纤维支气管镜肺活检联合BACTEC960培养对肺结核的诊断价值

目的 探讨经支气管镜肺活检(TBLB)结合BACTEC 960培养对肺结核的诊断价值.方法 回顾性分析我院肺部影像学检查有异常阴影患者1 526例,对比TBLB、BACTEC 960不同检测方法所取得的效果.结果 1 526例患者经TBLB确诊各种肺部疾病1 055例,其中确诊为肺结核374例.其中常规痰标本抗酸染色镜检阳性81例,阳性检出率为21.7％ (81/374);灌洗液行BACTEC 960培养阳性179例,阳性检出率47.9％ (179/374),BACTEC 960培养较常规痰标本阳性率高,差异有统计学意义(x2 =33.9,P＜0.01).结论 TBLB联合BACTEC 960培养检测可提高肺结核确诊率,是一种可靠、安全、简便、经济的方法.     

肺结核合并肺部感染的病原菌分布及药敏分析

目的了解肺结核患者合并肺部感染的病原菌种类及耐药情况,指导临床合理使用抗生素。方法对我院2010年肺结核患者下呼吸道标本分离出的病原菌结果进行分析。结果共分离病原菌1440株,G-杆菌771株（53.5%）,G＋菌76株（5.3%）,真菌593株（41.2%）。大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）率（77.78%）高于肺炎克雷伯菌的产酶率20.42%。甲氧西林耐药菌株占金黄色葡萄球菌的65.38%。结论肺结核患者合并肺部感染的病原菌构成以G-杆菌和真菌为主,对多药耐药性较高,临床医生应根据药敏结果选择合理的抗菌药物。     

福建省临床分离非结核分枝杆菌菌种分布研究

目的 分析我院临床分离非结核分枝杆菌(NTM)菌株,探讨福建省NTM临床分离率和菌种分布情况。方法 对我院2009-2012年临床分离6 362株分枝杆菌进行结核分枝杆菌复合群(MTBC)与NTM鉴别,对鉴定为NTM菌株应用hsp65-和rpoB- PCR-RFLP进行菌种鉴定。结果 6 362株临床分离分枝杆菌共鉴别出649株NTM。鉴别出的649株NTM菌株,经hsp65-和rpoB-PCR-RFLP鉴定,菌种分布达24个种,其中菌株数量前3位菌种为:胞内分枝杆菌(M.intracellulare)302株(46.5%),鸟分枝杆菌(M. avium)138株(21.3%),脓肿分枝杆菌(M. abscessus)81株(12.5%)。结论 2009-2012 年福建省NTM临床分离率占分枝杆菌培养阳性菌株的10.2%,NTM种类多,以鸟-胞内分枝杆菌复合群(MAC)为福建省NTM的主要流行菌种,占总数的67.8%。     

耐多药肺结核患者血清蛋白指纹图谱测定初步研究

目的 评价血清蛋白指纹图谱技术在诊断耐多药肺结核患者中的应用价值。方法 选择痰Mtb培养阳性的肺结核患者70例,其中耐多药肺结核患者35例为A组,非耐药肺结核患者35例为B组;健康者35例为C组。以B、C组为对照组,应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)和蛋白芯片技术检测血清蛋白,并应用Ciphergen protein chip 3.2.1软件进行比较,分析其相关血清蛋白峰值并进行统计学处理。 结果 耐多药肺结核患者组与对照组的血清蛋白质谱数据进行比较,存在 4个差异有统计学意义的蛋白峰;其中质荷比(mass to charge ratio,m/z)在1369、3400 m/z为低表达,而8700、22 794 m/z为高表达;其灵敏度分别为77.1%（27/35）、71.4%（25/35）、80.0%（28/35）、74.3%（26/35）,特异度分别为72.9%（51/70）、74.3%（52/70）、75.7%（53/70）、81.4%（57/70）;χ²值分别为23.7、20.2、29.6、31.0,P值均＜0.01,差异有统计学意义。结论 血清蛋白质指纹图谱技术简便、快速,标本用量少,可能成为筛选耐多药肺结核一种新的检查指标。     

DNA芯片鉴定分枝杆菌的研究

目的评价DNA芯片技术鉴定分枝杆菌菌种的应用价值,为临床实际应用提供科学依据。方法收集以BACTECMGIT960从结核病患者分离到的分枝杆菌阳性培养物,以传统分枝杆菌菌种鉴定方法为对照,应用DNA芯片技术进行菌种鉴定。结果两种方法鉴定结果一致和基本一致共112株,吻合率为83.6%(112/134),包括胞内分枝杆菌50株,龟分枝杆菌14株,结核分枝杆菌14株,戈登分枝杆菌9株,鸟分枝杆菌7株,偶然分枝杆菌7株,堪、瘰、胃和猿分枝杆菌6株,土分枝杆菌和海分枝杆菌各1株;未分类NTM3株。应用DNA芯片未能分类的17株分枝杆菌中,传统方法分别鉴定为戈登分枝杆菌5株、胞内分枝杆菌3株、龟分枝杆菌2株、蟾分枝杆菌、耻垢分枝杆菌和浅黄分枝杆菌各1株,未分类NTM4株。结论用DNA芯片检测技术,可以简便、快速、灵敏、特异地将大多数分枝杆菌鉴定到种,但有待进一步完善。     

荧光探针熔解曲线法检测结核患者N-乙酰基转移酶2基因型分布的应用评价

目的 评价荧光探针熔解曲线法检测结核病患者芳基胺N-乙酰基转移酶2(arylamine N-acetyltransferases 2,NAT2)基因多态性的性能。方法 选取于2015—2016年到福州肺科医院和北京胸科医院确诊的初治结核病患者作为研究对象,分别为371例和355例。收集研究对象外周血标本。应用荧光探针熔解曲线法[分析NAT2基因rs1801280(341T→G)、rs1799929(481C→T)、rs1799930(590G→A)和rs1799931(857G→A)等4个单核苷酸多态性(SNP)]和DNA测序分析法[分析NAT2基因的rs1801279 (191G→A)、rs1041983 (282C→T)、rs1801280(341T→C)、rs1799929 (481C→T)、rs1799930 (590G→A)、rs1208 (803A→G)和1799931 (857G→A)的7个SNP位点]对研究对象进行NAT2基因型分析,并根据NAT2基因型进行NAT2代谢类型的推断分析。结果 荧光探针熔解曲线法分析4个SNP位点与DNA测序分析法分析7个SNP位点推断NAT2代谢类型的结果完全一致。荧光探针熔解曲线法从DNA制备、PCR扩增和熔解曲线分析的整个检测过程需要2.5h。共检测到NAT2 *4/*4、NAT2 *5/*4、NAT2 *6/*4、NAT2 *7/*4、NAT2 *5/*11、NAT2 *6/*11、NAT2 *7/*11、NAT2 *5/*6、NAT2 *6/*7、NAT2 *5/*5、NAT2 *6/*6、NAT2 *7/*7、NAT2 *5/*7等13种NAT2基因型。福州肺科医院的结核病患者NAT2基因快乙酰化、中间乙酰化和慢乙酰化类型分别占37.20%(138/371)、42.32%(157/371)和20.49%(76/371);北京胸科医院的结核病患者中,快乙酰化、中间乙酰化和慢乙酰化类型分别占27.89%(99/355)、54.65%(194/355)、17.46%(62/355);两组人群的乙酰化类型分布差异有统计学意义(χ ²=11.37,P=0.003)。所有的快乙酰化代谢人群均携带NAT2 *4/*4基因型[100.00%(237/237)],而慢乙酰化代谢人群主要携带NAT2 *6和NAT2 *7的单倍型[90.22% (249/276)]。 结论 荧光探针熔解曲线法分析4个SNP位点检测NAT2基因型具有结果判读简便、准确、快速的优点,适用于中国地区人群的NAT2基因型的检测。     

结核感染T细胞斑点实验临床检测研究

目的探讨结核感染T细胞斑点实验（T-SPOT.TB）在临床快速诊断结核病中的应用价值。方法利用T-SPOT.TB方法检测外周血中结核感染特异的效应T淋巴细胞的频率。同时与涂片抗酸染色、BACTEC960培养及实时定量PCR方法做比对。结果164例结核病患者中,155例T-SPOT.TB阳性,提示方法敏感度为94.5％（155/164）,显著高于其他方法。60例非结核呼吸道疾病对照组中有5例阳性,20例健康对照均为阴性,方法的特异度为93.8％（75/80）。结论T-SPOT.TB方法敏感度和特异度均非常高,可用于结核病的快速诊断,尤其是对于结核病和非结核分枝杆菌病的早期鉴别。     

血清蛋白指纹图谱检测对儿童支原体肺炎早期诊断的研究

目的 用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术和蛋白质芯片技术检测儿童支原体肺炎(MPP)和非MPP患者血清蛋白指纹图谱,探讨基于人工神经网络的的蛋白指纹图谱诊断模型对儿童MPP早期诊断的价值.方法 用SELDI-TOF-MS技术和蛋白质芯片技术测定2014年11月—2016年6月该院儿科住院的130例血清标本的蛋白指纹图谱,其中MPP 68例,非MPP 62例.将测定的血清蛋白指纹图谱建立人工神经网络预测模型,用随机抽取的75例标本(MPP 40例,非MPP 35例)作为训练组,进行训练与交叉验证,另外55例标本(MPP 28例,非MPP 27例)作为测试组,进行盲法验证该模型.结果 利用从75例训练组得出的基于人工神经网络的由M∕Z为4094.91、4650.51、5825.38、6031.77、7862.79、10122.04组成的MPP血清蛋白指纹图谱决策树诊断模型,对MPP诊断的敏感性95.00%(38∕40),特异性为88.57%(31∕35),阳性率为92.00%(69∕75),ROC曲线下面积为0.975,利用测试组的55例标本对模型进行验证,结果显示,对MPP诊断的敏感性89.29%(25∕28),特异性为96.30%(26∕27),阳性率为92.27%(51∕55).结论 该研究建立的支原体肺炎蛋白指纹图谱诊断模型对支原体肺炎的检测时间短,诊断准确率高,有助于诊断支原体肺炎.     

快速鉴定结核杆菌的双重分子信标检测体系的优化

目的优化双重分子信标的实验体系以快速检测结核杆菌及其耐药菌株。方法选择不同镁离子浓度、退火温度、引物浓度分别进行荧光定量PCR,最终得出最佳反应条件。结果为保证扩增效率且无非特异性扩增,最终选择最佳条件是:Mg~(2+)浓度3.0mmol/L;退火温度60℃;引物浓度0.3mmol/L。结论确立了双重分子信标实验的最优条件,从而保证了分子信标荧光定量PCR检测结核杆菌具有操作简便、快速、灵敏度高(最低可检测1CFU/mL)、特异性强(只能检测包括耐药菌株的结核杆菌复合群)、重复性好(变异系数5%)等优势,为双重分子信标检测结核杆菌提供了必要条件。