艾滋病病毒感染猴的循环免疫复合物的变化

【目的】观察猴免疫缺陷病毒(SIV)感染猕猴后循环免疫复合物(CIC)的动态变化。【方法】使用SIVmac251感染30只实验猴，并在感染SIV后不同时间点取样，采用补体致敏的酵母茵凝集试验，检测血清CIC水平的变化．并同时检测了68只正常猴的血清作为对照。【结果】30只SIV感染猴在接种后第4周开始检出CIC(总阳性率为30％)，第8周迅速升高并达到高峰46，7％，在第16周降低至33．3％并逐渐下降；从第20周开始，感染猴的CIC浓度维持一较低的滴度和阳性率，接近于正常猴(约10％)。【结论】CIC在SIV急性感染期间出现并升高，但其后伴随着循环中病毒的减少，CIC也逐渐下降。CIC的形成可能无益于控制病毒复制和引导抗病毒免疫，并可能参与了SIV感染后的发病过程。     

甘露聚糖、壳聚糖和姜黄素对LDL和dsLDL代谢影响的对比分析

低密度脂蛋白（LDL）分子中每毫克蛋白含有56μg己糖、30μg氨基己糖和11μg唾液酸，研究发现LDL经神经氨酸酶处理后，脱去末端唾液酸后成为去唾液酸低密度脂蛋白（dsLDL），更容易在血管内皮下沉积，造成动脉粥样硬化性病变等。我们选用甘露聚糖、壳聚糖和姜黄素对^125I-LDL和^125I-dsLDL在刺猬体内不同组织中分布的影响进行研究，探讨多糖和姜黄素对LDL和dsLDL代谢的影响和分析可能的代谢途经。     

山楂叶总黄酮对PPARγ-PPRE信号调控系统的影响

 目的应用爪蟾卵母细胞中建立的人类PPARγ-PPRE调控信号系统,研究山楂叶总黄酮通过该系统对LPL表达的影响。方法将重组质粒pXOE-PPARγ和pPPRE-d2EGFP共注射入爪蟾Ⅴ和Ⅵ期卵母细胞中,分别用含前列腺素El(PGEl),山楂叶总黄酮等中药的培养液培养3 d,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达并做荧光扫描。将pXOE-PPARγ质粒注射入爪蟾Ⅴ和Ⅵ期卵母细胞核中,分别用PGEl,山楂叶总黄酮培养液培养3 d,用ELISA双抗体夹心法测定卵母细胞表达的脂蛋白脂酶含量。结果含PGEl阳性对照组的卵母细胞中观测到绿色荧光蛋白;山楂叶总黄酮的高、中、低3个浓度均使卵母细胞中荧光蛋白表达量增加,并有显著的量效关系。PGEl和山楂叶总黄酮所表达的LPL含量比对照组高,且2.5-10μg·mL^-1的山楂叶总黄酮与LPL表达量也呈明显的量效关系。结论中药提取物山楂叶总黄酮可能含有PPARγ配体样成分,通过与PPARγ结合,诱导PPRE下游目的基因的表达。     

衰老对外周血淋巴细胞蛋白质组影响的研究

目的：应用双向电泳和质谱技术，对不同年龄组外周血淋巴细胞蛋白质组进行分析，研究免疫衰老的本质，了解衰老在免疫细胞中的发生机制。方法：4组同一家族男性（祖父，父亲，儿子）血样，离心获得外周血淋巴细胞，提取细胞内全部蛋白质。用三种荧光染料标记后进行双向电泳，经不同激光扫描获得蛋白质图谱。经分析后得到差异蛋白质，挖取差异蛋白点经酶解后进行质谱测定及分析。结果：与青年组相比，老年组热休克蛋白70、波动蛋白、细丝蛋白、肌动蛋白、微管蛋白、肌球蛋白、α-烯醇化酶、Rho-二-磷酸鸟苷分离抑制因子以及干扰素调节因子4表达均明显降低。而中年组未见明显差异。结论：衰老时淋巴细胞自我保护功能和抗氧化功能衰退，免疫细胞的结构发生退行性改变，糖酵解功能降低促使免疫细胞运动能力减弱，导致吞噬功能减弱，同时老年人淋巴细胞的凋亡加速，衰老个体在缺少IRF-4时，抗原提呈细胞的发育分化受到影响，机体的整体免疫能力受到影响，最终导致综合免疫衰老效应。     

浙江省新型农村合作医疗试点县与非试点县农村居民卫生保健状况比较研究

试点县的调查显示 ,合作医疗制度使农民的就医问题得到改善 ,因病致贫问题有一定改观 ,农民的卫生保健水平有所提高。但调查数据也反映 ,合作医疗实施县 ,在医疗服务条件方面没有优势 ,参保农民受益水平偏低等。因此 ,建议国家应当加大对农村卫生的投入 ,提高医疗服务质量。提高合作医疗的筹资水平 ,调整方案 ,提高农民的受益水平     

水乐维他对化疗致周围神经病的疗效分析

目的 回顾性分析水乐维他预防和治疗化疗药物引起的周围神经病的疗效。方法将2000年1月～2002年6月我科化疗的341例癌症患者分为2组:用水乐维他预防组和未用的对照组。再将出现周围神经病的患者分为3组:未治疗组、维生素组和水乐维他组;将周围神经病按不同的开始治疗时间分为:3～5 d组、10～15 d组和30 d以上组。结果 预防组周围神经病的发生率10.1％,对照组为24.5％,差异有显著性;不同治疗方法周围神经病的好转率:未治疗组25.0％,维生素组为42.9％,水乐维他组为83.3％,差异有显著性;不同的开始治疗时间3～5 d、10～15 d、30 d以上的治愈所需天数为10±4 d,19±5 d,23±7 d,治愈时间差异有显著性。结论 水乐维他对长春新碱、长春地辛、顺铂等化疗药物引起的周围神经病有预防和治疗作用,且疗效较维生素B_(12)+维生素B_1好;而且治愈率和治愈所需时间与开始治疗的时间有关,时间越早,治愈率越高,所以化疗时应注意预防周围神经病,一旦出现应及早治疗。     

癌性胸腹水的局部热化治疗

目的 观察胸腹腔灌注化疗加局部热疗对癌性胸、腹水的疗效。方法 胸腹腔灌注用药为顺铂、卡铂或草酸铂,每周1次,剂量为标准全身化疗剂量的50％。热疗用深圳先科生产的RS-1000热疗仪,每周2～3次,每次热疗60～120 min,热场中心温度42℃～43℃。结果 治疗总有效率为81.5％,其中癌性胸水完全消除率为75.3％,癌性腹水减少率为84.4％。不良反应:皮下脂肪硬结14.3％,胸闷、气促10.7％,口干、乏力23.3％。结论 胸腹腔内灌注化疗加局部热疗对癌性胸、腹水有良好的治疗作用,大部分患者可耐受局部热化治疗。     

六味地黄汤对甲亢型肾阴虚大鼠肝线粒体蛋白质组的影响

目的 应用双向电泳技术和质谱技术研究六味地黄汤对甲亢型肾阴虚大鼠肝线粒体蛋向质组的影响.方法 双向电泳分离甲状腺素造成的肾阴虚模型和六味地黄汤治疗大鼠肝线粒体蛋白质,银染后扫描得到蛋白质组图谱,用Image Master2D6.0软件进行差异蛋白质组分析,筛选差异在2倍以上的蛋白质进行质谱鉴定和生物信息学分析.结果 大鼠Major urinary protein precursor、Peroxiredoxin-6、内质网蛋白29前体、大鼠转甲状腺素蛋白D链表达升高,78 kDa葡萄糖调节蛋白前体、谷胱甘肽硫转移酶Mu 1、热休克蛋白60、肽基脯氨酰顺反式异构酶、核转录因子-κB 2、H~+-转运ATP合酶、BNIP1 protein表达均降低.结论 六味地黄汤滋阴补肾作用机理可能与下调线粒体内H~+-转运ATP合酶表达量从而减缓能量代谢、抑制NF-κB过量表达和活化以调节炎性细胞因子紊乱状态和凋亡抑制状态、上调PDX6表达对抗氧自由基损伤以及增强性激素分泌水平相关.     

miR-122启动子序列的克隆及特异性分析

目的 miRNA- 122启动子序列的预测、克隆及特异性分析.方法 分别从肝癌细胞系Huh-7及HepG2中扩增出预测的miR-122启动子,并将其克隆至含荧光素酶(firefly luciferase,Fluc)报告基因pGL4.17质粒上,用重组质粒转染Huh-7、HepG2及HeLa细胞,分析启动子的特性.结果 成功预测并克隆出miR-122的启动子序列.重组质粒转染细胞后,启动子能够启动Fluc的表达.用含启动子P1的重组载体pGL4.17-P1转染HeLa细胞后,用两种荧光素酶检测体系测得重组载体中荧光素酶的表达水平显著高于对照组(t =0.000 21,P＜0.01及t=0.000 38,P＜0.01).结论 Huh-7、HepG2细胞中miR-122表达差异与启动子序列缺失无关.而受miR-122启动子调节的报告基因在非肝细胞系(HeLa)中也表达,表明miR-122启动子不具有肝细胞特异性.     

RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞模型的建立及鉴定

目的 以小鼠巨噬细胞RAW264.7为对象,建立简便而又准确的泡沫细胞诱导及鉴定方法.方法 将实验分为正常对照组和不同浓度氧化型低密度脂蛋白与细胞孵育组,在以孵育时间为24 h的前提下,用MTT法和流式细胞术来确定诱导泡沫细胞的氧化型低密度脂蛋白合适浓度区间范围,并用总胆固醇试剂盒和游离胆固醇试剂盒测定不同程度泡沫细胞内胆固醇酯含量.结果 氧化型低密度脂蛋白浓度范围为20～30 mg/L时,细胞存活率已受到显著抑制,并随着氧化型低密度脂蛋白浓度的增高细胞凋亡率和坏死率逐渐增大,起初以细胞凋亡为主,当氧化型低密度脂蛋白浓度大于40 mg/L时凋亡的细胞不断坏死.20 mg/L和30 mg/L氧化型低密度脂蛋白与RAW264.7细胞共孵育24 h,细胞内胆固醇酯比重分别为66.26%和71.19%,而10 mg/L的氧化型低密度脂蛋白诱导24 h的泡沫细胞不典型,40 mg/L以上的氧化型低密度脂蛋白诱导的泡沫细胞泡沫化程度严重,贴壁不牢,大部分细胞破裂或凋亡,脂滴散布于细胞外.结论 20～30 mg/L氧化型低密度脂蛋白诱导的RAW264.7巨噬泡沫细胞模型稳定且形态较完整,符合泡沫细胞的形态学特征.