结节病肉芽肿细胞内空气细颗粒物元素组成及来源分析

目的 分析结节病肉芽肿细胞(吞噬细胞、类上皮细胞、多核巨细胞)内空气细颗粒物(PM2.5)的元素组成及来源,探讨结节病与PM2.5的相关性.方法 收集50例结节病病变组织、10例非结节病成人尸检肺组织、18例PM2.5支气管灌注染毒大鼠肺组织(有肉芽肿病灶)石蜡包埋标本,采集大气中PM2.5,分别行HE染色、沃森-斯塔理(Warthin-Starry,WS)银染色,应用共聚焦显微镜拉曼光谱和透射电镜-能谱对上述部分病例标本肉芽肿细胞和尘细胞内的PM2.5及大气PM2.5的成分进行分析,用X线荧光分析技术对所采集大气PM2.5的主要元素成分进行分析.结果 结节病病变组织、非结节病成人尸检肺组织、PM2.5支气管灌注染毒大鼠肺组织及大气中PM2.5共4组标本中PM2.5的拉曼光谱和元素组成非常相似,均以碳质成分为主要特征.结论 为结节病肉芽肿细胞中的PM2.5来源于大气PM2.5提供了进一步的依据,从而不能完全除外结节病患者可能是对PM2.5易感的个体的可能性.

Abstract：

Objective To explore the source of the fine particulate matter (PM2.5) in the sarcoidosis granulomatous cell and the relationship between the sarcoidosis and the PM2.5 in the atmosphere.Methods Paraffin-embedded tissues of 50 cases of human sarcoidosis biopsy samples, 10 cases of nonsarcoidosis autopsy lung samples, 18 cases of lung tissues (with granulomatous lesions) of rats exposed to PM2.5 by bronchial infusion, and the free PM2.5 sample in the atmosphere were collected. The characteristics of tissues above mentioned were observed under the light microscopy, which stained by HE staining and Warthin-Starry silver staining. The characteristics of the PM2.5 in the four groups were analyzed using confocal Raman microscopy. The component of the PM2.5 in the sarcoidosis granuloma was analyzed using transmission electron microscope-energy dispersive X-ray detector (TEM-EDX), and the component of the PM2.5 in the atmosphere was analyzed with X-ray fluorescence separately. Results The PM2.5 in the four groups have the similar Raman spectrum, they share the feature of carbonaceous composition, the element component of PM2.5 in the human sarcoidosis was the same as PM2.5 in the atmosphere. Conclusion The study provided the further evidence that the PM2.5 in the sarcoidosis lesion was from PM2.5 in the atmosphere,and it should be not excepted that sarcoidosis may be a sensitive individual reaction to the PM2.5 inhaled from the atmosphere.     

人软骨糖蛋白-39对CIA大鼠淋巴细胞外增殖作用的研究

目的 观察人软骨糖蛋白-39( HCgp39)对胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠淋巴细胞激活的影响,探讨其在类风湿关节炎(RA)发病中的作用.方法 建立CIA大鼠模型,分别在建模1、2、3、4、5、6、7、8周后,分离、培养大鼠脾淋巴细胞,CCK-8法检测HCgp39对淋巴细胞增殖的影响,ELISA法检测血浆中抗HCgp39抗体及COMP的分泌水平,分析指标之间相关性.结果 建模2周后,HCgp39抗原特异性T细胞与对照组比较出现明显增殖反应(P均＜0.01),与建模时间、抗HCgp39抗体水平显著正相关,与血管翳和滑膜炎症评分显著负相关.各组抗HCgp39抗体水平和COMP水平较对照组显著增高(P均＜0.01),且抗HCgp39抗体水平与建模时间及COMP呈显著正相关.结论 HCgp39可刺激CIA大鼠脾淋巴细胞的体外异常增殖,初步提示HCgp39抗原短肽在CIA早期及后续的发病过程中可能起着一定作用.     

重组腺病毒载体介导低氧诱导因子基因转染促进SD大鼠骨组织工程血管化的实验研究

目的评价重组腺病毒介导的低氧诱导因子基因导入是否具有促进SD大鼠骨组织工程的血管化的作用。方法通过重组低氧诱导因子腺病毒载体转染SD大鼠的骨髓基质细胞,然后将含有目的基因种子细胞与骨组织工程的支架材料藻酸钙复合成可注射性组织工程骨植入裸鼠背部皮下,应用Masson染色和SP免疫组化法观察异位成骨能力,检测构建组织的微血管密度计数(MVD)。结果动物实验显示,实验组新骨形成和新生血管形成良好,实验组的微血管化密度显著地高于对照组。结论低氧诱导因子基因导入有利于组织工程骨的新骨形成和再血管化。     

氟西汀对野百合碱诱导Wistar大鼠肺动脉和右心室构型重建的影响

目的 研究氟西汀对野百合碱(monocrotaline,MCT)诱导Wistar大鼠肺动脉和右心室构型重建的影响.方法 应用野百合碱建立大鼠肺动脉高压模型,40只Wistar大鼠均分为4组:对照组(control)、模型组(MCT)、氟西汀低剂量2mg/kg组(MCT+F2)和氟西汀高剂量lOmg/kg组(MCT+F1...     

高脂诱导肥胖小鼠视网膜变性的形态学改变

目的 探讨高脂饮食建立的C57BL/6小鼠肥胖模型的视网膜变性的超微结构改变.方法 高脂饲料喂养19周后,小鼠分为肥胖抵抗(DIO-R)组和肥胖倾向(DIO)组,同时对照组小鼠给予基础饲料喂养.应用光镜,透射电镜及TUNEL法检测三组小鼠视网膜超微结构的改变及凋亡情况.结果 与对照组及DIO-R组比较,DIO组小鼠视网...     

一株新型鼠抗人PD-L2单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定

为了研制特异性识别人PD-L2(B7-DC,CD273)的鼠单克隆抗体,并对其生物学特性和PD-L2分子的表达特性进行初步分析。以高表达人PD-L2分子的基因转染细胞L929/PD-L2作为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,以L929/PD-L2作为抗体筛选细胞,L929/mock为对照细胞,经间接免疫荧光标记和流式细胞术分析、反复筛选和多次克隆化培养,筛选出分泌特异性鼠抗人PD-L2单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用Western blot、Ig亚型快速定性试纸法、间接免疫荧光法和竞争结合抑制实验对单抗进行生物学特性的分析,继而利用该单抗进行免疫荧光标记和流式细胞术检测PD-L2在肿瘤细胞株和免疫细胞上的表达特性。结果显示,通过多次融合和反复筛选,成功获得一株特异性鼠抗人PD-L2(B7-DC)的杂交瘤,该杂交瘤分泌的单克隆抗体能特异识别人PD-L2分子。继而利用上述研制获得的单克隆抗体8F2进行免疫荧光标记和流式细胞术检测发现,PD-L2上调性表达在成熟的树突状细胞和调节性T细胞上。提示,成功地获得一株特异性鼠抗人PD-L2单克隆抗体,并对其生物学特性和表达谱进行初步分析,证明其识别抗原表位不同于商品化抗体,是一株新型鼠抗人PD-L2单抗,这为进一步研究PD-1/PD-L2信号通路在免疫应答中的生物学作用提供了有价值的物质基础。     

磁共振对胎盘植入的诊断价值

目的探讨胎盘植入的磁共振影像学特点,评价磁共振诊断胎盘植入的价值。方法回顾性分析临床拟诊胎盘植入的29例产妇MRI影像学资料特征,并与手术和/或临床综合诊断结果比较,分析MRI鉴别胎盘粘连和植入的敏感性、特异性和准确性。结果胎盘植入的MRI表现为蜕膜层低强度信号发生局部缺失,子宫肌层变薄,动态增强植入胎盘与子宫基层一致性明显强化,部分胎盘边缘强化明显,少数可见滋养血管。MRI鉴别胎盘植入(含穿透)与粘连敏感性、特异性和准确性分别为85%、80%和82%。结论 MRI软组织分辨率高,结合增强能明确胎盘植入并判断肌层受侵的情况,对胎盘植入的诊断有较高的临床价值。     

HIV感染后CD8~+T细胞表面NK相关受体表达的变化

目的深入了解人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染后CD8+T细胞表面NK相关受体表达的变化。方法选取25例未经高效抗逆转录病毒治疗的HIV感染者、11例AIDS患者、15例进行高效抗逆转录病毒治疗(highly active antiretroviral therapy,HAART)者和13例HIV抗体阴性健康对照,用流式细胞仪检测研究对象外周血CD8+T细胞表面NKG2D、NKG2A和KIR3DL1的表达。结果 HIV感染后CD8+T细胞表面NKG2D表达的百分比显著低于健康对照,NKG2D+NKG2A-表达的百分比随疾病进展逐渐下降,且NKG2D+NKG2A-表达的百分比与CD4+T细胞的绝对数量呈正相关。AIDS患者CD8+T细胞表达NKG2A显著高于其它各组,随着疾病的进展CD8+T细胞表达NKG2A+NKG2D-百分比逐渐上升,AIDS患者显著高于其它各组,经抗逆转录病毒治疗后下降至健康对照的水平,且NKG2A+NKG2D-表达的百分比与CD4+T细胞的绝对数量呈负相关。HIV感染后CD8+T细胞KIR3DL1+表达的百分比较健康对照并无显著差异。结论 HIV感染机体后,CD8+T细胞NK相关受体表达变化与疾病进展相关,抗病毒治疗后可恢复其变化。     

香菇多糖口服和注射给药对DTH小鼠耳后淋巴结和小肠派氏结中T淋巴细胞的影响

目的:通过比较口服和注射香菇多糖对DTH小鼠耳后淋巴结和小肠派氏结中T淋巴细胞的影响,探讨肠道粘膜免疫系统在口服药物发挥免疫调节作用中的重要性。方法:28只6～8周龄NIH小鼠随机分为对照组、环磷酰胺免疫抑制模型组、香菇多糖灌胃组、香菇多糖注射组,各组小鼠用2,4-二硝基氟苯背部致敏,4天后耳廓攻击。攻击30小时后,对比各组小鼠耳肿胀差异,并应用流式细胞术检测被攻击耳廓的耳后淋巴结和小肠派氏结中T淋巴细胞的比例变化和活化水平。结果:与环磷酰胺免疫抑制模型组比较,香菇多糖能有效增强小鼠DTH反应,降低耳后淋巴结和小肠派氏结的T细胞比例,提高T细胞活化水平,且口服组的作用明显优于注射组。结论:对比注射给药,口服香菇多糖可以更有效地调节肠道粘膜免疫系统和整体免疫系统功能,提示肠道粘膜免疫系统在口服药物发挥免疫调节作用中扮演着重要的角色。