DNA序列分析与PCR-SSCP分析结核分支杆菌利福平敏感性的比较

目的　了解DNA序列分析与PCR-SSCP法分析利福平敏感性的价值。方法 应用DNA序列分析与PCR-SSCP法检测利福平敏感的结核分支杆菌临床分离株 25株、耐药株 41株的利福平耐药相关基因rpoB基因核心区域的突变情况。 结果 25株利福平敏感株DNA序列分析未检测到rpoB基因突变,41株耐利福平株中 38株发生突变,突变率为 92.7% (38/41);25株利福平敏感的结核分支杆菌菌株PCR-SSCP带型与对照H₃₇R_v株相同,41株耐利福平结核分支杆菌菌株中38株SSCP带型不同于对照株,提示有突变存在。与DNA序列分析相比,PCR-SSCP检测准确率为 93.9% (62/66),敏感度为 92.1% (35/38);特异度是 96.4% (27/28)。结论 DNA序列分析对判断结核分支杆菌耐利福平非常有价值;PCR-SSCP可用于利福平耐药结核分支杆菌的初步筛选。     

重症急性胰腺炎51例临床治疗体会

重症急性胰腺炎（severe acut epancreatitis,SAP）是一种起病急、病情凶险的较常见的临床急腹症。本次研究对51例重症急性胰腺炎患者临床资料进行分析,现将资料总结报道如下。[第一段]     

经口咽入路显微手术治疗齿状突畸形的护理

目的探讨经口咽入路显微手术治疗齿状突畸形的护理方法. 方法术前对8例齿状突畸形进行全面身心评估,消除思想顾虑,完备各项术前检查;术后重点加强对患者体位的护理、生命体征的观察,加强预防切口感染的护理,确保呼吸道通畅,维持SPO2>97%;注意全身营养支持,预防压疮. 结果 8例术后恢复良好,无任何护理并发症. 结论做好手术护理可帮助患者顺利完成手术治疗,减轻患者术前的顾虑和术后的痛苦,减少并发症的发生.     

改良monovision手术对中年近视患者视觉质量的影响

目的评价改良monovision手术治疗中年近视患者的疗效。方法选取年龄35~45岁的近视患者100例,随机分为2组:A组50例行常规LASIK术;B组50例行改良monovision手术。测量术前双眼戴镜及术后15d、1个月、3个月双眼裸眼远视力、近视力、立体视、对比敏感度。术后3个月对所有患者行主观视觉质量及满意度问卷调查。结果 2组术后各时间点双眼裸眼远视力、立体视、对比敏感度比较差异均无统计学意义;双眼近视力比较差异均有统计学意义。术后15d,2组立体视、对比敏感度均有下降趋势,术后1~3个月逐渐恢复。所有患者术后均无视物变形及色觉改变或失真。术后3个月,A组有22.7%患者需配戴阅读眼镜,而B组所有患者均无需配戴阅读眼镜;术后3个月患者视远满意度A组为95.5%(42例),B组为91.1%(41例),差异无统计学意义;视近满意度A组为77.3%(34例),B组为95.6%(43例),差异有统计学意义。结论改良monovision手术治疗中年近视患者疗效显著,优于常规LASIK术,进一步提高了患者的视觉质量。     

发光二极管荧光显微镜实验室诊断效果评价

目的评估发光二极管荧光显微镜实验室诊断结核分枝杆菌的能力。方法收集409痰标本,以固体罗氏培养为金标准,比较发光二极管荧光显微镜与普通光学显微镜、普通荧光显微镜在敏感性、特异性及检出时间上的差异,并比较技术人员对几种方法的评价。结果罗氏培养阳性的175份痰标本中,普通光学显微镜法112份为阳性,普通荧光显微镜法121份为阳性,发光二极管荧光显微镜法130份为阳性,敏感性分别为64.0%,69.1%,74.3%;罗氏培养阴性的234份痰标本中,普通光学显微镜法233份为阴性,荧光显微镜法227份为阴性,发光二极管荧光显微镜法227份为阴性,特异性分别为99.6%,97.0%,97.0%。χ2检验统计结果表明,发光二极管荧光显微镜与普通光学显微镜、普通荧光显微镜检测结果差异有统计学意义(P0.001)。普通光学显微镜、普通荧光显微镜和发光二极管荧光显微镜读片所用的读阳性片时间分别为186.7 s、75.1 s、72.2 s,发光二极管荧光显微镜与普通光学显微镜在读阳性片时间上差异有统计学意义(P0.05),与普通荧光显微镜差异无统计学意义。参与研究的技术员评价发光二极管荧光显微镜较其他2种方法易接受。结论发光二极管荧光显微镜较普通光学显微镜及普通荧光显微镜在检查效果及检出时间上存在明显优势,对技术人员的亲和性好,具有推广使用的价值。     

反义寡脱氧核苷酸对耻垢分枝杆菌抑制作用的研究

目的研究反义寡脱氧核苷酸对耻垢分枝杆菌生长的抑制作用,探讨其潜在的抗结核作用。方法在7H9培养基中接种5×10^5耻垢分枝杆菌MC^2 155,同时加入20μmol／L针对结核分枝杆菌中必须基因RV3806c在耻垢分枝杆菌中的同源基因MSMEG_6401的反义寡脱氧核苷酸。以耻垢分枝杆菌MC^2 155单独培养作为对照。观察和绘制细菌生长曲线;测定细胞膜MSMEG_6401编码的磷酸核糖转移酶的生物活性;应用高压气相色谱测定耻垢分枝杆菌细胞壁中糖的含量。结果与对照组相比,试验组耻垢分枝杆菌增殖速度平均降低0.45 OD（P〈0.01）;CFU计数平均延缓0．67Log;在应用等量的膜蛋白的情况下,实验组磷酸核糖转移酶的生物活性降低约40％,试验组和对照组细菌反应细胞壁的糖含量的指标甘露糖-半乳糖,阿拉伯糖比率没有明显差异（2组实验组分别为63％和69．4％;2组对照组分别为66．6％和69．1％）。结论针对MSMEG_6401的反义寡脱氧核苷酸对耻垢分枝杆菌的增殖有一定程度的抑制作用,推测反义寡脱氧核苷酸技术有一定抗结核价值;结核分枝杆菌的RV3806c基因或者是其编码产物可能是一个好的抗结核药物作用靶位。     

分子流行病学在低收入、高负担国家的作用

分子流行病学的出现已经有约20年的历史,其出现的标志是1991年第1个分子菌株分型技术的问世。之后,很多种用于分型的替代技术被开发出来,并被不同程度的应用,其中基于IS6110的RFLP指纹技术、spoligotyping和MIRU—VNTR分型技术已经成功地发展为非常有价值的工具,用于监测和了解疾病在宿主人群中的发病过程。     

急诊胃镜组织胶注射与金属夹联合肾上腺素血凝酶注射对急性非静脉曲张性上消化道出血疗效及安全性的比较

目的 探讨急诊胃镜下组织胶注射与金属夹联合肾上腺素血凝酶注射对急性非静脉曲张性上消化道出血(ANVUGIB)的疗效及安全性。方法 选取ANVUGIB患者100例,根据治疗方案分为治疗组和对照组,每组50例。在常规治疗的基础上,治疗组予急诊胃镜下组织胶注射止血治疗,对照组予急诊胃镜下金属夹联合肾上腺素及血凝酶注射止血治疗。分析比较两组治疗的有效率、内镜即时止血成功率、术后短期内再出血率、内镜下止血耗时、住院时间、输血量及不良反应发生率。结果 治疗组总有效率96%,对照组总有效率84%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗组50例均成功即时止血,对照组成功即时止血42例,止血成功率84%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗组7天内再出血2例,复发率4%,对照组7天内再出血8例,复发率16%,两组短期内再出血率比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗组的内镜下止血耗时平均约12.22±2.77 min,对照组的内镜下止血耗时平均为19.98±6.23 min,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗组的住院时间平均7.84±2.46 d,...     

首次证实结核分枝杆菌发生了对异烟肼的复敏

背景：结核分枝杆菌耐药株在全世界范围内呈现播散的趋势,对全球的公共卫生造成了严重威胁。然而,关于耐药突变在菌群中是否永久存在,或者说在没有药物压力下耐药突变是否会发生逆转,目前还没有定论。目的：为证实在1位耐多药结核（TB）病人身上发生了异烟肼（INH）复敏的情况,并研究与之相关的细菌生存能力的降低。设计：应用基因型分析和表型分析研究来自1位肺结核病人的耐异烟肼分离株发生异烟肼复敏的情况。应用全敏感株重新构建了与复敏发生前katG突变一致的细菌模型（H37 RvkatG：katGW300G）,并测试了此菌株对INH的敏感性和对氧化压力的反应。结果：基因分型和药物敏感性试验显示在不应用INH治疗的情况下,同一基因型的结核分枝杆菌菌株发生了从INH耐药向INH敏感的转变。对这种现象的基因型基础也进行了分析,发现katG的第300位密码子发生了改变,从GGG（甘氨酸,G）回复到野生型密码子TGG（色氨酸,w）。菌株H37RvhatG：：katGW300G对INH耐药,但是也同时显示出对氧化压力的反应性差。结论：此次研究证实,在没有INH药物压力的情况下,一些INH耐药突变株会转变成药物敏感的表型。此次发现对于研究异烟肼耐药的菌株和临床使用INH的时限可能有广泛的意义。     

DNA序列分析与PCR—SSCP分析结核分支杆菌利福平敏感性的比较

目的 了解DNA序列分析与PCR—SSCP法分析利福平敏感性的价值。方法 应用DNA序列分析与PCR—SSCP法检测利福平敏感的结核分支杆菌临床分离株25株、耐药株41株的利福平耐药相关基因rpoB基因核心区域的突变情况。结果 25株利福平敏感株DNA序列分析未检测到rpoB基因突变，41株耐利福平株中38株发生突变，突变率为92．7％(38／41)；25株利福平敏感的结核分支杆菌菌株PCR—SSCP带型与对照H37Rv株相同，41株耐利福平结核分支杆菌菌株中38株SSCP带型不同于对照株，提示有突变存在。与DNA序列分析相比，PCR—SSCP检测准确率为93．9％(62／66)，敏感度为92．1％(35／38)；特异度是96．4％(27／28)。结论 DNA序列分析对判断结核分支杆菌耐利福平非常有价值；PCR—SSCP可用于利福平耐药结核分支杆菌的初步筛选。