0.511±0.025）、（0.857±0.031）和（0.934±0.047）;LoVo细胞株相对表达量分别为（0.842±0.032）、（0.844±0.044）、（0.854±0.037）和（0.856±0.034）。以上作用均呈时间、剂量±赖性,W if-1基因mRNA在HT-29细胞株表达和LoVo细胞株表达差异均有高度统计学意义（F=144.823,P=0.000;F=476.195,P=0.000）。Wif-1蛋白表达在HT-29细胞株表达差异有高度统计学意义（F=129.674,P=0.000）,但Wif-1蛋白表达在LoVo细胞株表达差异无统计学意义（F=0.117,P=0.948）。结论结直肠癌细胞株HT-29和LoVo中W if-1启动子甲基化可能是导致该基因表达下调甚至失活的主要原因。5’-Aza-CdR能够较成功地逆转结直肠癌细胞株HT-29和LoVo中W if-1基因的甲基化状态?     

Effect of Qingre Quyu Granule (清热祛瘀颗粒) on stabilizing plaques in the brachiocephalic artery of apolipoprotein E deficient mice

Objective： To investigate the effect of Qingre Quyu Granule （清热祛瘀颗粒, QRQYG） on stabilizing vulnerable plaques in apolipoprotein E （ApoE） defficient mice. Methods： Seventy-two male ApoE defficient mice were given a high-fat diet from 6 weeks of age. At the 16th week, all the mice were randomized into 3 groups： the QRQYG group, the simvastatin group, and the control group. Sixteen weeks after administration of 0.9 g/kg QRQYG, 3 mg/kg simvastatin or 10 mg/kg sodium chloride per day to the respective groups, the animals were euthanized. The pathological morphologic changes in the vulnerable plaques were evaluated, the matrix metalloprotease-9 （MMP-9） expression was measured by immunohistofluorescence, the soluble intercellular adhesion molecule 1 （ICAM-1） was determined by ELISA, the nuclear factor kappaB （NF-κB） subunit p65 was measured by quantitative RT-PCR, and, finally, thrombospondin-1 （TSP-1） was determined by the immunohistochemical method. Results： The plaque cross-sectional area in the brachiocephalic artery （23.7%, P0.01）, the lipid core of the plaque （43.1%±3.1%）, and the number of buried ？brotic caps of the plaque were significantly decreased in the QRQYG group compared to the control group （both P0.01）; furthermore, the thickness of the ？brotic cap of the plaque increased and the intra-plaque hemorrhage of the plaque decreased. The serum soluble ICAM-1 （27.1±5.1 μg/mL）, the protein expression of MMP-9 and TSP-1 and the p65 mRNA expression increased in the QRQYG group in comparison with the control group （P0.05 or P0.01）. Conclusion： QRQYG could stabilize the vulnerable plaque through inhibition of the inflammatory response.     

高频彩超引导下Encor微创旋切术在乳腺肿块切除中的应用

目的探讨高频彩超引导下,Encor微创旋切术在乳腺肿块切除术中的应用价值.方法 33例女性患者,在高频彩超实时监测引导下,应用Encor旋切系统,切除80个乳腺肿块.结果术后即刻超声检查乳腺肿块均被完整切除,无明显疼痛不适,未发生感染及其他并发症.结论高频彩超引导下乳腺肿块Encor微创旋切术,具有定位准确、有利于肿块完整切除、切口瘢痕小等优点,是乳腺良性肿块手术方法中,除传统外科手术外的又一种有效的微创手术方法.     

CO2激光照射心包经穴位对冠心病Ⅱ段导联心电图ST的即刻影响

目的 观察CO2激光照射心包经穴位对冠心病Ⅱ导联心电图的影响.方法 将30例冠心病Ⅱ导联心电图ST段下移的患者分成3组,分别给予CO2激光照射、针刺、CO2激光照射加针刺刺激心包经穴位,比较其心电图的变化.结果 3组治疗20min后,ST段均出现即刻改变,出现率针刺组为94.7%,CO2激光组为87.5%、CO2激光加...     

无环鸟苷对K562细胞的抗增殖和诱导分化作用

目的：探讨无环鸟苷(ACV)对人白血病细胞的抗增殖和诱导分化作用。方法：将无环鸟苷加入K562细胞培养4 d，测定其活细胞数目、联苯胺染色阳性率，光镜观察形态、组织化学染色。结果：在ACV的作用下，K562细胞的增殖受抑，生长分数降低，并且向具有合成血红蛋白能力的细胞分化。结论：ACV对K562细胞具有抑制增殖和诱导分化作用,该结果可为慢性粒细胞白血病的治疗探索新的途径。