支气管动脉灌注化疗联合直线加速器放射治疗Ⅲa期非小细胞肺癌

目的　研究支气管动脉灌注化疗联合直线加速器放射治疗Ⅲa期非小细胞肺癌 (NSCLC)的可行性及临床价值。方法　 76例NSCLC患者随机分成A、B 2组 ,A组先行 2次支气管动脉灌注化疗 (BAI) ,第 2次BAI 1～ 2周后再行直线加速器放射治疗 (RT) ;B组单纯行 2次BAI (对照组 )。结果　临床疗效 ,A组 (BAI RT)和B组 (BAI)分别为 89.47%和 60 .5 3% (Ρ <0 .0 1) ;1、3年生存率 ,A、B组分别为 81.5 8%、5 0 .0 0 %和 60 .5 3%、2 1.0 5 % ( 0 .0 1<Ρ <0 .0 5 )。结论　支气管动脉灌注化疗联合直线加速器放射治疗Ⅲa期非小细胞肺癌的临床疗效和患者 1、3年生存率均显著提高     

关节镜下运用4股腘绳肌腱同期重建前后交叉韧带损伤

目的 关节镜下运用Intrafix和可吸收界面螺钉固定自体4股腘绳肌腱，同期重建前交叉韧带（anterior cruciate ligament，ACL）、后交叉韧带（posterior cruciate ligament，PCL），评估其疗效。方法 ACL、PCL同时损伤的患者16例，关节镜下以自体4股胭绳肌腱作为重建移植物，应用可吸收界面螺钉固定移植物股骨端，Intrafix钉鞘和可吸收锥形钉固定胫骨端，同期行ACL和PCL损伤重建术。7例行内侧副韧带修补，4例行外侧副韧带复合结构修复，2例行内外侧同时修复。所有患者按照国际膝关节评分委员会（International Knee Documentation Committee，IKDC）评分标准进行术前评估，均为D级。术前Lysholm评分为（36．5±3．7）分。结果 随访时间为12～18个月，平均14．6个月。终末随访时，IKDC总体评价：A级6例（38％），B级9例（56％），C级1例（6％），无D级患者。Lachman试验0～2mm8例；3～5mm6例；6～10mm2例（P〈0．05）。屈70°前后总位移0～2mm10例；3～5mm5例；6～10mm1例（P〈0．05）。屈70°后位移0～2mm12例；3～5mm4例（P〈0．05）。术后2个月Lysholm功能评分为（90．4±2．9）分，终末随访时为（93．4±3．5）分，与术前相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论 关节镜下以自体4股胭绳肌腱作为移植物，应用可吸收界面螺钉、Intrafix钉鞘和可吸收锥形钉固定股骨胫骨端同期重建ACL和PCL损伤，有利于早期积极的功能康复，膝关节功能恢复满意。     

可乐定透皮贴剂联合芬太尼静脉自控镇痛用于原发性高血压病人术后镇痛

目的 观察可乐定透皮贴剂联合芬太尼静脉自控镇痛(PCIA)用于原发性高血压(EH)病人术后镇痛的效果.方法 择期全麻下行腹腔镜胆囊切除术病人60例,均合并EH,依据术后镇痛方法的不同,随机均分为三组,肌注哌替啶组(P组)、芬太尼PCIA组(F组)和可乐定透皮贴剂联合芬太尼PCIA组(CF组).使用芬太尼1.0mg稀释至100ml,PCIA均采用负荷量-持续背景量-PCA量模式,背景剂量芬太尼20 μg/h,PCA追加剂量5 μg,锁定时间15 min.记录病人术后镇痛4、8、24、48 h VAS及Ramsay镇静评分,并记录不良反应和处理措施.监测入院时、术后24、48 h血浆内皮素(ET)及降钙素基因相关肽(CGRP)浓度、血糖(Glu),同时记录MAP、HR.结果 镇痛期间F、CF组VAS低于P组(P<0.01),CF组低于F组(P<0.05).Ramsay镇静评分F组高于P组(P<0.01),CF组高于F组(P<0.05),三组均无过度镇静.CF组MAP、HR术后较入院时明显降低(P<0.01),血浆ET、血浆CGRP浓度与入院时比较差异无统计学意义.术后ET、Glu浓度和MAP、HR F组低于P组,CGRP浓度高于P组(P<0.05).术后ET、Glu浓度和MAP、HR P组>F组>CF组;术后CGRP浓度:CF组>F组>P组(P<0.05).不良反应发生率三组差异无统计学意义.结论 对高血压病人,可乐定透皮贴剂增强芬太尼PCIA镇痛作用,使血流动力学更稳定.     

神经干细胞-脑源性神经营养因子基因工程细胞移植对大鼠缺血性脑损伤的治疗作用

目的 将脑源性神经营养因子(BDNF)基因转入大鼠海马原代培养的神经干细胞(NSCs)中,获得NSCs-BDNF基因工程干细胞并移植治疗大鼠缺血性脑损伤.方法 分离培养新生大鼠海马区NSCs,检测其增殖、分化等特性;构建逆转录病毒载体pLXSN-BDNF,转染NSCs,获得NSCs-BDNF基因工程干细胞,检测其BDNF的表达和活性;建立大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血模型,通过立体定向技术将NSCs-BDNF移植入模型缺血侧海马,进行组织学和行为学检测.结果 NSCs-BDNF移植后可以观察到动物行为学的改善,术后4周Longa评分1.343±0.293,脑切片可以观察到海马齿状回神经元数目的增加,术后4周存活率87.5%±6.6%,较对照有统计学意义(P＜0.05).结论 NSCs-BDNF移植对实验性大鼠缺血性脑损伤有修复作用.     

152例肝移植术后肝功能异常的肝活检

目的评价肝活检在明确肝移植术后肝损害病因中的作用，分析组织学诊断存在误差的常见原因，进一步提高肝活检的准确性，以利临床治疗。方法260例肝活检来自于152例肝移植受者，术后出现临床无法解释的肝功能异常，肝功能检测结果高于正常值的2倍以上。回顾组织学改变及最终的临床诊断，评价相符程度。结果大部分的组织学诊断与最终的临床诊断相符，有7例组织学改变为胆管炎后经进一步临床检查证实4例为血管并发症、2例为败血症、1例为保存性损伤。2例组织学诊断为保存性损伤的病例后证实为药物性肝损害。结论移植后肝活检可明确许多肝功能异常的原因；评判病变的严重程度，指导临床治疗；对一些复杂病例应将以往的活检和整个临床病程、其他实验室检查及影像学检查进行综合考虑，可提高诊断的准确性。     

携带肝细胞生长因子基因重组质粒在大鼠体内的组织分布研究

目的 研究携带肝细胞生长因子基因的重组质粒（pUDKH）经肌肉注射给药后在大鼠体内的组织分布及其与大鼠基因组DNA的整合情况。 方法 二级Wistar大鼠雌雄各20只，按体重和取样时间的不同随机分为12h、24h、3d、7d、14d、21d的各实验组（给予pUDKH，2．0mg／kg）和注射后3d取样的对照组（给予PBS，200ul／只），依次将各组大鼠摘眼球取血后脱臼处死，按脑、心、肺、胸腺、肝、肠系膜淋巴结（MLN）、脾、肾、生殖腺、左腿肌肉、右腿肌肉的顺序取样。经典酚／氯仿抽提法提取各组织总DNA，应用紫外分光光度计测定其浓度和纯度，PCR方法检测其中的D肌动蛋白基因；巢式PCR检测各组织总DNA中pUDKH的分布情况；ApnL I酶切分离pUDKH分布阳性各组织中的pUDKHDNA和基因组DNA，巢式PCR检测pUDKHDNA与基因组DNA的整合情况。 结果 各组织总DNA浓度与纯度均符合实验需要，并适于采用PCR或巢式PCR方法进行体内组织分布及基因组DNA整合情况检测。巢式PCR检测显示，在各时间点的右腿肌肉与外周血、注射后3和7d的肝脏、3和14d的生殖腺、7d的胸腺、7和14d的MLN与左腿肌肉等组织中pUDKH分布均呈阳性，而在各时间点的脑、心、肺、脾、肾等组织中pUDKH分布均呈阴性。pUDKH分布阳性的各组织中均未检测到pUDKHDNA与基因组DNA的整合。 结论 pUDKH经肌肉注射给药后，在各时间点大鼠体内各组织中呈现不同的分布谱。在pUDKH分布阳性的各组织中，pUDKHDNA与基因组DNA发生随机整合的概率较低。     

人白细胞介素12在哺乳动物细胞中的稳定表达及其生物活性的研究

目的采用遗传基因工程方法获得具有生物活性的人白细胞介素12,探索其治疗肿瘤和慢性肝炎的可行性。方法采用已克隆的国人IL-12基因序列,利用内部核糖体切入位点(IRES)完成IL-12P35、P40双亚基共表达载体的构建,通过转染CHODHFR缺陷细胞,双抗夹心ELISA法筛选阳性克隆,MTX加压扩增,PCR检测其基因整合,T淋巴细胞增殖和诱生γ干扰素实验检测其生物活性。结果获得了稳定高效表达人IL-12的工程细胞系,表达产物为70×103左右的糖蛋白。结论本研究得到的基因重组人IL-12具有良好的生物活性,有强的诱导产生γ干扰素的能力和诱导活化T淋巴细胞增殖能力。     

脐血CD34+细胞体外定向诱导分化为T淋巴细胞的实验研究

目的：建立利用人造血干／祖细胞体外定向诱导分化为T淋巴细胞的方法，为研究T细胞生物学特性及细胞免疫提供技术平台。方法：MACS方法分离人脐带CD34^ 细胞接种到人胎儿胸腺基质单层细胞上，IMDM液体培养基含20％人AB血清并加入FL、IL-12、IL-7和IL-2细胞因子组合，于培养7、14、21、28、35、42天取非贴壁细胞利用流式细胞仪对细胞表型进行检测，并进行细胞形态学分析。结果：2周后，CD4^ CD8^ 非成熟T淋巴细胞占细胞总数的0．3％-13．3％，4-5周CD4^ CD8^ T淋巴细胞达到高峰占16．6％-26．5％，且CD3^ CD4^ CD8^ 和CD3^ CD4^-CD8^ T淋巴细胞逐渐增多，6周后达26．5％～64．9％和11．6％-38．9％。培养成熟的T淋巴细胞经PHA IL-2刺激后瑞氏染色鉴定可见大原始淋巴细胞存在。结论：利用人脐血CD34^ 在体外人胎儿胸腺基质单层细胞上加FL、IL-12、IL-7和IL-2细胞因子组合条件下，可诱导分化出T淋巴细胞，并且培养的T细胞对有丝分裂素刺激有增殖反应。     

人骨髓间质干细胞和嗅鞘细胞移植对大鼠急性脊髓损伤功能修复的比较研究

目的对比人骨髓基质细胞(BMSCs)与人胚嗅鞘细胞(OECs)移植对大鼠脊髓损伤功能修复的影响。方法将45只SD大鼠分成脊髓损伤后BMSCs移植组(BMSCs组)、OECs移植组(OECs组)和PBS对照组(PBS组),通过BBB评分、运动诱发电位(MEP)评估脊髓传导功能的改善状况,免疫组织化学方法检测移植细胞存活和分化情况,病理形态学方法观察组织结构修复情况。结果BMSCs组BBB评分高于OECs组(P<0.05);两细胞治疗组MEP潜伏期明显缩短(P<0.05);BMSCs组嗜银染色可见脊髓损伤近端有较多再生纤维向远端延伸,形成神经纤维束,而OECs组再生纤维较少;两种移植细胞均可在损伤处部分存活,BMSCs组可见BMSCs来源的细胞Nestin、NF、GFAP的阳性表达。结论BMSCs移植比OECs移植能更有效促进大鼠急性脊髓损伤修复。