Effect and Mechanism of Ganoderma lucidum Polysaccharides on Human Fibroblasts and Skin Wound Healing in Mice

Objective: To investigate the effects of Ganoderma lucidum polysaccharides(GL-PS) on human fibroblasts and skin wound healing in Kunming male mice and to explore the putative molecular mechanism. Methods: Primary human skin fibroblasts were cultured. The viability of fibroblasts treated with 0, 10, 20, 40, 80, and 160 μg/mL of GL-PS, respectively were detected by 3-4,5-dimethyl-2-thiazolyl-2,5-diphenyl-2-Htetrazolium bromide(MTT). The migration ability of fibroblasts treated with 0, 10, 20, and 40 μg/mL of GL-PS were measured by transwell assay. The secretion of the C-terminal peptide of procollagen type Ⅰ(CICP) and transforming growth factor-β1(TGF-β1) in the cell supernatant was tested by enzyme-linked immunosorbent assay. The expression of β-catenin was detected by Western blot. Furthermore, the Kunming mouse model with full-layer skin resection trauma was established, and was treated with 10, 20, and 40 mg/mL of GL-PS, respectively as external use. The size of the wound was measured daily, complete healing time in each group was recorded and the percentage of wound contraction was calculated. Results: Compared with the control group, 10, 20, and 40 μg/mL of GL-PS significantly increased the viability of fibroblasts, promoted the migration ability of fibroblasts, and up-regulated the expressions of CICP and TGF-β1 in fibroblasts(P0.05 or P0.01). The expression of β-catenin in fibroblasts treated with 20 and 40 μg/mL of GL-PS was significantly higher than that of the control group(P0.01). Furthermore, after external use of 10, 20, and 40 mg/mL of GL-PS, the rates of wound healing in mice were significantly higher and the wound healing time was significantly less than the control group(P0.05 or P0.01). Conclusion: A certain concentration of GL-PS may promote wound healing via activation of the Wnt/β-catenin signaling pathway and up-regulation of TGF-β1, which might serve as a promising source of skin wound healing.     

健胃愈疡片联合三联疗法治疗反流性食管炎

【摘要】 目的 探讨健胃愈疡片联合三联疗法治疗反流性食管炎的临床疗效。方法 选择2015年2月~2017年2月我院接诊的90例反流性食管炎患者,通过随机数表法分为观察组和对照组各45例,在基础治疗上,对照组给予三联疗法（奥美拉唑+甲硝唑+阿莫西林）治疗,观察组联合健胃愈疡片治疗,两组均连续治疗4周。比较两组治疗前后血清胃泌素（GAS）、一氧化氮（NO）、生长激素释放多肽（Ghrelin）、瘦素（Leptin）和中医证候积分的变化,并比较治疗后粘膜愈合率及临床疗效。结果 治疗后,两组血清GAS、Ghrelin较治疗前均显著升高,血清NO、Leptin显著降低（P＜005）,观察组血清GAS、Ghrelin明显高于对照组,血清NO、Leptin明显比对照组低（P＜005）;治疗后,两组烧心、反酸、胸痛症状积分较治疗前均显著降低（P＜005）,观察组烧心、反酸、胸痛症状积分均明显比对照组低（P＜005）;观察组粘膜愈合率明显高于对照组（P＜005）;观察组临床总有效率明显高于对照组（P＜005）。结论 健胃愈疡片联合三联疗法治疗反流性食管炎效果显著,可有效促进食管粘膜愈合、缓解临床症状,促进临床疗效提高,可在临床推广应用。     

一项基于单中心的多发性硬化的临床流行病学回顾性分析

【目的】总结华南地区多发性硬化（MS）诊断和治疗现状,为我国MS诊治提供参考。【方法】选取中山大学附属第三医院2011年至2019年3月出院第一诊断MS患者,按发病年龄分为儿童组（<14岁）及成人组（≥14岁）,从流行病学、症状学、辅助检查及治疗情况进行回顾性分析。【结果】296例患者入组;男女比1∶1.67,发病年龄中位数26岁,复发缓解型占65.9%。首发症状肢体无力130例（43.9%）、感觉障碍118例（39.9%）、视力障碍55例（18.6%）,成人与儿童组感觉障碍（114vs.4,Z=-2.155,P=0.031）与发作性症状（4vs.3,Z=-3.610,P=0.000）有统计学差异;复发症状方面,总复发次数712次,其中肢体无力380次（53.4%）,感觉障碍265次（37.2%）,视力障碍134次（18.8%）,成人组与儿童组在运动、感觉、视力、其它眼部症状及发作性症状方面均有统计学差异;脑脊液寡克隆带（OCB）阳性率45.5%,MOG抗体阳性率16.7%。MRI显示脑室旁T2病灶≥9患者57.4%,皮质与近皮质病灶28.1%,幕下病灶0.3%,视神经病灶63.2%,两组无统计学差异。既往治疗药物包括糖皮质激素（使用率79.7%）,β干扰素（15.9%）,硫唑嘌呤（13.9%）;目前正在使用治疗药物包括糖皮质激素（15.5%）,利妥昔单抗（9.1%）,硫唑嘌呤（8.1%）,特立氟胺（8.1%）。【结论】MS的发病年龄、性别、临床症状、影像学等信息与亚洲既往文献报道相似。治疗方面,新型疾病修饰治疗（DMT）药物使用呈上升趋势。     

超声乳化白内障摘除联合小梁切除术对眼表的影响

目的：采用Keratograph 5M眼表综合分析仪比较小梁切除术和超声乳化白内障摘除联合小梁切除术对眼表的影响。

方法：纳入原发性闭角型青光眼合并白内障患者62例62眼,按手术方式分为两组：小梁切除术组32例32眼,超声乳化白内障摘除联合小梁切除术组(青白联合手术组)30例30眼。运用Keratograph 5M评估术前,术后3d,1、 3mo的非侵入性首次泪膜破裂时间(NifBUT)、非侵入性平均泪膜破裂时间(NiaBUT)、泪河高度(TMH)和角膜荧光素染色评分(CFS)。

结果：术前两组患者眼表参数比较差异均无统计学意义(P>0.05)。术后3d青白联合手术组的NiaBUT、NifBUT、CFS、TMH最差,分别为10.13±1.48、12.59±1.96s、0.80±0.22分与0.31±0.02mm,变化幅度明显高于小梁切除组(均 P<0.05),术后1mo两组的各项指标均有所恢复,但直到术后3mo仍未完全恢复到术前水平。

结论：眼表综合分析仪可以客观、精确地用于评估抗青光眼手术后泪膜功能的变化。在术后3mo短期内超声乳化白内障摘除联合小梁切除术比单纯小梁切除术对眼表的影响更为严重,提示在此期间应加强对眼表的护理。     

NLRP3/IL-1β通路在增殖性糖尿病视网膜病变中的作用机制

目的：探究核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)/白介素-1β(IL-1β)通路在增殖性糖尿病视网膜病变中的作用机制。

方法：收集2015-09/2018-03我院眼科收治的增殖性糖尿病视网膜病变患者49例49眼(研究组)和特发性黄斑裂孔患者41例41眼(对照组)。检测研究组患者视网膜增殖前膜与对照组患者黄斑前膜中NLRP3蛋白表达情况、活性氧簇(ROS)、丙二醛(MDA)水平与超氧化物歧化酶(SOD)活性,测定两组患者玻璃体中IL-1β与IL-18浓度。

结果：研究组患者视网膜增殖前膜中NLRP3蛋白阳性表达率明显高于对照组患者黄斑前膜(90% vs 5%,P<0.05),且研究组患者视网膜增殖前膜中ROS与MDA水平明显升高,而SOD活性明显降低。研究组患者玻璃体中IL-1β、IL-18浓度(30.84±7.15、97.61±15.73pg/mL)均明显高于对照组(4.63±0.92、52.07±11.38pg/mL)。

结论：NLRP3与IL-1β在增殖性糖尿病视网膜病变组织中呈高表达,NLRP3/IL-1β通路可上调炎性因子与氧化因子表达水平,促进疾病发展。     

慢性泪囊炎泪道引流管置入术后导管留置最佳时机探讨

目的：探讨慢性泪囊炎行泪道引流管置入术后导管留置的最佳时机。

方法：回顾性选取2011-04/2016-10于我院行泪道引流管置入术的慢性泪囊炎患者143例143眼,根据术后导管留置时间进行分组,其中A组患者50例50眼术后导管留置6wk,B组患者57例57眼术后导管留置9wk,C组患者36例36眼术后导管留置12wk。比较三组患者术后临床疗效、视力、溢泪和复发情况及并发症发生情况。

结果：拔管当天,A组和B组患者临床疗效总有效率(94%和93%)优于C组(39%)(均P<0.0167),但拔管后3mo,三组患者临床疗效总有效率(56%、51%、36%)、视力、溢泪发生率(46%、53%、56%)均无明显差异。拔管后随访6mo,三组患者术后复发率(4%、7%、19%)无明显差异(P=0.056),但C组患者术后并发症发生率(25%)明显高于A组(4%)和B组(7%)(均P<0.0167)。

结论：慢性泪囊炎行泪道引流管置入术后导管留置6wk或9wk临床获益优于12wk,更具临床应用价值。     

可视化角膜生物力学分析仪评价FS-LASIK、SBK、LASEK术后生物力学变化

目的：研究3种角膜屈光手术在手术前后角膜生物力学的变化及不同术式间的差异。方法：前瞻性研究。对2016年2-4月南京医科大学附属南京医院眼科行准分子激光手术的患者64例（125眼）手术前后的角膜生物力学参数进行分析,其中55眼行飞秒激光制瓣准分子激光原位角膜磨镶术（FS-LASIK）,47 眼行准分子激光前弹力层下角膜磨镶术（SBK）,23眼行准分子激光上皮下角膜磨镶术（LASEK）。应用可视化角膜生物力学仪（CST）对患者进行测量,选取其中第一压平时间（AT1）、第二压平速度（Vout）、最大压陷曲率半径（HC-radius）、最大压陷幅度（DA）、眼压（IOP）进行分析。术后1 d、1 周、3 个月进行随访。采用单因素方差分析、Pearson相关分析、配对t检验进行数据分析。结果：FS-LASIK组中各项生物力学参数与中央角膜厚度（CCT）（ AT1：r=0.455,P<0.001;Vout：r=-0.286,P=0.034;HC-radius：r=0.357,P=0.007;DA：r=-0.341,P=0.011;IOP：r=0.436,P=0.001）、角膜剩余基质床厚度（RST）（ AT1 r=0.563,P<0.001;Vout：r=-0.417,P=0.007;HC-radius：r=0.552,P<0.001;DA：r=-0.395,P=0.012;IOP：r=0.516,P<0.001）、最大切削深度（AD）（ AT1：r=-0.721,P<0.001;Vout：r=0.466,P=0.002;HC-radius：r=-0.407,P=0.009;DA：r=0.596, P<0.001;IOP：r=-0.612,P<0.001）均有较强相关性。SBK组中各项生物力学参数均与CCT（AT1：r=0.364,P=0.012;Vout：r=0.408,P=0.004;HC-radius：r=0.326,P=0.025;DA：r=-0.362,P=0.012;IOP：r=0.387,P=0.007）有较强的相关性。LASEK组中仅AT1（r=0.625,P=0.001）、IOP（r=0.624,P=0.001）与CCT有相关性。3 组的AT1、HC-radius、IOP和CCT较术前均减小（均P<0.05）,Vout、DA较术前均增加（均P<0.05）。3组间比较,术后1 周时FS-LASIK组的AT1、IOP值明显大于LASEK组（AT1：F=7.313,P=0.001;IOP：F=4.979,P=0.009）,Vout和DA值明显小于LASEK组（Vout：F=3.420,P=0.038;DA：F=9.024,P<0.001）,SBK组的各项参数值位于2 组之间,与FS-LASIK组差异无统计学意义;术后3 个月时,3 组间差异无统计学意义。结论：在角膜厚度足够时,3 种手术方式均能安全可靠地矫正近视。FS-LASIK由于飞秒激光切削的精确性和优越性,术后能够更快恢复生物力学的稳定性。LASEK的生物力学变化与剩余基质床厚度和切削深度的相关性较低,在患者近视度数较高,角膜相对较薄时,可以优先考虑该术式。     

微信干预对青光眼患者体力活动量的影响

观察利用微信干预增加青光眼患者体力活动的效果。方法：前瞻性随机对照研究。选择2018年 6-12月于温州医科大学附属眼视光医院门诊确诊的青光眼患者102例作为研究对象。利用Excel生成的随机数随机分为对照组和干预组。对照组患者仅在门诊入组时进行运动宣教,并告知其可增加每天的运动步数;干预组患者入组时进行运动宣教,告知其可增加每天的运动步数的同时,加入微信群进行运动提醒干预。所有患者均需利用运动监测仪器完成基线1周和随访1个月的体力活动监测。采用卡方检验、独立样本t检验、Mann-Whitney U检验、配对t检验及Wilcoxon符号秩检验进行数据分析。结果：排除30例基线运动量较大（步数>12 000步/d）、依从性不好及其他原因失访的患者,最终纳入72例（对照组42例,干预组30例）。干预组患者干预后的步数（t=4.94,P<0.001）,运动消耗的卡路里（Z=-2.87,P=0.004）,代谢当量（Z=-3.30,P=0.001）,中等强度体力活动时间（Z=-2.89, P=0.004）,高强度体力活动时间（t=2.57,P=0.016）及中高强度体力活动时间（Z=-3.01,P=0.003）均较基线增加;轻度体力活动时间（t=-2.14,P=0.041）和久坐静止不动次数较干预前减少（t=-2.76, P=0.022）。对照组随访的步数也较基线增加（t=3.29,P<0.001）,轻度体力活动时间较基线减少（t=-2.57,P=0.014）。另外,干预组的高强度体力活动时间增加量（随访-基线）（Z=-3.04,P=0.002）和超高强度体力活动时间增加量（Z=-2.06,P=0.040）明显高于对照组,差异均有统计学意义。结论：微信干预可以增加青光眼患者的每天运动步数和中高强度体力活动时间,减少患者的轻度体力活动时间和久坐静止次数。     

Duchenne�ͽ����Լ�Ӫ�������ٴ��ͻ������97������

??Objective??To analyze the clinical and gene mutation characteristics of Duchenne progressive muscular dystrophy ??DMD????summarize the gene mutation hotspots in 97 cases and to explore the correlation between clinical manifestations and genotype. Methods??Totally 97 patients with DMD diagnosed by genetic examination from January 2014 to 2018 were collected and analyzed. The clinical manifestations??serum analyses and gene mutation results were analyzed. Results??The main clinical manifestations of 97 patients??96 boys?? were feeding difficulties?? increased muscle enzyme and limb weakness. Creatine kinase??CK???? lactate dehydrogenase??LDH?? and aspartate aminotransferase??AST?? muscle enzymes were significantly increased. By combining deep-sequencing technologies??the large deletions of DMD gene mutation was in 62 cases??63.92%????there were 11 cases??11.34%?? of large duplication mutation??and 24 cases??24.74%?? of point mutation. All of the mutations could occur in any position in the DMD gene??but there were two hot spots??45 cases were located in the central region gene exon 45??55??72.58% ????12 cases of deletion mutation were located in 5’exon end exon 2??19 area??19.35%??. Conclusion??The main clinical manifestations of the DMD children are feeding difficulty??increased muscle enzyme and limb weakness. The patients with significantly increased muscle enzyme should receive a timely defection of DMD gene.     

试论岳甫嘉医案中不育的诊治思维

岳甫嘉诊病重视脉症合参,尤以诊脉见长;处方多用中和之剂,收固真阴,反对过用热药,耗散精血。诊治思维贯穿其著作《妙一斋医学正印种子编》上卷所载验案。此卷专门论述男性不育的诊治,虽仅载验案八则,但八者皆奇,诊治结合,涵盖多法,可归纳为“先清热毒,再施温补”“药用滑涩,当辨标本”“先治脾,后治肾”“脾肾同治”“先祛痰火,再滋肾阴”及“交通心肾”6类,诸法之中的诊治思维,蕴含奥妙,颇具特色,特作探析。