新型铈掺杂碳量子点的构建及其对乳腺癌细胞的杀伤作用

目的: 制备具有高效光热消融功能的铈掺杂碳量子点并用于乳腺癌细胞的光热治疗。方法: 以草酸铈和甘氨酸为前驱物,通过微波水热碳化法制备铈掺杂的碳量子点（cerium doped carbon quantum dots, Ce-doped CDs）;利用高倍透射电镜表征其形貌;利用荧光光谱表征其荧光性能;利用近红外热成像仪表征其光热转换效能;采用4T1乳腺癌细胞体外验证Ce-doped CDs的光热杀伤效果。结果： 成功制备出形貌均一、粒径约为2.6 nm且生物相容性良好的Ce-doped CDs,其具有优越的荧光性能和光热转换效能。随着Ce-doped CDs浓度的增加,在特定近红外激光光（808 nm）照射下4T1乳腺癌细胞活性也随之降低,同时正常细胞比肿瘤细胞具有更强的光热耐受性。结论： 成功制备具有荧光性能和光热转换效能的铈掺杂碳量子点,制备的碳量子点可将近红外的光能转换成热能从而有效杀伤肿瘤细胞。     

Fe3+抑制醋酸棉酚对脑胶质瘤细胞的杀伤作用

目的：探讨人脑胶质瘤微环境中Fe³⁺对醋酸棉酚(gossypol acetate, GAA)杀伤脑胶质瘤细胞的影响。方法：用不同浓度GAA(0、5、10、15、20、25 μmol/L)处理人脑胶质瘤LN229、SW1783、U87MG、U251MG细胞,CCK-8法检测细胞活性,计算GAA半数致死量(IC₅₀)。将4种脑胶质瘤细胞各分为4组：对照组、Fe³⁺组、GAA组、Fe^{3+ ₊}GAA组,分别予以培养基,FeCl ₃·6H₂O,GAA,FeCl₃·6H₂O+ GAA处理。GAA浓度以各胶质瘤细胞IC₅₀为准,FeCl₃·6H₂O浓度与GAA浓度相同。CCK-8法检测细胞活性;Transwell实验检测细胞迁移情况;运用流式细胞术分析脑胶质瘤细胞凋亡水平。结果：GAA显著抑制胶质瘤细胞活性,对LN229、SW1783、U87MG、U251MG细胞IC₅₀分别为9.38、9.56、14.53、10.39 μmol/L。与对照组相比,Fe³⁺组细胞增殖变化不明显,GAA组细胞增殖和迁移显著抑制(P<0.05);与GAA组相比,Fe³⁺ +GAA组细胞活性和迁移能力明显增强(P<0.05),细胞凋亡水平显著降低(P<0.05)。结论：Fe ³⁺抑制GAA对人脑胶质瘤细胞的杀伤作用。     

表面修饰对纳米晶胶原基骨细胞相容性的影响

目的:探索纤维蛋白(fibrin,FB)修饰的纳米晶胶原基骨(nanoHydroxyapatite/collagen,nHAC)支架材料上成骨诱导的骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)黏附、增殖及分化的情况。方法:实验分为两组:实验组,纤维蛋白修饰的纳米晶胶原基骨(FB-nHAC);对照组,单纯的纳米晶胶原基骨(nHAC)。将SD大鼠骨髓间充质干细胞定向诱导为成骨细胞,种植于支架材料上,体外复合培养。通过检测支架材料的细胞黏附率、不同时间点(3,7,10,14 d)支架材料中细胞数、碱性磷酸酶表达量以及扫描电镜观察细胞在支架材料上的生长状况,比较分析不同支架材料与细胞生物相容性差异。结果:大鼠MSCs经诱导培养14 d后,I型胶原免疫荧光染色为阳性;实验组支架材料的细胞黏附率显著高于对照组(P<0.05);且相同时间点实验组支架材料中的细胞数及碱性磷酸酶表达量也明显高于对照组(P<0.05);电镜观察发现两组材料上均有细胞生长,但实验组的细胞生长状况明显好于对照组。结论:表面修饰纤维蛋白后的nHAC支架材料具有更好的细胞黏附、增殖及促成骨分化能力。     

嗅鞘细胞对活化的星形胶质细胞的作用

目的:研究体外培养的大鼠嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cell,OEC)对活化的星形胶质细胞(astrocytes,AST)的作用.方法:体外培养嗅鞘细胞和星形胶质细胞.星形胶质细胞经纯化传代,细胞融合后利用划伤法得到活化的星形胶质细胞,将嗅鞘细胞与活化的星形胶质细胞共培养24 h后,观察星形胶质细胞增殖能力的改变,以及其表达胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和硫酸软骨素蛋白多糖(CSPG)的变化.结果:活化的星形胶质细胞与嗅鞘细胞共培养后,MTT实验表明其增殖能力增强;免疫荧光染色、RT-PCR和蛋白质印迹法测定结果表明共培养后活化的星形胶质细胞表达的GFAP和CSPG降低.结论:嗅鞘细胞作用于活化后的星形胶质细胞以后,能够促进星形胶质细胞的分裂增殖,同时能够减少星形胶质细胞胶质化,降低抑制性细胞因子的表达.     

丝素蛋白材料细胞相容性的研究

目的：研究再生丝素膜对大鼠真皮细胞生长和细胞遗传学的影响。方法：采用静置贴壁培养法在再生丝素膜上培养大鼠真皮细胞，并用活细胞计数法和常规染色体检测技术，观察再生丝素膜对细胞生长和染色体的影响。结果 再生丝素膜能支持细胞正常生长，呈现正常的生长繁殖曲线且染色体的形态和数目正常。结论 再生丝素膜对大鼠真皮细胞具有良好的细胞相容性。     

米非司酮治疗40岁以上子宫腺肌病患者疗效观察

子宫腺肌病是子宫内膜腺体与间质侵入子宫肌层的一种良性子宫疾病，近年来，发病率不断上升，已受到人们的日益关注。2001年1月至2005年12月，本院妇产科门诊对89例子宫腺肌病患者采用米非司酮治疗。现对其临床疗效报告如下。     

维生素C及E联合作用对体外大鼠胚胎中脑神经细胞分化和增殖的影响

目的:观察维生素C,维生素E和维生素C 维生素E联合后对胚胎中脑神经细胞生长发育的影响。方法:实验于2006-03/04在江苏大学医学院研究中心细胞培养室完成。采用16d大鼠胚胎中脑神经细胞体外培养方法,观察不同剂量的维生素C(5,10,25,50μmol/L),维生素E(10,25,50,100μmol/L)和维生素C、维生素E联合作用(维生素C25μmol/L 维生素E50μmol/L,维生素C50μmol/L 维生素E100μmol/L),培养10d后收集细胞,并利用图像分析细胞形态的变化、蛋白质、丙二醛含量及超氧化物歧化酶活性指标。结果:①维生素C、维生素E和维生素C 维生素E联合能促进体外培养中脑神经细胞突起生长,集落数增多。②与正常对照组比较,维生素C10,25μmol/L组、维生素E10,25,50μmol/L组、维生素C25μmol/L 维生素E50μmol/L组神经细胞总蛋白相对含量明显增加。③与正常对照组比较,维生素C10,25μmol/L组、维生素E25,50μmol/L组、维生素C25μmol/L 维生素E50μmol/L组神经细胞超氧化物酶活性增加,丙二醛含量降低。④维生素C50μmol/L组、维生素E100μmol/L组和维生素C50μmol/L 维生素E100μmol/L组超氧化物酶活性低于正常对照组,丙二醛含量高于正常对照组。结论:维生素C、维生素E和维生素C 维生素E联合剂量在一定范围内能够明显提高中脑神经细胞的抗氧化能力,同时能促进胚胎中脑神经细胞分化和增殖作用。     

神经生长因子及其受体在人脑胶质瘤细胞株U251中的表达及其生物学意义

目的:观察神经生长因子在人脑胶质瘤细胞株U251中的表达、分布及其生物学作用。方法:实验于2005-07/12在江苏大学医学院基础与临床研究中心完成。①U251培养3d后,于培养基中加入终浓度为2mmol/L羟基脲继续培养24h(≥1个细胞周期),使细胞同步化于DNA合成期。②用免疫荧光法对细胞内神经生长因子及其高亲和力受体酪氨酸蛋白激酶受体A进行染色定位。③免疫印迹法检测U251培养上清液中的神经营养因子表达。④促胚胎脊髓神经细胞生长试验鉴定U251细胞培养上清液的神经营养因子活性。取怀孕16d的SD大鼠1只,断头处死,浸泡体积分数为0.75的乙醇20min后剖腹取胎鼠,分离脊髓组织,细胞培养2d后,分别加入无血清DMEM(对照组)及培养过U25124h的无血清DMEM(实验组)。结果:①神经生长因子及酪氨酸蛋白激酶受体A在U251中高表达,神经生长因子主要呈颗粒状分布于胞浆及胞核内,酪氨酸蛋白激酶受体A分布于胞膜及核仁部位。②U251无血清培养上清液能够促进胚胎脊髓神经细胞集落的形成,实验组集落数明显多于对照组(345.38±14.15),(145.5±12.71)/孔,P<0.01);且在浓缩的U251无血清培养上清液中检测出相对分子质量为36000的神经生长因子肽链。结论:人脑胶质瘤细胞株U251呈神经生长因子及酪氨酸蛋白激酶受体A强阳性表达,且能合成并分泌具有生物学活性的神经营养因子,相对分子质量为36000的神经生长因子是其中主要成分之一。     

类风湿关节炎患者外周血髓源性抑制细胞的检测及与Th1/Th2细胞的相关性分析

目的: 检测类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血中髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells, MDSCs)的水平,分析其与Th1/Th2细胞的相关性。 方法：选取确诊的RA患者36例,根据临床资料计算DAS28评分,将其分为活动组和稳定组;另选取10例健康者作为对照组。3组MDSCs、Th1及Th2细胞的比例用流式细胞术检测并进行比较。分析MDSCs与Th1/Th2细胞的相关性。结果： 活动组MDSCs的比例明显高于稳定组和对照组(P均<0.05);稳定组MDSCS的比例与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。经Spearman相关性分析,MDSCs与Th1细胞呈负相关(P<0.05);而与Th2细胞无相关性(P>0.05)。 结论： MDSCs在RA活动期显著增高,且与CD4+T细胞亚群关系密切,可作为辅助评估RA活动状态的指标。     

大鼠脊髓损伤后局部应用聚乙二醇的抗神经纤维溃变研究

目的:探讨大鼠脊髓损伤后局部应用聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)的抗神经纤维溃变作用。方法:选取健康雄性Wistar大鼠,所有动物随机分为对照组和PEG治疗组。各组动物制作脊髓横断损伤模型。PEG治疗组大鼠在脊髓横断后,蛛网膜下腔立即注射PEG。对照组大鼠用生理盐水代替PEG,其余步骤相同。各组大鼠存活1、2、3 d后处死取材。标本切片后分别进行Massons染色和免疫荧光染色,比较各组切片每个高倍视野内的神经纤维溃变轴索球数目。其余动物麻醉后取出新鲜脊髓标本,制成匀浆后用免疫印迹法测定脊髓组织内钙蛋白酶(m-calpain)和神经丝蛋白(neurofilement,NF-200)降解产物的相对含量。结果:(1)对照组脊髓损伤部位大量炎症细胞浸润,组织坏死严重,损伤近侧端的轴索球明显多于PEG治疗组;PEG治疗组炎症反应较轻,组织坏死不明显,轴索球数目少于对照组。(2)PEG治疗组脊髓组织内m-calpain以及NF降解产物的含量均显著低于对照组。结论:大鼠脊髓损伤早期局部应用PEG可以有效减轻神经纤维的溃变。