免疫印迹法测定Tp47蛋白与梅毒患者血清的免疫反应性

目的克隆Tp47基因、构建原核表达载体、表达并纯化Tp47蛋白,通过免疫印迹法(Western-Blot)检测其免疫反应活性。方法聚合酶链反应扩增Tp47基因,将Tp47克隆至pGEX-6P-1载体,构建重组表达质粒pGEX-6P1-Tp47,经测序鉴定正确后,转化大肠埃希菌BL21(DE3),经诱导表达后,用亲和层析方法纯化重组蛋白,鉴定正确后采用Western-Blot检测重组蛋白与梅毒阴性、阳性血清的免疫反应性。结果成功构建pGEX-6P1-Tp47原核表达质粒,表达、纯化后获得了相对分子质量约为71×103的重组蛋白;Western-Blot检测显示其能与梅毒阳性患者血清发生特异性反应,而与梅毒阴性患者血清无交叉反应性。结论成功克隆、表达、纯化Tp47重组蛋白,其与临床各期梅毒患者血清具有较好的免疫反应性,为Tp47重组蛋白用于梅毒早期诊断提供了理论依据。     

人乳头状瘤病毒基因分型联合薄层液基细胞学检测在宫颈病变筛查中的应用

目的：探讨人乳头状瘤病毒（HPV）基因分型联合薄层液基细胞学（TCT ）检测在宫颈病变筛查中的应用价值。方法采用导流杂交基因芯片法检测473例宫颈疾病患者 HPV 基因型别,TCT 做细胞学筛查,同时行阴道镜活检,以组织学为金标准,对结果进行分析。结果473例患者共检出 HPV 阳性169例,总感染率为35．7％;473例患者高危型 HPV （HR‐HPV）感染率为32．1％,TCT 检测阳性率为26．6％,对宫颈病变筛查的灵敏度、特异度、漏诊率、阳性预测值和阴性预测值差异无统计学意义（χ2＝3．444,P＝0．063）;HR‐HPV 与 TCT 联合检测对宫颈病变筛查的灵敏度、特异度、漏诊率、阳性预测值、阴性预测值分别为95．8％、77．7％、4．2％、52．3％和98．7％,灵敏度和阴性预测值均较单独 HR‐HPV 及 TCT 检测明显提高,漏诊率明显降低,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 HPV 基因分型联合 TCT 检测能明显提高宫颈病变筛查的灵敏度和阴性预测值,降低漏诊率,更加有效地筛查宫颈病变。     

游离雌三醇和人胎盘催乳素测定在子痫前期的意义

目的：探讨血清游离雌三醇(uE3)和人胎盘催乳素(hPL)与子痫前期的关系。方法选取2013年6月至2014年6月诊断为子痫前期的孕妇123例纳入观察组,同期健康孕妇150例纳入对照组,两组孕妇均分别在妊娠28~<32周和妊娠32~36周各采血一次,检测血清 uE3和 hPL 水平并进行比较。结果对照组妊娠结局优于观察组。随着孕周增加两组孕妇血清 uE3和 hPL 水平有升高趋势,在相同孕期中对照组血清 uE3和 hPL 水平均较观察组高,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论子痫前期孕妇血清 uE3和 hPL 水平下降,与妊娠结局相关。     

血细胞计数影响因素分析

本文分析血细胞计数的影响因素,发现血细胞检测结果受环境温度、放置时间、采血方式等因素的影响,检验人员在采血和检测过程中应尽可能排除各种影响因素,为临床提供真实可靠的检验结果。     

Molecular magnetic resonance probe targeting VEGF165: preparation and in vitro and in vivo evaluation

A new method for imaging the tumor human vascular endothelial growth factor 165 (VEGF 165) is presented. A magnetic resonance imaging (MRI) probe was prepared by crosslinking ultrasmall superparamagnetic iron oxide (USPIO) nanoparticles to the aptamer for tumor vascular endothelial growth factor 165 (VEGF165‐aptamer). The molecular probe was evaluated for its in vitro and in vivo activities toward VEGF165. Enzyme‐linked immunosorbent assay showed that the VEGF165‐aptamer–USPIO nanoparticles conjugate specifically binds to VEGF165 in vitro. A cell proliferation test showed that VEGF165‐aptamer–USPIO seems to block the proliferation of human umbilical vein endothelial cells induced by free VEGF165, suggesting that VEGF165 is an effective target of this molecular probe. In xenograft mice carrying liver cancer that expresses VEGF165, T₂‐weighted imaging of the tumor displayed marked negative enhancement 3 h after the intravenous administration of VEGF165‐aptamer–USPIO. The enhancement disappeared 6 h after administration of the probe. These results suggest the targeted imaging effect of VEGF165‐aptamer–USPIO probe in vivo for VEGF165‐expressing tumors. This is the first report of a targeted MRI molecular probe based on USPIO and VEGF165‐aptamer. Copyright © 2014 John Wiley & Sons, Ltd.     

不同体质量指数男性不育患者心理评估

目的：探讨不同体质量指数男性不育症患者的心理健康状况,为临床干预提供依据。方法将292例男性不育患者按照体质量指数分为3组,正常组84例,超重组117例,肥胖组91例。对3组患者应用症状自评量表进行测评分析。结果超重组和肥胖组症状自评量表总分及强迫、人际关系、抑郁、焦虑因子分均显著高于常模（P＜0．05）,总分及强迫因子分显著高于正常组（P＜0．05或0．01）;正常组总分及抑郁、焦虑因子分显著高于常模（P＜0．05）;入组被试体质量指数与强迫、抑郁、焦虑因子分呈显著正相关（P＜0．05）。结论肥胖和超重男性不育患者存在不同程度的心理问题,应对其予以有针对性的心理干预。     

芍药苷对骨髓间充质干细胞增殖的影响

背景：研究显示芍药苷具有补血及治疗自身免疫性疾病的功效,骨髓间充质干细胞对机体的造血及免疫功能也起着重要的作用,但芍药苷对骨髓间充质干细胞的增殖及细胞因子的分泌和表达有何影响报道较少。目的：探讨芍药苷对人骨髓间充质干细胞增殖及白细胞介素6表达的影响。方法：采用密度梯度离心法和贴壁培养法体外分离培养人骨髓间充质干细胞,用流式细胞术和成脂及成骨诱导法鉴定人骨髓间充质干细胞生物学特性, MTT法检测不同浓度芍药苷对人骨髓间充质干细胞增殖的影响, EL ISA 法测定芍药苷干预人骨髓间充质干细胞后培养上清液中白细胞介素6的分泌水平,RT-PCR 检测芍药苷干预后白细胞介素6 mRNA的表达情况。结果与结论：成功分离出骨髓间充质干细胞,具有成骨、成脂分化潜能。与对照组相比,芍药苷浓度为2μmol/L和10μmo l/L可明显促进骨髓间充质干细胞增殖。10μmol/L 芍药苷干预骨髓间充质干细胞后, G0/G1期细胞比例显著降低, S期细胞比例显著升高。10μmol/L 芍药苷干预组骨髓间充质干细胞白细胞介素6 的分泌和mRNA表达均显著高于对照组(P <0.01)。由此得出,一定浓度的芍药苷可促进骨髓间充质干细胞增殖,并提高骨髓间充质干细胞分泌白细胞介素6水平和基因表达。     

一个法布里病家系报道并文献复习

目的 :对1个法布里病(Fabry病)患者及其家系进行调查,分析其临床表现、实验室检查、α-半乳糖苷酶A(alpha-galactosidase A,α-Gal A)检测和基因突变,并对照文献复习,以提高医师对法布里病的认识。方法 :对1例法布里病先证者及其家系成员共21人进行家系调查,登记基本资料,同时行血尿常规、血生化、外周血粒细胞α-Gal A活性和基因检测以及眼科、耳听力、头颅MRI、经颅多普勒超声、心电图、超声心动图、肺功能等相关系统检查,α-Gal A活性检测采用底物荧光法,基因检测采用PCR直接测序法。结果 :121例家系成员中检测出11例法布里病患者;2患者的临床表现及辅助检查结果无特异性表现;3外周血粒细胞α-Gal A活性检测结果异常者有6例,GLA基因突变11例;4不同基因突变导致的法布里病患者的临床表现不同;5首次在一个法布里病家系中发现2个不同位点的基因突变,9例突变位于7号外显子(1098del C),2例突变位于4号外显子(596T>C,p.V199A);611例法布里病患者中经典型患者生活质量受影响较大,而迟发型者生活没有任何影响。结论:1法布里病在该家系成员中发生率高(11/21),因此对于法布里病先证者一定要进行家系调查,可早期发现家族中的患者;2法布里病患者的临床和实验室检查均缺乏特异性表现,但该病可累及多个系统,故应加强对临床表现为多系统受累患者的筛查;3α-Gal A活性异常多存在于经典型的法布里病患者中,而迟发型患者该检测结果常正常,因此诊断法布里病的金标准为基因检测,尤其是对于女性杂合子更重要;4法布里病患者因基因突变位点不同而导致临床表现不同;5法布里病父不传子,发现父子同时患病的异常情况时一定要寻找可能的原因,最终明确病因;6经典型法布里病患者的生活质量受影响明显。     

臭氧水消毒效果测定

以XSMJ-1型臭氧水发生器所产生的臭氧水进行试验。当臭氧浓度为0.26ppm时作用1分钟,可杀灭试验用细菌繁殖体,2.21ppm时可杀灭细菌芽胞。破坏血清中HBsAg,需2.10ppm浓度作用60分钟。臭氧水半衰期约36分钟。     

膝关节骨关节炎患者的肌肉功能与功能性行为能力

屈伸膝肌群的肌肉功能在膝关节骨关节炎（ｋｎｅｅｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ，ＯＡ）的病程中起重要作用。本文的目的在于了解ＯＡ的肌肉功能以及它与功能性行为能力之间的关系。随机抽样的２１例ＯＡ与对照组相比，其等速肌力参数明显减低。另外，ＯＡ在６０°／ｓ等速运动的伸膝肌力与功能性状态参数呈负线性相关，１８０°／ｓ等速运动的伸膝肌爆发力与２０ｍ行走时间呈明显负线性相关。