siRNA 靶向Her-2 逆转录病毒载体构建及其在SKOV3 中的表达

 目的 构建并鉴定Her-2特异性siRNA逆转录病毒载体，将其导入SKOV3卵巢癌细胞中，并初步筛选有效抑制Her-2表达的细胞株。方法 体外合成含针对Her-2特异基因序列的寡核苷酸并定向克隆入逆转录病毒载体RNAi—Ready pSIREN—RetroQ，构建的载体通过测序、酶切鉴定后，脂质体介导下转染到包装病毒细胞株PT67中，嘌呤霉素筛选并挑选细胞克隆，收获病毒上清，将病毒上清转染SKOV3中，经过嘌呤霉素筛选得到稳定抑制Her-2表达的SKOV3细胞株，并分别通过RT-PCR和免疫组化方法鉴定抑制Her-2表达的效果。结果 成功构建了重组逆转录病毒载体，转染包装病毒细胞株获得的病毒上清成功转染了SKOV3，并且抑制了Her-2的表达。结论 抑制Her-2表达的SKOV3细胞株的建立，为观察转染siRNA的逆转录病毒表达我体的肿瘤细胞恶性生物学行为变化奠定了实验基础。     

mTOR complex component Rictor interacts with PKCzeta and regulates cancer cell metastasis

Epidermal growth factor (EGF) mediates breast cancer cell chemotaxis and metastasis through mechanisms that involve the growth-regulatory mammalian target of rapamycin (mTOR) complex mTORC2, but the mechanisms involved remain obscure. Here, we report that the rapamycin-insensitive mTORC2 component protein Rictor is a critical mediator of metastasis in breast cancer cells. In patients with ductal carcinoma, Rictor expression was associated with increased lymph node metastasis. EGF induced translocation and colocalization of Rictor with protein kinase Cζ (PKCζ), a pivotal molecule in chemotaxis signaling. Further, Rictor coimmunoprecipitated with PKCζ in the absence of the mTORC2 complex. Small interfering RNA-mediated knockdown of Rictor inhibited EGF-induced PKCζ phosphorylation and translocation along with phosphorylation of the key F-actin binding protein cofilin. In parallel, Rictor knockdown reduced cellular chemotactic capacity and ablated pulmonary metastasis in a xenograft mouse model of breast cancer. Our findings identify Rictor as an important mediator of chemotaxis and metastasis in breast cancer cells.     

基于超高效液相-飞行时间质谱技术的 中药女贞子代谢组学研究

目的 :建立中药女贞子生品及不同工艺炮制品的代谢组学分析方法,比较研究其指纹图谱差异,探讨女贞子炮制机制。 方法 :采用超高效液相-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)及多元统计分析技术对生品及不同工艺炮制品进行指纹图谱差异比较分析。 结果 :生品和不同炮制品指纹图谱存在明显差异,且鉴定了一个产生差异的化学成分标志物- ligustaloside B,其在女贞子炮制品中的含量高于女贞子生品。 结论 :UPLC-Q-TOF-MS结合多元统计分析方法可对女贞子药材及其饮片进行质量评价,同时为炮制机制提供了一定依据。     

早期头针结合现代康复技术对脑卒中后偏瘫康复疗效观察

目的观察早期介入头针疗法结合现代康复技术对脑卒中后偏瘫患者运动功能和日常生活活动能力的影响。方法按照单盲、随机对照原则,选择135例生命体征稳定,神经病学体征不再进展的急性脑卒中患者,随机分为头针康复组（45例）,康复组（45例）,头针组（45例）。分别采用头针结合现代康复治疗,单纯现代康复治疗和单纯头针治疗。治疗6个星期后,采用简式Fugl—Meyer评分、Barthel指数、神经功能缺损程度评分作为评定标准进行统计学处理。结果治疗6个星期后,三组患者的Fugl—Meyer及Barthel指数评分提高,与治疗前自身对比,差异有统计学意义（P〈0．01）。与康复组和头针组治疗后对比,头针康复组的Fugl—Meyer及Barthel指数评分均有统计学意义（P〈0．01）。头针康复组的愈显率、总有效率均高于康复组和头针组（P〈0．05）。结论脑卒中后偏瘫患者及早介入头针结合现代康复治疗,二者合用,协同提高疗效,可作为脑卒中早期康复的较佳方案。     

山楂饮片的质量评价研究

目的:建立以高效液相色谱指纹图谱与多指标成分定量相结合的山楂质量评价方法。方法:采用高效液相色谱-紫外检测法,以磷酸盐缓冲液(pH3.0)-乙腈梯度洗脱。结果:建立了山楂饮片高效液相色谱指纹图谱,指认了5个色谱峰:绿原酸,表儿茶素,原花青素B2,异槲皮素,及芦丁与金丝桃苷的共洗脱峰;测定了绿原酸与表儿茶素的含量,其中绿原酸含量为0.03%～0.06%;表儿茶素含量为0.09%～0.43%。结论:该方法可为山楂的质量评价研究提供实验数据。     

糖肾胶囊对代谢综合征大鼠模型的影响

目的:对照研究糖肾胶囊对代谢综合征大鼠模型的影响。方法:高脂饲料诱导代谢综合征模型,随机将大鼠分为正常对照组、代谢综合征组、文迪雅组、糖肾胶囊组;用正常血糖高胰岛素钳夹技术评价胰岛素抵抗,尾部加压法测量血压,称取体质量和右侧附睾旁脂肪组织湿质量,生化法检测血脂4项,放免法测空腹胰岛素。结果:糖肾胶囊组较代谢综合征组胰岛素敏感性指数(M值)明显升高,血清甘油三酯(TG)水平明显降低,体质量、内脏脂肪和血清胰岛素水平有降低趋势。结论:糖肾胶囊能改善代谢综合征大鼠模型的胰岛素抵抗和高胰岛素血症,同时改善了大鼠脂质代谢。     

肝硬化患者血脂水平检测及其意义

目的：探讨肝硬化对血脂水平的影响及其意义。方法：选取60例肝硬化患者作为病例组,同期健康体检者60例作为对照组,分别检测两组的血清总胆固醇（Tc）、甘油三酯（TC）、脂蛋白胆固醇（HDL—C、LDL—c）、载脂蛋白（apoAI、apoB）水平。结果：病例组血清TC、TG、HDL—C、LDL—C、apoAI、apoB水平明显低于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：肝硬化对血脂水平有影响,血脂水平在肝硬化的诊断和治疗中具有一定的参考价值。     

肝癌患者中医辨证分型与肝癌细胞体外化疗药物敏感性的关系

目的:观察不同中医辨证分型肝癌患者肝癌细胞体外化疗药物敏感性.方法:选取60例肝癌切除标本,利用MTT法测定不同证型肝癌患者对6种常用化疗药物的体外敏感性.结果:脾气虚组、肝气郁结组、瘀血阻络组之间各药敏感性有逐步下降趋势,但无统计学意义;各药在肝瘀脾虚阻络组敏感性明显下降.结论:不同中医辨证分型肝癌患者对化疗药物的敏感性存在一定差异,中西医结合个体化治疗肝癌,就是要根据具体患者药敏实验结果结合辨证论治设计治疗方案.     

柔肝冲剂抗肝纤维化的临床研究

为观察柔肝冲剂抗肝纤维化的作用,62例慢性乙肝患者以柔肝冲剂(黄芪、丹参、郁金等组成)治疗6个月.结果症状与体征有较大的改善;血清肝功能指标ALT、AST、GGT、SB下降非常显著(P＜0.01),AKP、G也有明显下降(P＜0.05);B超显示,肝脏大小、门静脉、脾静脉、脾厚等指标均有一定程度的改善;血清HA、CⅣ、PⅢNP、AGA与肝纤维化呈正相关关系,而LN、APoAI、TRF与肝纤维化呈负相关关系.病毒学观察显示可能有一定抑制病毒复制的作用;病理观察结果显示有一定的抗炎、抗肝纤维化作用.表明柔肝冲剂具有较明显的抗肝纤维化的作用.     

基于39项指标建立不同产地锁阳综合质量评价的模糊综合评价法模型

目的 建立模糊综合评价法(FCE)模型综合评价不同产地锁阳药材质量,为锁阳的综合质量评价提供新思路.方法 采集甘肃、内蒙古、新疆、青海、宁夏5个省份13个市/地区/州/旗的60批锁阳样品,从指标性成分、氨基酸、无机元素三方面测定39个评价指标的含量,构建锁阳药材的综合质量评价指标体系,将39个评价指标从高到低划分为4个...