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Objective: To analyze the mutation distribution and frequency of RNA polymerase β subunit (rpoB) gene probe in tuberculosis (TB) patients with GeneXpert MTB/RIF (Xpert) positive rpoB gene mutation, and to elucidate the mutation characteristics of rifampicin resistance determining region. Methods: A total of 682 consecutive TB patients with positive Xpert test and rpoB gene mutation who visited Beijing Chest Hospital, Capital Medical University from June 2019 to June 2020 were involved, including 618 pulmonary TB (PTB) cases and 64 extrapulmonary TB (EPTB) cases. Clinical examination samples, including 465 sputum, 153 bronchoalveolar lavage fluid, 37 pus, 19 pleural effusion, 7 stool and 1 cerebrospinal fluid, were collected from patients. All Xpert positive specimens were analyzed for semi-quantitative results of Mycobacterium tuberculosis (MTB) and mutation distribution of the rpoB gene probe. Results: Of the 682 samples, 6.45% (44/682) were high, 25.07% (171/682) were medium, 25.51% (174/682) were low, and 42.96% (293/682) were very low in MTB semi-quantitative. The proportion of very low levels of MTB semi-quantitative was significantly higher in EPTB samples than in PTB samples (64.06% (41/64) vs. 40.78% (252/618), χ 2=12.83, P<0.001). Smear positive rates were 84.62% (33/39), 64.02% (105/164), 27.27% (42/154), and 7.84% (20/255) in semiquantitatively high, medium, low, and very low levels of MTB specimens, respectively. The mutation rate of the rpoB gene was 92.82% (633/682) for single probe, 6.89% (47/682) for double probe, and 0.29% (2/682) for triple probe. The mutation rate of probe E was the highest in specimens with single probe mutation (74.34%, 507/682), followed by probe D (8.80%, 60/682); the mutation rate of probe D+E was the highest in specimens with double probe mutation (4.25%, 29/682), followed by probe A+B (1.76%, 12/682); and all three probe mutations were probe A+D+E (2 cases). Conclusion: Single probe mutation is predominant in Xpert positive rpoB gene mutation MTB, and the most common mutation probes in PTB and EPTB are probe E and probe D. © 2023 Science Press. All rights reserved. 相似文献
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目的建立肺癌人源性肿瘤组织异种移植(patient-derived tumor xenograft,PDX)裸鼠模型,检测原代肺癌组织标本和第三代(F3)PDX模型组织标本内组织形态结构的变化和p63、napsin A和TTF-1的表达差异性。方法取临床肺癌新鲜手术切除标本12例,裸鼠皮下移植建立PDX模型,HE染色比较原代患者肿瘤组织与移植瘤组织结构和细胞形态变化与否;免疫组化的方法检测原代组织和F3代组织标本内p63、napsin A和TTF-1的表达水平的差异性。显微镜观察。结果成功建立传至第三代的PDX模型5例,4例肺鳞癌,1例肺腺癌。PDX模型和患者原代肿瘤具有相同的组织学特点和排列结构;p63在肺鳞癌患者及其PDX模型癌细胞中表达阳性率为84.3%和96%,两者之间差异无显著性(P0.05),而在肺腺癌中呈阴性表达。Napsin A在肺腺癌患者及其PDX F3癌细胞中阳性表达率分别为66%和72.4%,两者之间差异无显著性(P0.05)。TTF-1在肺腺癌患者及其PDX F3癌细胞中阳性表达率分别为91%和85%,两者之间差异也无显著性(P0.05)。Napsin A和TTF-1在肺鳞癌中均呈阴性表达。结论本实验室所建立的肺癌PDX模型基本保留了部分原代肿瘤的组织学特性,为临床前药效的个性化筛选评估以及生物标志物的鉴定提供了有效的研发资源。 相似文献
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目的:了解大学生对基本医疗保险制度的认知程度、满意程度和影响满意度的因素.方法:采用随机整群抽样的方法选取广州地区4所高校进行问卷调查.结果:大学生总体参保率不足90%;48.3%的学生对大学生医疗保险基本不了解;城镇户籍的学生对医疗保险的总体满意度高于农村户籍的学生;年级越高,满意度越低;经济来源于父母或亲戚的参保学生总体满意度最高,经济来源主要为兼职的参保学生满意度最低;对医保政策的知晓程度与满意度呈正相关关系.结论:大学生对医疗保险的认知程度与满意度普遍偏低,政府应加大宣传力度、改进政策、简化报销和转诊程序,并提高待遇水平,从而吸引更多学生参保. 相似文献
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托拉塞米治疗急性创伤性脑水肿患者的临床观察与护理 总被引:1,自引:0,他引:1
急性创伤性脑水肿是影响脑外伤预后的主要因素,临床上如处理及时、得当,可以明显改善颅脑外伤患者的预后,因此脱水利尿药物的正确选择尤为重要. 相似文献
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细菌噬菌体(bacteriophage)是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒,由F.d’Herelle(1917年)和F.W.Twort(1915年)各自独立发现。1947年,Gardner首次分离并命名了分枝杆菌噬菌体,至今已发现250多种分枝杆菌噬菌体。早在20世纪30年代,噬菌体已被尝试应用于感染性疾病的治疗,然而随着高效抗生素的大量开发,噬菌... 相似文献
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目的 探讨链霉素(S)、卡那霉素(Km)、阿米卡星(Am)和卷曲霉素(Cm)对结核分枝杆菌的耐药及交叉耐药情况,为耐药结核病的化学治疗提供理论依据。 方法 对首都医科大学附属北京胸科医院2004年1月至2010年12月间4247株临床分离株的药物敏感试验结果进行分析。采用绝对浓度法进行药物敏感试验。4种药物之间总耐药率的差异采用配对χ2检验及χ2分割法,以P<0.007 14为差异有统计学意义。4种药物之间交叉耐药率的差异采用两个样本率比较的χ2检验,以P<0.05为差异具有统计学意义。 结果 4247份临床分离株标本中,S的耐药率为45.11%(1916/4247),Km的耐药率为17.93%(718/4005),Am的耐药率为19.02%(792/4164),Cm的耐药率为9.44%(401/4247)。经配对χ2检验,Cm与S、Am、Km之间耐药率差异有统计学意义,χ2值分别为1349.34、281.54、193.16,P值均小于0.007 14。经配对χ2检验,S与Am、Km之间耐药率差异有统计学意义,χ2值分别为821.10、869.28,P值均小于0.007 14。经配对χ2检验, Am与Km之间耐药率差异有统计学意义,χ2值为13.98,P值小于0.007 14,耐药率从高到低依次为S、Am、Km和Cm。S在其他3种药物的耐药株中的耐药率分别为82.59%(耐Km株,593/718)、77.78%(耐Am株,616/792)、76.81%(耐Cm株,308/401),χ2值分别为502.959、453.911、626.654,P值均小于0.05。Km在另外3种药物耐药株中的耐药率分别为33.13%(耐S株,593/1790)、83.31%(耐Am株,634/761)、67.89%(耐Cm株,260/383),χ2值分别为502.959、12.079、100.536,P值均小于0.05。Am在另外3种药物耐药株的耐药率分别为32.78%(耐S株,616/1879)、89.55%(耐Km株,634/708)、77.95%(耐Cm株,304/390),χ2值分别为453.911、12.079、163.761,P值均小于0.05。Cm在其他3种药物的耐药株中的耐药率分别为16.08%(耐S株,308/1916)、36.21%(耐Km株,260/718)和38.38%(耐Am株,304/792),χ2值分别为626.654、100.536、163.761,P值均小于0.05。 结论 4种注射用抗结核药物的耐药率从高到低依次为S、Am、Km和Cm。4种药物之间均表现出交叉耐药,但程度不同。S与其他3种药物之间为单向耐药,Km和Am两个药物之间近似完全交叉耐药,Cm是其他3种药物耐药时的选择药物。 相似文献
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结核分枝杆菌rv3873基因原核表达载体的构建、表达和纯化 总被引:1,自引:0,他引:1
目的构建结核分枝杆菌(M.tb)rv3873基因原核表达载体并进行表达。方法用聚合酶链反应(PCR)扩增MTBrv3873基因,并克隆入pGEM~TEasy质粒。测序正确后,再亚克隆入pET30a(+)质粒,构建pET30a(+):rv3873重组体。结果以重组体分别转化DH5a和BL21(DE3)菌后,经0.4mmol/L异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导,pET30a(+):rv3873表达出相对分子质量为47000左右的重组蛋白。SDS-PAGE分析显示,IPTG诱导4h重组蛋白的表达量最高。表达蛋白以包涵体形式存在于胞质中,表达量占全菌蛋白质的50%,Westernblot证实其具有良好的抗原性。经Ni-NTA柱纯化,获得纯度为90%的重组蛋白。结论成功地构建原核表达载体pET30a(+):rv3873,并获得重组Rv3873蛋白,为辅助诊断结核菌的感染奠定了基础。 相似文献