多发性硬化患者中IL-12和孕酮的检测及其临床意义

目的检测IL-12和孕酮在多发性硬化(MS)患者中的水平,探讨男、女性多发性硬化患者存在的发病机制,比较男、女性MS患者在临床上发病的差异。方法采用酶联免疫(ELISA)法检测60例MS患者的脑脊液和40例患者血液中IL-12的水平,应用放射免疫法测定40例MS患者血液中孕酮的含量,并与40例正常对照组比较(以上标本男女各半)。结果男、女性MS患者血液中和脑脊液IL-12的含量明显高于正常对照组(P<0.01);女性患者血液中孕酮的含量明显低于正常对照组(P<0.01),男性患者血液中孕酮的含量与正常对照组差别不明显(P>0.05);女性患者血液中孕酮对IL-12的含量存在负相相关作用(r=-0.80,P<0.01),男性相关作用不明显(r=-0.38,P>0.05)。结论IL-12参与多发性硬化的发病过程;孕酮可能是男、女性患者发病差异性的原因之一。     

A comparative study of using comet assay and gammaH2AX foci formation in the detection of N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine-induced DNA damage.

Comet assay is a useful technique in the detection of DNA damages, particularly DNA strand breaks; and it has been utilized to show that a potent carcinogen N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG), can induce such damages. Recently, gammaH2AX foci formation has been suggested as another sensitive way to detect DNA double strand breaks (DSBs). However, there is no systematic comparison being conducted to evaluate the consistency of these two methods. Using MNNG as a model chemical, the sensitivity of neutral comet assay and gammaH2AX foci formation in detecting MNNG-induced damage was studied. It was found that at concentrations of 0.1 and 1 microg/ml, both methods can detect MNNG-induced damage in human amnion FL cells. However, at 0.1 microg/ml, comet assay revealed more percentage of cells with DNA damage than gammaH2AX fluorescence revealed. On the other hand, while gammaH2AX foci were readily formed at very early times by 10 microg/ml MNNG treatment, neutral comet assay did not detect any significant DNA damage at the same time points. In addition, 10 microg/ml MNNG induced a distinct whole nuclei staining pattern of gammaH2AX, a type of DNA damage which was not detected by neutral comet assay but could be detected by alkaline comet assay. Therefore, gammaH2AX may be used as a sensitive indicator for DNA damage.     

复合珊瑚羟基磷灰石人工骨的研制及其成骨效应

目的 自行研制复合珊瑚羟基磷灰石人工骨并评估其成骨效应。方法 取南海澄黄滨珊瑚碳酸钙在特定条件下经过“热液交换反应”，制成单纯珊瑚羟基磷灰石(coralline Hydroxyapatite，CHA)人工骨，并将其与基因重组骨形态发生蛋白(rhBMP2)和几丁糖复合制成了三种复合珊瑚羟基磷灰石(composite Coralline Hydroxyapatite，CCHA)人工骨，将此三种不同配型的复合人工骨和单纯CHA人工骨分别植入四组24只SD大白鼠肌肉内。手术后2、4、6、8周取材进行组织学观察，计数高倍单位视野内的成骨细胞数量和炎性细胞数量。采用SPSS8.0统计软件处理系统分析。结果 术后各时期取材结果显示：B组(CHA rhBMP2)和D组(CHA rhBM2P 几丁糖)的单位视野内成骨细胞数量明显多于A组(单纯CHA)和C组(CHA 几丁糖)：而C组和D组的单位视野内炎性细胞数量明显少于A组和B组。即D组人工骨的单位视野内的成骨细胞数量多、炎性细胞少。结论 rhBMP2-几丁糖／CHA复合人工骨不但具有显著的成骨诱导作用，还具有炎症反应轻及持续的诱导成骨作用，是一良好的骨移植替代物。     

原位杂交与免疫组化技术在HPV检测中的应用

目的：对两种HPV检测技术DNA原位杂交和免疫组化染色方法进行对比观察。方法：选取本院外阴尖锐湿疣病例95例，组织经固定、脱水、石蜡包埋、切片，分别采用原位杂交和免疫组化技术进行检测。结果：HPV—DNA阳性率为94．7％(90／95)，阳性反应由鳞状上皮表层的空泡细胞核内延伸至棘层中下部近基底层的细胞核内；HPV—Ag阳性率为63．1％(60／95)，阳性反应主要位于鳞状上皮表层的空泡细胞核内及角质层内。个别阳性细胞可在棘层出现。结论：原位杂交技术在敏感度、阳性率及阳性强度、背景染色等方面均优于免疫组化方法，为尖锐湿疣的确诊及临床治疗提供更准确、可靠的依据。     

不同剂量左旋多巴对帕金森病大鼠行为学影响

目的观察不同剂量左旋多巴治疗帕金森病（PD）的效果,并进一步探讨合理使用左旋多巴治疗PD的剂量。方法采用6-OHDA脑立体定向注射术建立大鼠PD模型,采用行为学观察法观察3种不同剂量左旋多巴[按体重10、50、100mg/（kg.d）]作用不同时间（1、3、5、7d）对PD大鼠黑质细胞毒性作用后的行为学变化以及停止左旋多巴治疗后7d各项指标的变化。结果与对照组比较,小剂量组大鼠旋转圈数随左旋多巴使用剂量和时间增加而减少,中、大剂量组大鼠旋转圈数随左旋多巴使用剂量和时间增加而增加;各组大鼠旋转启动时间随左旋多巴使用剂量和时间增加而减少,最高转速及持续时间则随使用剂量增加而增加。结论应尽可能以小剂量、间隔使用左旋多巴治疗PD。     

锌指蛋白A20 RNAi载体的构建及筛选

目的我们前期的实验结果显示A20 mRNA和蛋白在人脑胶质瘤组织及细胞系（U251、U87、BT325）中高表达，本研究拟构建A20RNAi载体，并检测其对U251细胞A20表达的抑制作用。方法构建三种针对人A20基因的真核干涉表达载体，以脂质体法将其分别转染人脑胶质瘤细胞系U251，以RT-PCR、蛋白印迹法检测各干涉载体对U251细胞中A20mRNA和蛋白表达的抑制作用。结果成功构建三种针对A20基因的RNAi载体，经RT-PCR、蛋白印迹检测筛选出对A20基因干涉效果最佳的载体，命名为pSilencer3．1-A20R1。结论成功构建A20基因干涉载体，为进一步探讨A20与脑胶质瘤恶性增殖、血管形成以及抗凋亡的关系奠定实验基础。     

软组织血管瘤16层螺旋CT血管成像诊断

目的探讨软组织血管瘤多排CT血管成像的影像表现方法回顾性分析临床、手术及病理证实20例软组织血管瘤CT平扫、增强和CT血管成像的不同表现结果CT平扫病灶呈软组织密度,5例灶内或灶缘见斑点状或斑块状高密度钙化灶;20例增强后病灶血管成像呈不同表现,12例动脉期瘤体内呈网状血管强化并见明显的瘤体供血动脉,其中单支供血动脉4例,2支以上多支供血动脉8例,供血动脉较对侧明显增粗瘤体内明显迂曲静脉血管6例,而静脉期瘤体表现为网状血管阴影强化8例病变动脉期瘤体不强化或仅轻微强化,且无明显供血动脉参与供血,静脉期瘤体逐渐均匀一致强化结论软组织血管瘤的多排螺旋CT血管成像可清晰显示软组织血管瘤的形态、大小、供血血管     

暴发性阴囊坏疽治疗9例体会

目的：探讨暴发性阴囊坏疽的治疗方法。方法：对9例患者均行外科清创、冲洗引流、抗感染等治疗，其中3例外暴露的睾丸暂置于浅表腔隙中，二期重建阴囊回纳睾丸，1例患者行高压氧治疗。结果：留置U形管引流者，重复清创手术的次数明显减少，体温及血常规恢复正常的时间较普通引流显著缩短，术后恢复迅速。结论：暴发性阴囊坏疽的治疗仍以清创及应用抗生素为主，术中多无须切除睾丸；条件许可，可配合高压氧治疗；U形多孔双向引流管在清创术后引流效果确切，对促进康复有明显优势。     

外显子6基因多态与系统性红斑狼疮的研究

目的　探讨肿瘤坏死因子受体Ⅱ (TNFRⅡ )外显子 6基因多态与华东地区汉族人群系统性红斑狼疮(SLE)易感性的关系。方法　采用聚合酶链式反应和限制性片断长度多态 (PCR -RFLP)方法对 34例SLE患者和 66例健康对照进行TNFRⅡ外显子 6基因分型。结果　在SLE患者与健康对照之间 ,TNFRⅡ外显子 6R等位基因频率(35 3 % /2 1 2 % ;OR =2 0 3 ,95 %可信限 :1 0 1～ 4 0 8;χ2 =4 63 ,P =0 0 31 )与基因型频率 (67 6 % /37 9% :OR =3 43 ,95 %可信限 :1 32～ 9 0 6 ;χ2 =7 97,P =0 0 0 5)均不同。结论　TNFⅡ外显子 6基因多态可能与华东地区汉族人群系统性红斑狼疮发病有关 ,携带R等位基因的个体发病危险增加     

丁酸对人结肠癌细胞株SW1116增殖及分化状态的影响

目的:探讨结肠中膳食纤维的酵解产物丁酸对人结肠癌细胞株生长、增殖及分化状态的影响。方法:将传代人结肠癌SW1116细胞株接种于不含及合不同浓度(2、3、4、7、10 mmol/L)丁酸的培养基中。经6、24、48和72h后,用四唑蓝(MTT)法测定细胞增殖率、细胞匀浆中癌胚抗原(CEA)及和碱性磷酸酶(ALP)的表达;同时用电镜观察细胞形态的改变。结果:丁酸对SW1116细胞株的生长抑制作用呈浓度依赖性,在所观察的丁酸浓度及时限内,最高抑制率达53.9％。同时丁酸能大大增加SW1116细胞CEA和ALP的表达;当丁酸浓度≥7mmol/L和培养时间≥48h时,二者增加最为显著(P<0.001)。电镜显示丁酸能使细胞表面微绒毛明显增多。结论:丁酸能抑制SW1116细胞株的生长并诱导其分化。