利用IGF-1基因敲除鼠乳腺癌模型研究IGF-1对血管生成的影响

目的探讨在低血清胰岛素样生长因子-1（IGF-1）水平与正常IGF-1水平的小鼠乳腺癌模型中应用血管生长抑制剂——人参皂甙（GS）Rg3后，IGF-1对血管生成的影响。方法应用7，12-二甲基苯蒽（DMBA）诱导肝脏特异性IGF-1基因敲除鼠（IAD鼠）及对照鼠建立原发乳腺癌模型，应用GSRg3进行干预治疗，利用免疫组化法检测乳腺癌组织中血管内皮生长因子（VEGF）和Ⅷ因子相关抗原（F8-RAg）表达水平，同时利用基因芯片技术检测小鼠乳腺癌及正常乳腺组织中相关基因的表达情况。结果LID鼠乳腺癌的发生率低于对照鼠（P〈0．05）；LID鼠乳腺癌组织中VEGF表达水平与微血管密度均低于对照组（P〈0．05）。LID鼠乳腺癌组织中IGF-1、成纤维细胞生长因子（FGF）1、肝细胞生长因子（HGF）和转化生长因子（TGF）-β1基因较对照组上调，成纤维细胞生长因子受体（FGFR）-2、血小板源性生长因子（PDGF）-A和PDGF-B基因较对照组下调；应用GSRg3后，LID鼠乳腺癌组织中VEGFa、表皮生长因子（EGF）、表皮生长因子受体（EGFR）、PDGF—A和FGFR-2基因较对照组上调，而IGF1和TGF-β1基因较对照组下调。结论IGF1促进小鼠乳腺癌的发生、发展，且与血管生长密切相关。血管生长抑制剂可能通过IGF-1及TGF-β1发挥抗肿瘤作用。     

膀胱肿瘤中EphA2 mRNA的表达及其生物学行为关系研究

目的研究受体酪氨酸激酶EphA2在膀胱肿瘤中的mRNA表达,并对其致癌机制加以初步探讨。方法应用实时荧光定量RT—PCR技术检测49例膀胱尿路上皮癌（bladder urothelial carcinoma,BUC）、19例膀胱内翻性乳头状瘤（inverted papilloma of blader,IPB）和10例正常膀胱组织标本中EphA2mRNA的表达,并通过2△△CT方法分析相对基因表达的差异。结果相对于正常膀胱组织,EphA2mRNA在IPB和BUc中的表达量明显增加,分别平均上调约2．06（2．06±0．84）倍和2．57（2．57±0．97）倍;在IPB与BUC组间的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。EphA2tuRNA的表达与膀胱肿瘤临床分期（r=0．471,P=0．001）及病理分级（r=0．286,P=0．047）呈正相关,与BUC其它各临床病理特征之间没有相关性（P〉0．05）。结论EphA2过表达可能促成了IPB的癌性转化以及膀胱肿瘤的恶性进展,其核酸调控机制可能发生在膀胱肿瘤早期,甚或更有可能是在癌前病变进展期中起重要作用。     

雷帕霉素抑制大鼠移植肝胆管上皮细胞增殖作用的研究

目的探讨雷帕霉素对大鼠移植肝胆管上皮细胞增殖及其周围成纤维细胞活化的抑制作用。方法“二袖套法”建立大鼠原位肝移植模型,并随机分为供肝冷保存1h组、12h组、雷帕霉素组（冷保存12h组术后给予雷帕霉素）、对照组。分别于术后1、3、7、14d检测血清ALT、TB、ALP,免疫组化法检测各组胆管上皮细胞增殖率及肌纤维母细胞分布,并统计各组生存率。结果冷保存12h组术后生存率明显低于冷保存1h组（P=0.0174）,血清ALT〉200IU/L、ALP〉160IU/L、TB〉3.6μmol/L,持续高于冷保存1h组（ALT〈160IU/L、ALP〈200IU/L、TB〈3.6μmol/L）,各时相点胆管上皮细胞增殖率（7%,27.8%,23.1%,17.8%）显著高于冷保存1h组（2%,6%,2.6%,2.3%）和对照组（1.3%）。冷保存12h组术后7、14d可见胆管周围较多肌纤维母细胞聚集;雷帕霉素组术后2周生存率与冷保存12h组接近（P=0.89）,胆管上皮细胞增殖率（5.9%,15.8%,13.6%,11.4%）明显降低,胆管周围肌纤维母细胞分布较少。结论冷保存-再灌注直接损伤肝脏,诱导胆管上皮细胞增殖及肌纤维母细胞聚集,雷帕霉素明显抑制胆管上皮细胞增殖及肌纤维母细胞活化并对移植肝具有保护作用。     

9-硝基喜树碱及其脂质体对HepG2、L02细胞周期和凋亡作用的研究

目的 研究9-硝基喜树碱及其脂质体对人肝癌细胞株HepG2和人正常肝细胞L02细胞周期、凋亡的影响及其可能的作用机制.方法 HepG2、L02细胞用含不同浓度9-硝基喜树碱及其脂质体的培养液孵育后,利用MTT法测定细胞活性,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡,WesternBlot验证周期相关蛋白和凋亡相关蛋白的表达变化.结果 9-硝基喜树碱及其脂质体对两种细胞生长呈时间和剂量依赖性抑制.药物处理后S期和G2/M期细胞明显增多,浓度大于0.1 μmol/L时24 h后HepG2细胞完全阻滞于S期;0.1 μmol/L孵育72 h后,超过95%HepG2细胞阻滞于G2/M期.药物对细胞凋亡的诱导作用也呈明显的剂量和时间依赖关系.Western Blot显示:Bax、Caspase3表达增高,Cyclin A、Cdk2、Cyclin E、Bcl-2表达减低.与L02相比,HepG2细胞对药物更加敏感.结论 9-硝基喜树碱及其脂质体可以通过调控细胞周期和诱导凋亡有效抑制细胞生长,其对肿瘤细胞的抑制作用强于正常肝细胞.9-硝基喜树碱脂质体体外抗肿瘤效果略强于9-硝基喜树碱单体.

Abstract：

Objective To investigate the modulating effects and explore their mechanism of 9-nitrocamptothecin and its liposomes to induce apoptosis and inhibit cell cycle in HepG2 and L02 cell lines. Methods Cells were incubated with 9-nitrocamptothecin(9NC) or with 9-nitrocamptothecin liposomes for 24 h, 48 h and 72 h, then, the cell viability was measured via MTT assay; cell cycle and apoptosis was evaluated by flow cytometry after stained by PI and Annexin V-PE/7AAD. Additional, Western Blot was used to evaluate the expression of cell cycle and apoptosis related protein. Results Both cells viability were apparently inhibited by the 9-nitrocamptothecin and 9-nitrocamptothecin liposomes, the inhibitory effect showed a time-dependent and dose-dependent manner. Both S and G2/M phases arrest were observed after incubated with drugs. HepG2 cell was completely arrested in S phase when 9NC concentration over than 0. 1 μmol/L after incubation for 24 h, while more than 95% cells arrested in G2/M phase when 9NC concentration is 0. 1 μmol/L after incubation for 72 h. Apoptosis induction effect also showed a time-dependent and dose-dependent manner. Western Blot results showed the expression of Bax and Caspase-3 were upregulated while Cyclin A, Cdk2, Cyclin E and Bcl-2 were downregulated. More importantly, the compounds were more cytotoxic to the cancer cell lines than to the normal liver cell. Conclusions 9-nitrocamptothecin and 9-nitrocamptothecin liposomes can potently inhibit cell growth via regulation of cell cycle and induction of apoptosis, and this effect was preferentially in cancer cell. Inhibitory of 9-nitrocamptothecin liposomes was slightly better than the 9-nitrocamptothecin.     

全身炎症反应与体外循环

体外循环（CPB）可使机体产生大量的炎症介质,引起全身炎症反应综合征（SIRS）,进一步发展导致多器官功能障碍综合征（MODS）,其发病机制目前较为公认的是“二次打击”学说。围体外循环期SIRS的预防和治疗策略很多,CPB装置的改进及减少炎症介质的生成是主要措施。随着对核转录因子NF-kB研究的不断深入,有可能从分子生物学水平调控CPB引发SIRS的程度。     

脂褐素成分A2E诱导人视网膜色素上皮细胞自噬及损伤的研究

目的 探讨N-亚视黄基-N-视黄基-乙醇胺(A2 E)能否诱导人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19细胞)的自噬及损伤反应,并从自噬的角度探索其与年龄相关性黄斑变性(AMD)发病相关的分子机制.方法 CCK-8法筛选A2E作用于ARPE-19细胞的最佳浓度用于后续实验.采用多重细胞因子检测技术检测A2E作用于ARPE-1...     

医院中心供氧实时监控系统的CAN总线接口设计

本文阐述了一种医院中心供氧实时监控系统中CAN总线接口的设计及验证过程。针对医院中心供氧实时监控系统数据传输和控制的要求,采用微处理器MSP430F149搭载CAN协议控制器MCP2515及收发驱动器PCA82C250实现。验证结果表明,该CAN总线接口通过其SPI接口实现了微处理器MSP430F149的CAN接口扩展,可以满足中心供氧实时监控系统数据传输和控制的需求。     

多模态功能MRI在糖尿病脑病中的应用研究

【摘要】目的 探讨多模态功能MRI用于早期诊断2型糖尿病（T2DM）脑病及其病情严重程度评估。方法 纳入2016年3月～2017年5月我院收治的49例T2DM合并脑病患者,按照病程长短分为A组（23例）（＜10年）与B组（26例）（＞10年）,同时招募健康志愿者21名为志愿者组。采用磁敏感加权成像（susceptibility weighted imaging,SWI）与MR波谱成像(magnetic resonance spectroscopy,MRS)对受试者左侧海马部位进行扫描,计算各组受试者相位值与蒙特利尔认知（Montreal of Cognitive Assessment,MOCA）评分之间是否存在相关关系。结果 3组MoCA评分差异无统计学意义（P＞005）;B组的SWI相位值、Ins/Cr值、Cho/Cr值均高于A组（P＜005）,A组高于志愿者组（P＜005）;A组NAA/Cr值高于B组（P＜005）,但显著低于志愿者（P＜005）;MoCA评分与A组、B组受试者SWI相位值成正相关关系,与A组、B组受试者的Ins/Cr、Cho/Cr、NAA/Cr均具有负相关关系。 结论 多模态功能MRI有助于早期诊断并评价T2DM糖尿病脑病(diabetic encephalopathy,DE)病情严重程度。     

重离子治疗恶性肿瘤对机体免疫功能的影响

目的 通过检测患者免疫球蛋白、T细胞亚群及NK细胞的变化.探讨重离子放射治疗恶性肿瘤是否对机体免疫功能产生影响.方法 将26例经病理学证实的恶性肿瘤患者采用重离子束局部外照射,在治疗前后分别取患者外周血,采用化学发光法,用全自动生化分析仪测定血清IgG、IgA、IgM的量,用流式细胞仪检测放疗前后T细胞亚群及NK细胞比例.结果 NK细胞、CD4^＋ T细胞、CD8^＋T细胞及CD4^＋ T/CD8^＋T在治疗前后无明显变化,免疫球蛋白IgG、IgA、IgM在治疗前后无明显变化.结论 重离子治疗对免疫功能无明显影响.     

荞麦包联合红外线治疗肾性下肢水肿临床观察

【目的】观察荞麦壳药包（简称荞麦包）外敷联合红外线照射治疗肾性下肢水肿的临床疗效。【方法】将63例肾性下肢水肿患者随机分为对照组31例和治疗组32例。对照组给予西医常规治疗,治疗组在对照组基础上给予荞麦包外敷联合红外线照射治疗,疗程为15 d。观察2组患者治疗前后体质量指标和小腿围指标的变化情况,并评价2组患者的临床疗效。【结果】（1）治疗1个疗程后,治疗组的总有效率为81.25%(26/32),对照组为61.29%(19/31),组间比较,治疗组的疗效明显优于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。（2）治疗后,2组患者的体质量指标和小腿围指标均治疗前明显降低（P<0.05）,且治疗组对体质量指标和小腿围指标的降低作用均明显优于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。【结论】在西医常规治疗的基础上应用荞麦包外敷联合红外线照射治疗肾性下肢水肿疗效确切,其疗效优于单纯西医常规治疗。