人自体血清培养的鼻中隔软骨细胞

目的:比较人自体血清和胎牛血清对人鼻中隔软骨细胞增殖和分化的影响。方法:实验于2004-08/2005-03在解放军第一军医大学珠江医院全军儿科中心实验室完成。①全血标本取自健康鼻中隔偏曲手术患者,男2例(分别为27岁和32岁),女1例(35岁),经患者知情同意。②自体血清的制备:抽取患者全血40mL,室温静置1h后,离心(1000r/min,30min)后取上清约20mL。③取手术患者的鼻中隔软骨分离软骨细胞进行原代培养,设人自体血清组和胎牛血清组,分别加含体积分数为0.1的自体血清和胎牛血清的1640培养基,并进行传代培养。④取第3代软骨细胞接种于培养板上培养,设人自体血清组、胎牛血清组和对照组(无血清培养),分别于培养后的第1,2,3,4,5,6天行四甲基偶氮唑盐检测。⑤取第2,3,4,5,6代软骨细胞接种于养板上培养,设人自体血清组、胎牛血清组和对照组,行软骨基质蛋白多糖含量(35S-Na2SO4掺入量)测定。⑥取第2代软骨细胞,分别将人自体血清组和胎牛血清组的细胞接种于两个25mL的培养瓶中培养至细胞传代老化,观察细胞表型。结果:①在体积分数为0.1的血清浓度下,人自体血清和胎牛血清对人鼻中隔软骨细胞增殖作用差异不明显(P>0.05)。②人鼻中隔软骨细胞蛋白多糖合成量的比较显示两种血清对第2,3,4,5代软骨细胞软骨基质蛋白多糖的合成作用差异不明显(P>0.05),但在第6代,人自体血清组软骨细胞蛋白多糖合成量明显高于胎牛血清组(P<0.01)。③胎牛血清人鼻中隔软骨细胞到第6代几乎所有细胞变为梭形,人自体血清培养的软骨细胞到第7代以后才绝大部分变为梭形细胞,初步证实了人自体血清在维持鼻中隔软骨细胞表型方面也有一定的作用。结论:人自体血清能够有效地促进软骨细胞增殖和蛋白多糖合成同时维持细胞表型。     

冻存复苏培养的人鼻中隔软骨细胞生物学特性观察

目的：观察冻存复苏过程对人鼻中隔软骨细胞生物学特性的影响。方法：体外培养人鼻中隔软骨细胞，对冻存1周组、1个月组、3个月组和新鲜制备组的软骨细胞进行倒置相差显微镜动态观察、甲苯胺蓝异染和Ⅱ型胶原的免疫组化染色，并测定”S-Na2SO4掺入量以观察对软骨细胞蛋白多糖合成量的影响，在细胞表型和功能方面进行比较。结果：各组间软骨细胞的生长过程、特殊染色无明显差别，蛋白多糖合成量(^35S-Na2SO4掺入量)测定值为(3.2&;#177;0.24)&;#215;10^3dpm／ug DNA，统计分析其差异无显著性意义(F=0.6，P&;gt;0.05)。各组间细胞存活率差异没有显著性意义(F=2．1．P&;gt;0．05)。结论：冻存复苏的人鼻中隔软骨细胞保持了其生物特性，且冻存时间长短对冻存的软骨细胞存活率无显著影响。     

新型高孔隙率聚乳酸支架复合物在体内形成新生软骨的实验观察

目的观察软骨细胞-新型高孔隙率聚乳酸(PLA)支架复合物在体内形成新生软骨的能力.方法体外培养兔耳廓弹性软骨细胞,取第2代软骨细胞与新型高孔隙率聚乳酸支架形成复合物,体外培养1周后移植于兔颈部气管旁带状肌间隙,以未种软骨细胞的聚乳酸支架作为对照.结果移植于兔体内1个月后,接种了软骨细胞的新型高孔隙率PLA支架有新生的软骨形成,2个月后新生软骨逐渐成熟并形成明显的软骨陷窝,而对照组无软骨形成.结论这种新型聚乳酸支架种植软骨细胞后在体内具有成软骨能力,可用作软骨组织工程的支架材料.     

环甲软骨接近术后局部组织形态学的研究

对犬作环甲软骨接近术，术后第６～２０周发现环状软骨前上缘至甲状软骨前下缘之间的距离（以下简称环甲前距）比环甲软骨接近术后即时稍微有增加，平均增加０．８６ｍｍ，统计学处理差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１）。环甲软骨固定线线头未见脱落及松弛，也未见固定线切穿环甲软骨的现象。环甲软骨接近区光镜检查，见环甲软骨固定线穿过软骨和软组织的径路一般有缝线异物反应，周围软骨和软组织正常。认为术后环甲前距出现轻微程度的增宽变化可能是环甲软骨本身发生对固定线应力的改变和对固定线力点调整的结果。     

培养状态下成人鼻中隔软骨细胞生物学特性的研究

目的：研究体外２的正常成人鼻中隔软骨细胞的生物学特性。方法：体外培养成我鼻中隔软骨细胞,观察原代及传代培养的形态学变化;测定细胞数量的变化及其生长曲线,观察细胞的增殖;借助特殊染色、免疫组织化学的方法了解糖胺聚糖、碱性磷酸酶、Ⅱ型胶原的合成情况,测定冷冻复苏后的细胞存活。结果：初始接种细胞为圆形,细胞贴壁后４ｄ细胞逐渐变为放射延异状;从第５代开始绝大部分细胞转变成纤维样细胞。２代细胞体外培养至第５     

环状软骨瘤切除并功能重建一例

患者男,51岁.声嘶并进行性呼吸困难3年余于2010年11月18日入院.患者3年前无明显诱因出现声音嘶哑,稍感呼吸不畅,无咽喉疼痛、咳嗽等,在当地医院按“咽喉炎”药物治疗后无明显好转,3年来声嘶逐渐加重,并进行性呼吸困难;2010年1 1月15日在外院行喉CT检查考虑喉软骨瘤.查体:吸人性呼吸困难3度;电子喉镜检查见右侧声门上黏膜下隆起,表面光滑,突向左侧喉腔,声门裂狭窄(图1);右侧声带活动受限,左侧声带活动可;双侧颈部未触及肿大淋巴结.     

听觉诱发磁场中耳鸣的客观证据

作者对25名单侧耳鸣患者和40名正常听力无耳鸣者进行听觉诱发磁场(AEF)测量,研究脑磁信号能否显示耳鸣的干涉。AEF反应的音调刺激参数:载频1000Hz,时间500ms,上升/消退时间15ms,刺激间隔4s,强度60dBHL。在刺激的对侧半球记录AEF,同时在头顶至对侧耳垂间记录脑电图。结果:正常听力者与耳鸣者的AEF波形明显不同。耳鸣组脑磁     

用张口器暴露犬喉的简单方法

以往在用犬进行喉腔形态和活动方式观察等噪音研究时,常采用直达喉镜或纤维喉镜,或作颈前切口、舌骨下径路暴露声门乃至采用离休喉头的方法。我们在用犬进行嗓音研究过程中,发现用戴维斯(Davis’)张口器方法也能直接观察犬喉。方法是:将麻醉犬平卧检查台上,枕部稍垫高,固定四肢及头部,将戴维斯开口器压舌板伸抵舌根,切牙钩杆置上颌犬牙与侧切牙之间,升起拉杆用力张大犬嘴,即可经犬嘴直视犬喉。观察时,声门暴露完全,视野清楚。用上述方法对6头健康成年犬进行喉部观察并分别在第1、6、8、10周进行了平静呼吸时     

新型高孔隙率海绵状聚乳酸支架在软骨组织工程研究和应用中的意义

目的研究一种新型高孔隙率海绵状聚乳酸支架的体外、体内降解及生物相容性.方法将一种自行制备的孔径为100～300nm、孔隙率为95%的中等分子量海绵状聚乳酸支架置体外37℃振荡水浴,按时间顺序取出称重,观察其体外降解速度;将这种新型高孔隙率聚乳酸支架植入小鼠皮下,分别于2、4、6、8、12周取材进行大体观察和HE染色光镜检查.结果该新型高孔隙率聚乳酸支架体外16周降解率为14.05%,体内植入大体观察及组织形态学检查显示其具有良好的可降解性和生物相容性.结论这种新型高孔隙率海绵状聚乳酸支架具有良好的可降解性和生物相容性.     

影像学在诊断内耳迷路骨化中的意义

内耳迷路骨化的临床表现为听力和前庭功能障碍。现就我院经颈骨探查和人工耳蜗植入手术中证实的2例迷路骨化的临床与影像学资料报告如下。l临床资料例1，男性，17岁。因间歇性右侧领部闷胀感2年于1993年7月22日入院。5岁时右额撷部摔伤后右侧听力丧失，3年后发现右眼闭合不全和口角歪斜。入院检查：右侧完全性周围性面瘫；右耳鼓膜稍混浊，较薄，无穿孔；纯音和电反应测听检查示右耳全聋；右耳同侧和左耳对测声反射均未引出；变温试验示右侧前庭功能消失。左耳未见异常。CT检查：右颧骨岩部骨质增生、硬化、膨大，致使颅中窝底抬高，内耳道…