参附注射液对LPS诱导的RAW264.7细胞HMGB1核转位的干预作用

目的:探讨参附注射液(SFI)对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)核转位的干预作用。方法:以经LPS诱导的小鼠单核巨嗜细胞RAW264.7为对象,以组蛋白去乙酰化酶抑制剂RGFP966为阳性对照,在CCK-8法筛选给药剂量的基础上,采用免疫荧光法观察低、中、高剂量(3、6、12μL/m L)SFI对细胞中HMGB1核转位的影响,采用实时荧光聚合酶链式反应法检测细胞中HMGB1 mRNA的表达情况;采用Western blotting法检测细胞中HMGB1、Toll样受体4(TLR4)的表达情况,并比较细胞胞核、胞浆中HMGB1的表达情况;采用酶联免疫吸附测定法检测细胞上清液中HMGB1、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果:在空白对照组中,HMGB1主要定位于细胞核;经LPS诱导后,HMGB1由细胞核向胞浆迁移。与空白对照组比较,LPS组细胞中HMGB1 m RNA及其蛋白、TLR4的蛋白表达量以及上清液中HMGB1、IL-1β、TNF-α水平均显著升高(P<0.01);细胞胞核中HMGB1的蛋白表达量显著降低,而胞浆...     

Fbxw7过表达促进mTOR降解并抑制胃癌细胞迁移的研究

目的探究Fbxw7过表达对胃癌细胞SGC-7901迁移、侵袭的影响及其作用机制。方法在胃癌细胞SGC-7901中转染pcDNA3.1-Fbxw7,然后利用实时荧光定量PCR检测Fbxw7 mRNA的表达,通过transwell法检测细胞迁移和侵袭,通过蛋白质免疫印迹检测mTOR的表达。结果与对照组细胞比较,转染了pcDNA3.1-Fbxw7后,SGC-7901细胞中Fbxw7 mRNA的表达水平明显升高,细胞迁移和侵袭能力下降,并且mTOR的表达水平也明显变低。结论过表达Fbxw7能够抑制胃癌细胞的侵袭和迁移,并且能促进mTOR的降解,提示Fbxw7可能通过对mTOR信号通路的调控影响胃癌细胞的转移能力。     

UPASS脊柱后路内固定系统治疗多节段胸腰椎骨折

目的探讨UPASS脊柱后路内固定系统治疗多节段胸腰椎骨折的临床效果。方法采用后入路手术方法,应用UPASS脊柱内固定系统治疗22例多节段胸腰椎骨折患者,记录术前和术后椎体高度,后凸角及Frankel评分,并进行对比分析。结果全部患者随访24～48个月,椎体前缘高度由术前平均48．4％矫正到术后94．6％,后凸角由术前平均22。矫正到术后5°,FrankelA级患者无恢复,其他不全瘫患者均有不同程度的神经功能恢复。结论UPASS脊柱后路内固定系统治疗多节段胸腰椎骨折,方法可行,临床疗效满意。     

益智宁煎剂对SHR大鼠前额叶皮质及纹状体多巴胺的影响

目的观察中药复方益智宁煎剂对注意缺陷多动障碍（ADHD）动物模型自发性高血压大鼠（SHR）前额叶皮质及纹状体多巴胺（DA）的影响。方法将11周龄的雄性SHR分为益智宁高剂量组、低剂量组和生理盐水对照组,分别予益智宁和生理盐水灌胃,用高效液相色谱一电化学法检测前额叶皮质、纹状体中多巴胺的含量。结果益智宁可明显升高SHR纹状体多巴胺含量,高剂量组、低剂量组与生理盐水对照组比较差异有统计意义（P〈0．05）,但高、低剂量组间无明显差异;3组间前额叶皮质中多巴胺的含量比较,差异无统计意义（P〉0．05）。结论益智宁治疗肾虚肝亢型ADHD的作用机制之一可能与调节单胺类神经递质有关,其对额一纹状体环路DA的调控主要在于提高纹状体DA含量,纹状体为作用靶点之一。     

牛珀至宝微丸对内毒素休克大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1表达的影响

目的：观察牛珀至宝微丸对内毒素休克大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1（high-mobility group box-1 protein,HMGB1）表达的影响。 方法：30只SPF级Sprague-Dawley大鼠随机分为正常组、内毒素组和牛珀至宝微丸组。牛珀至宝微丸组大鼠每天以含生药量3mg的牛珀至宝微丸生理盐水悬液3mL灌胃,连续7d,正常组予生理盐水。模型组和牛珀至宝微丸组大鼠用静脉注射内毒素（1.5mg/kg）联合腹腔注射D-氨基半乳糖（100mg/kg）方法建立内毒素休克模型。采用二氨基联苯胺（diaminobenzidine,DAB）显色和异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate,FITC）荧光标记的免疫组织化学染色以及蛋白印迹等方法检测大鼠肺组织内HMGB1的表达。 结果：正常组HMGB1表达较弱,仅有少量细胞呈阳性,阳性部位多在细胞核;内毒素组HMGB1表达增加,阳性部位主要在细胞质;牛珀至宝微丸组HMGB1表达更高,阳性部位主要在细胞核。 结论：牛珀至宝微丸能使HMGB1定位于细胞核内,从而可能避免被分泌出胞,产生毒性,这可能是其治疗感染性休克的作用机制之一。     

牛珀至宝微丸对局灶性脑缺血再灌注后神经前体细胞的影响

背景成年个体海马和室管膜下层细胞具有分裂产生新生神经元的能力,并分离了能不断分裂增殖且具有多种分化潜能的细胞群,即神经干细胞,但因分离、纯化十分困难,分离过程易造成神经细胞损伤,影响其活性而易致凋亡,开发中药诱导体内神经干细胞的增殖作用具有重要的临床意义. 目的观察牛珀至宝微丸对局灶性脑缺血再灌注后神经前体细胞的影响,探讨其治疗缺血性脑血管病的机制. 设计随机对照单盲的实验研究. 地点和对象实验地点广州中医药大学基础学院神经解剖实验室,研究对象为纯种 SD大鼠 24只. 干预采用大脑中动脉线栓法造成局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学技术检测神经前体细胞的表达. 主要观察指标大脑侧室管膜、室管膜下区皮质和纹状体 Nestin阳性细胞数. 结果脑缺血再灌注后,牛珀至宝微丸组缺血侧室管膜、室管膜下区、皮质和纹状体 Nestin阳性细胞数显著多于对照组( P< 0.05),且神经病学评分明显低于对照组( P< 0.05). 结论牛珀至宝微丸能持续上调脑缺血再灌注后 Nestin的表达,这可能是其治疗缺血性脑血管病的机制之一.     

蠲脉Ⅰ号化痰消食拆方促进蛋白激酶B表达抑制内皮细胞自噬性死亡

【目的】探讨蠲脉Ⅰ号化痰消食拆方(简称化痰消食方)对自噬损伤内皮细胞保护作用的物质基础,以及对蛋白激酶B(PKB)和自噬相关的微管相关蛋白LC3、泛素结合蛋白P62表达的影响。【方法】采用递增极性溶剂法分别分离提取化痰消食方(成分为半夏、茯苓、枳实、白术、山楂、神曲)的石油醚、乙酸乙酯、乙醇以及水部位。将4个部位的提取物分别作用于过氧化氢诱导的自噬性损伤内皮细胞,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察内皮细胞的活性,采用GC-MS(gas chromatography-mass spectrometry)分析有效部位的化学成分,并采用Western blot法观察有效部位对PKB表达及自噬的影响。【结果】石油醚部位为化痰消食方保护内皮细胞自噬性损伤的活性部位;GS-MS检测发现石油醚部位主要成分为多种脂肪酸;Western blot分析结果显示:石油醚部位能上调PKB表达、下调LC3表达,抑制LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ转化,并使细胞内P62表达水平升高。【结论】石油醚部位多种脂肪酸为化痰消食方有效部位,能促进细胞内PKB表达,抑制细胞内的自噬水平,从而拮抗内皮细胞的自噬性死亡。     

Foxq1与E-cadherin蛋白在大肠癌中的表达及其临床意义

目的探讨Foxq1与E-cadherin在大肠癌中的表达及其与大肠癌发病和转移的临床病理关系。方法收集大肠癌的临床病理标本62例,采用免疫组织化学法和Western印迹检测Foxq1与E-cadherin蛋白在标本中的定位与表达水平。结果 Foxq1与E-cadherin蛋白均在细胞质中表达,Foxq1表达在癌组织、癌旁组织、正常黏膜组织中梯度降低;E-cadherin表达在癌组织、癌旁组织及正常膜组织居中梯度升高(P<0.05)。二者的表达在大肠癌中呈负相关(P<0.05)。结论 Foxq1和E-cadherin参与了大肠癌的发病,可作为大肠癌早期诊断的联合指标之一,并且为大肠癌的治疗提供新靶点。