74株阴沟肠杆菌抗菌药物耐药性和耐药基因的研究

目的 了解临床分离的阴沟肠杆菌耐药基因存在状况。方法 对临床分离74株阴沟肠杆菌采用聚合酶链反应检测耐药基因（14种）。结果 74株中TEM、OXA-1 group、DHA、ACT-1、aac（3）-Ⅱ、aac（6’）-Ⅰ、ant（3”）-Ⅰ、qnr、sul Ⅰ、dfrA1和dfrA17阳性率分别为58．1％、2．7％、27．0％、64．9％、16．2％、64．9％、28．4％、4．1％、74-3％、2．7％和27．0％，其余基因均阴性。结论 临床分离的阴沟肠杆菌TEM、ACT-1、aac（6’）-Ⅰ、sul Ⅰ基因携带率高。     

阴沟肠杆菌耐药性、氯己定-磺胺耐药基因型研究

目的探讨临床分离的阴沟肠杆菌耐药性和氯己定-磺胺耐药基因存在状况。方法采用ATB药敏试验板微量肉汤法测定临床分离的74株阴沟肠杆菌对20种抗菌药物的敏感性,采用PCR检测qacE△1-sul1基因。结果74株菌对亚胺培南和美罗培南均敏感,对其他抗菌药物的耐药率在44.6%~94.6%之间,qacE△1-sul1基因阳性有54株,阳性率74.3%。结论阴沟肠杆菌具明显的多重耐药特征,qacE△1-sul1基因携带率很高。     

4种非发酵糖革兰阴性杆菌β-内酰胺酶基因研究

目的分析解放军第98医院临床分离的4种非发酵糖革兰阴性杆菌中β-内酰胺酶基因存在状况。方法从临床分离鲍氏不动杆菌60株、铜绿假单胞菌30株、嗜麦芽寡养单胞菌19株和黄杆菌属15株,采用PCR及序列分析的方法分析9种(群)β-内酰胺酶基因TEM、SHV、OXA、CTX-M群、PER、VEB、IMP、VIM、GES。结果鲍氏不动杆菌和铜绿假单胞菌中TEM基因阳性率分别为100.0%和66.7%;鲍氏不动杆菌有18株(30.0%)SHV阳性,17株为SHV-12型ESBLs(GenBank登录号:AY259163),另1株为一种新亚型,被命名为SHV-48;铜绿假单胞菌有1株(3.3%)OXA阳性,为OXA-10型ESBLs;其余基因均阴性。结论我院非发酵糖革兰阴性杆菌中至少存在4种β-内酰胺酶基因,基因型分别为TEM-1、SHV-12、SHV-48和OXA-10。     

多重耐药MRSA耐消毒剂基因及抗生素耐药相关基因检测

目的明确浙江湖州解放军第98医院临床分离的多重耐药耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin—resistant Staphylococcus aureus，MRSA)耐消毒剂基因及抗生素耐药相关基因存在状况。方法采用聚合酶链反应(PCR)技术检测20株多重耐药MRSA中耐消毒剂基因(qacA)、β-内酰胺类耐药相关基因(mecA、blaTEM)、氨基糖苷类耐药相关基因(氨基糖苷类修饰酶基因)[aac(6’)／aph(2″)、aph(3’)-Ⅲ、ant(3″)-1、ant(4′，4″)、ant(6)-1]、四环素耐药相关基因(terM)、红霉素耐药相关基因(erm)和万古霉素耐药相关基因(vanA、vanB)。结果20株MRSA中，qacA、mecA、blaTEM、aac(6’)／aph(2″)、aph(3’)-Ⅲ、tetM和eyYn基因PCR扩增均阳性，1株ant(4’，4″)基因阳性，而ant(3″)-1、ant(6)-1、vanA和vanB4种基因均阴性。结论临床分离的多重耐药MRSA中qacA、mecA、blaTEM、aac(6′)／aph(2″)、aph(3’)-Ⅲ、tetM和PM基因携带率均很高；在MRSA中发现qacA基因为我国首次报道，应引起医院感染监控部门高度重视。     

烧伤科与骨科住院患者创面感染葡萄球菌分布及耐药性比较分析

目的 比较分析烧伤科与骨科住院患者创面感染葡萄球菌的分布及耐药性差异,为临床合理选用抗菌药物提供参考依据.方法 收集2011-2015年烧伤科与骨科患者创面分泌物送检,采用MicroScan WalkAway-96 plus全自动微生物分析系统进行细菌鉴定及药敏试验,共测定20种抗菌药物敏感性,采用WHONET 5.6和SPSS 19.0软件统计分离出的非重复性感染细菌种类并进行耐药性分析.结果 5年间烧伤科共分离出革兰阳性菌202株,其中金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)110株(54.46％)、凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)78株(38.61％),骨科共分离出革兰阳性菌725株,其中SA 310株(42.76％)、CNS 357株(49.24％).烧伤科SA检出率明显高于骨科(P＜0.005),而骨科CNS检出率高于烧伤科(P＜0.05).烧伤科检出甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)85株,占SA的77.27％(85/110),骨科检出MRSA 99株,占SA的31.94％(99/310),二者有显著差别(P＜0.001).烧伤科检出甲氧西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)74株,占C NS的94.87％(74/78),骨科检出MRCNS 266株,占CNS的74.50％(266/357),二者有显著差别(P＜ 0.001).烧伤科和骨科SA分别有10种和2种耐药率＞50.0％、CNS分别有9种和4种耐药率＞50.0％.烧伤科SA有10种耐药率均明显高于骨科(P＜0.05),但有1种奎奴普丁/达福普汀耐药率明显低于骨科(P＜0.05).烧伤科CNS有7种耐药率均明显高于骨科(P＜0.05).未发现对万古霉素耐药葡萄球菌.结论 烧伤科与骨科住院患者创面感染葡萄球菌构成比及耐药性有较大差异,多重耐药普遍,烧伤科葡萄球菌耐药性比骨科强、MRSA也更为严重,临床应根据药敏试验结果合理选用抗菌药物,万古霉素仍是治疗多重耐药葡萄球菌感染的首选药物.     

中国部分地区铜绿假单胞菌β-内酰胺酶基因型研究

目的调查中国部分地区临床分离铜绿假单胞菌β-内酰胺酶（β-lactamases，BLAs）基因型分布。方法收集北京、浙江、江苏及湖北等地区5家医院临床分离的165株铜绿假单胞菌，PCR及测序方法检测10种BLAs。结果165株铜绿假单胞菌114株检出BLAs的基因，总检出率为69．10％，其中TEM、CARB、OXA、PER、VIM、IMP、GES、DHA型的检出率分别为41．21％、15．15％、13.94％、6．67％、5，45％、4．85％、4．85％和3．03％，未检出SHV型和VEB型BLAs的基因。19株（16．81％）同时产两种BIAs．的基因，12株（10．62％）同时产3种BLAs的基因。各地区BLAs的基因型有较大差别。结论中国部分地区铜绿假单胞菌携带BIAs的基因型主要是TEM型，部分菌株同时产两种及两种以上BLAs的基因；各地区BLAs的基因型有较大差别。     

多重耐药铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶基因检测

目的:了解浙江省湖州市中国人民解放军第98医院自临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌(MRPA)中氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因存在状况.方法:在2003年9月至2004年10月间从临床分离30株MRPA,采用聚合酶链反应(PCR)技术检测9种AMEs基因[aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(3)-Ⅲ、aac(3)-Ⅳ、aac(6')-Ⅰ、aac(6')-Ⅱ、ant(3")-Ⅰ、ant(2")-Ⅰ和aph(3')-Ⅵ].结果:30株MRPA中各种AMEs基因的阳性株数(阳性率)分别为aac(3)-Ⅱ23株(76.7%)、aac(6')-Ⅰ 1株(3.3%)、aac(6')-Ⅱl0株(33.3%)、ant(3")-Ⅰ 16株(53.3%)、ant(2")-Ⅰ 8株(26.7%),而aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅲ、aac(3)-Ⅳ和aph(3')-Ⅵ均为阴性.基因总阳性率为86.7%(26/30).结论第98医院临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌中AMEs基因携带率很高,至少存在5种AMEs基因,分别为aac(3)-Ⅱ、aac(6')-Ⅰ、aac(6')-Ⅱ、ant(3")-Ⅰ和ant(2")-Ⅰ.     

下呼吸道感染鲍曼不动杆菌ESBLs表型及基因型检测

目的分析引起下呼吸道感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBk)鲍曼不动杆菌的耐药情况及其β-内酰胺酶(BLA)耐药基因类型.方法采用微量稀释法测定临床分离的35株鲍曼不动杆菌对21种抗菌药物的敏感性、三维试验法检测ESBLs采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析BLA基因型.结果 29株(82.9%)ESBLs阳性,其中14株(40.0%)合并产AmpC酶.所有菌株均对亚胺培南、美洛培南、头孢哌酮/舒巴坦和多粘菌素E敏感,其余抗生素的耐药率在40.0～100.0%之间.35株TEM型扩增全部阳性,任选2株测序结果均为TEM-1型.有15株菌株扩增到SHV型BLA基因,经测序13株为SHV-12型ESBLs,另2株(HZ01株和HZ29株)为2种新发现的SHV型BLA,分别被命名为SHV-48和SHV-56.结论临床分离的引起下呼吸道感染鲍曼不动杆产ESBLs比例很高,多重耐药状况极其严重,至少存在4种不同类型的β内酰胺酶基因,基因型分别为TEM-1、SHV-12、SHV-48和SHV-56.     

SHV型β内酰胺酶新亚型SHV-71的发现

目的了解鲍曼不动杆菌中SHV型β内酰胺酶的基因型及其耐药性。方法采用纸片扩散法(K-B法)测定5株鲍曼不动杆菌对13种抗菌药物的敏感性;设计SHV型β内酰胺酶引物,采用PCR法获得SHV型酶编码基因的片段,并将PCR扩增产物克隆入pMD18-T载体,以双脱氧链终止法测定核苷酸序列,确定亚型。结果药敏试验结果显示:5株鲍曼不动杆菌对氨苄西林、哌拉西林、头孢西丁、头孢他啶和氨曲南均耐药。3株菌SHV基因型扩增结果呈阳性,其中2株与SHV-12的序列100%相同,另1株(No-03)经GenBank网上同源性比较,未发现完全相同的核苷酸和氨基酸序列,为一种新发现的SHV亚型β内酰胺酶耐药基因,其序列以SHV-71的名称在美国核酸数据库GenBank成功登录(GenBank注册号:DQ296194)。结论临床分离的鲍曼不动杆菌No-03株所产SHV型BLA为一种新SHV亚型β内酰胺酶。     

1999～2003年鲍曼不动杆菌耐药性的变迁分析

目的 了解5a来鲍曼不动杆菌的耐药性变迁。方法 采用微量稀释法，测定549株鲍曼不动杆菌对亚胺培南等22种抗生素的敏感性。结果 5a中总敏感率居前4位的依次是亚胺培南(96.4％)、美罗培南(92．9％)、多粘菌素(93．0％)和哌拉西林／他唑巴坦(30．1％)，其余在0．0％～20．9％之间。5a间亚胺培南的抗菌活性最高，且数年不减，敏感率在95．0％以上；其次是多粘菌素E和美罗培南，敏感率分别大于88．0％和84．0％。到2002／2003年度对阿莫西林、阿莫西林，克拉维酸、哌拉西林、哌拉西林／他唑巴坦、替卡西林、替卡西林，克拉维酸、氨苄西林，舒巴坦、头孢噻吩、头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南、复方新诺明、氨基糖苷类、环丙沙星和磷霉素的耐药率在56．7％～100．0％之间。5a间耐药率上升最快的是阿莫西林，克拉维酸、头孢曲松、头孢噻肟、哌拉西林和哌拉西林，他唑巴坦。结论 5a间鲍曼不动杆菌对大多数常用广谱抗生素的耐药性在逐年增强，并且多重耐药状况相当严重。亚胺培南仍是抗多重耐药鲍曼不动杆菌感染最有效的抗生素。