肠球菌红霉素四环素耐药基因研究

目的 :为了解肠球菌对红霉素、四环素耐药基因的流行状况。方法 :在 2 0株肠球菌中 ,进行了红霉素甲基化酶ermB基因与主要外排转运蛋白mefA基因以及四环素核糖体保护蛋白tetM基因的检测。结果 :2 0株肠球菌中有19株耐红霉素 ,其中 12株检出ermB基因 ,mefA基因均为阴性 ;11株耐四环素 ,其中 5株检出tetM基因。结论 :肠球菌分别获得ermB基因和tetM基因是耐红霉素和四环素的主要机制之一     

鲍曼不动杆菌SHV-12型超广谱β内酰胺酶基因研究

目的：分析自临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)鲍曼不动杆菌SHV型β-内酰胺酶耐药基因序列，并确定其所产ESBLs亚型。方法：从住院病人的送检标本中分离的60株鲍曼不动杆菌中，经药敏试验、ESBLs表型确证试验和SHV型β内酰胺酶耐药基因的聚合酶链反应(PCR)检测，筛选出1株具有多重耐药特性、ESBLs表型和SHV基因型均阳性的分离株(HZ02株)，对其耐药基因进行序列分析。结果：HZ02株基因片段长825个核苷酸，与Nuesch-Inderbinen等从肠杆菌中发现的SHV—12型ESBLs编码基因序列(GenBank注册号：X98105)完全相同。结论：HZ02株鲍曼不动杆菌可产生SHV—12型ESBLs，从而证实了我国临床分离的鲍曼不动杆菌中存在产SHV—12亚型ESBLs菌株。其序列已在美国核酸数据库(GenBank)登录(注册号：AY29163)。     

肠球菌产β内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶基因检测

目的 探讨肠球菌耐药机制和耐药基因流行状况。方法 对20株肠球菌的β内酰胺酶TEM基因、氨基糖苷类修饰酶aac(6′／aph(2″)和aph(3′）-Ⅲ基因进行检测。结果 20株肠球菌中有9株表型为青霉素／阿莫西林耐药并均检出TEM基因；12株对高浓度庆大霉素耐药并均检出aac(6′／aph(2″)和／或aph(3′)-Ⅲ基因。结论 国内产β内酰胺酶、产氨基糖苷类修饰酶的肠球菌比率较高。     

肠球菌红霉素 四环素耐药基因研究

目的：为了解肠球菌对红霉素、四环素耐药基因的流行状况。方法：在20株肠球菌中，进行了红霉素甲基化酶ermB基因与主要外排转运蛋白mefA基因以及四环素核糖体保护蛋白tetM基因的检测。结果：20株肠球菌中有19株耐红霉素，其中12株检出ermB基因，mefA基因均为阴性；11株耐四环素，其中5株检出tetM基因。结论：肠球菌分别获得ermB基因和tetM基因是耐红霉素和四环素的主要机制之一。     

携带bla_(KPC-2)型碳青霉烯酶基因泛耐药肺炎克雷伯菌对喹诺酮类耐药机制研究

目的了解临床分离的携带blaKPC-2型碳青霉烯酶基因泛耐药肺炎克雷伯菌对喹诺酮类药物的耐药机制,为临床治疗提供参考依据。方法在2008年11月-2009年7月从住院患者中分离19株携带blaKPC-2型碳青霉烯酶基因泛耐药肺炎克雷伯菌,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析两种喹诺酮类药物作用靶位编码基因(gyrA、parC)和5种质粒介导的喹诺酮类耐药相关基因。结果 19株携带blaKPC-2型碳青霉烯酶基因泛耐药肺炎克雷伯菌gyrA和parC基因PCR扩增均阳性,1株(5.3%)aac(6′)-Ⅰb-cr基因阳性,qnrA、qnrB、qnrS和qepA基因均阴性;序列分析结果表明,19株gyrA和parC基因均发生突变,分别导致gyrA基因喹诺酮耐药决定区(QRDR)出现两个位点错义突变,导致第83位丝氨酸(Ser)被异亮氨酸(Ile)取代、第87位天冬氨酸(Asp)被甘氨酸(Gly)取代,parC基因QRDR出现1个位点错义突变,导致第80位丝氨酸被异亮氨酸取代。结论染色体介导的耐药机制仍是临床分离的携带blaKPC-2型碳青霉烯酶基因泛耐药肺炎克雷伯菌对喹诺酮类药物耐药主要机制。     

湖州地区2001-2008年肠球菌属

目的 了解湖州地区肠球菌属的分布特征及8年耐药性的变迁,为临床治疗提供参考. 方法 回顾性分析2001-2008年湖州市3所三级医院临床标本分离的肠球菌属检出率、分布特点及药敏结果.结果 129 544份临床标本检出肠球菌属3692株,分离率为2.9%,菌种以粪肠球菌为主(54.9%),其次为屎肠球菌(40.7%);肠球菌属在各种临床标本中分布以尿液为主,痰液标本中肠球菌属的比例逐年增加;粪肠球菌对红霉素、利福平、四环素、环丙沙星、左氧氟沙星分别为82.4%、77.0%、73.0%、61.8%、50.2%,屎肠球菌分别为84.3%、76.7%、36.0%、77.5%、73.8%;肠球菌属对万古霉素和替考拉宁保持很好的敏感性. 结论 肠球菌属感染以粪肠球菌、屎肠球菌为主,由其引起的呼吸道系统感染在增加;肠球菌属总体耐药率较高,屎肠球菌耐药性高于粪肠球菌,临床治疗应根据分离株的耐药特点选择相应的治疗方案,以提高疗效.     

脑外伤并发嗜麦芽窄食单胞菌感染

目的 了解医院内尤其是脑外伤患者感染嗜麦芽窄食单胞菌情况及其耐药性，以利于临床合理选用抗生素。方法 用法国生物-梅里埃公司AP120NE细菌鉴定试验条及ATB药敏试验条进行菌种鉴定及药敏试验。结果 69株嗜麦芽窄食单胞菌中有47株（68.1%)分离自脑外伤患者呼吸道标本（痰41份、气管切开口分泌物6份）；药敏试验显示其耐药率对环丙沙星最低（10.1%)，其次为诺氟沙星（13.0%)，再次为头孢他啶（42.0%)，对伊米配能天然耐药，结论 嗜麦芽窄食单胞菌主要引起呼吸道感染，尤其是脑外伤患者呼吸道特别易受感染，其多重耐药状况十分严重。对其感染的治疗，应在抗生素敏感试验的指导下进行。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌胞外酶及核酸酶编码基因研究

目的调查一组耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中蛋白酶、葡激酶、透明质酸酶、脂酶及核酸酶编码基因携带状况,分析MRSA胞外酶基因的构成。方法 24株MRSA分离自浙江湖州解放军98医院,用仪器法和金黄色葡萄球菌看家基因spaPCR法鉴定菌种后,再作甲氧西林耐药决定基因mecAPCR检测,确认为MRSA,采用聚合酶链反应(PCR)的方法检测丝氨酸蛋白酶编码基因ssp、splB、葡激酶编码基因sak、透明质酸酶编码基因hysA、脂酶编码基因lip及核酸酶编码基因nuc。结果 6种酶分子编码基因均呈阳性,阳性率100.0%;杀白细胞素编码基因pvl、lukE、psm-mec检出率分别为62.5%、100.0%、100.0%,lukM、psmα等两种基因中无阳性发现;溶血素编码基因hla、hld、hlg-2检出率分别为91.7%、100.0%、100.0%,hlb、hlg等两种基因中无阳性发现;24株MRSA基因检测结果可分为3种阳性检出模式,其中ssp、splB、sak、hysA、lip、nuc、pvl、lukE、psmmec、hla、hld、hlg-2共12种基因阳性模式有15株,占62.5%。结论 24株MRSA中的每一株均有多种胞外酶和多种细胞毒素编码基因阳性,胞外酶与细胞毒素的共同作用可能是金黄色葡萄球菌导致宿主炎症的主要机制,MRSA同时携带多种胞外酶和多种细胞毒素编码基因为国内首次发现。     

4种非发酵糖革兰阴性杆菌氨基糖苷类修饰酶基因研究

目的 分析解放军第98医院临床分离的4种非发酵糖革兰阴性杆菌中氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因存在状况.方法 在2000年7月至2004年10月间从临床分离60株鲍曼不动杆菌(Ab)、30株铜绿假单胞菌(Pa)、19株嗜麦芽窄食单胞菌(Sm)和15株黄杆菌属细菌(Fb),采用PCR及序列分析法分析9种AMEs基因aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(3)-Ⅲ、aac(3)-Ⅳ、aac(6')-Ⅰ、aac(6')-Ⅱ、ant(3')-Ⅰ、ant(2')-Ⅰ和aph(3')-Ⅵ.结果 Ab、Pa、Sm和Fb中9种AMEs基因总阳性率分别为81.7%、86.7%、10.5% 和0.0%.Ab、Pa和Sm中分别检出8种、5种和2种基因.aac(3)-Ⅲ基因均阴性,各菌种中阳性率最高的基因分别是Pa中aac(3)-Ⅱ(76.7%)、Ab中ant(3')-Ⅰ (60.0%)、Sm 中aac(6')-Ⅱ和ant(2')-Ⅰ(均为10.5%).结论 临床分离的非发酵糖革兰阴性杆菌(除Fb外)中至少存在8种AMEs基因,Pa及Ab中AMEs基因携带率高.     

阴沟肠杆菌耐药性、氯己定-磺胺耐药基因型研究

目的探讨临床分离的阴沟肠杆菌耐药性和氯己定-磺胺耐药基因存在状况。方法采用ATB药敏试验板微量肉汤法测定临床分离的74株阴沟肠杆菌对20种抗菌药物的敏感性,采用PCR检测qacE△1-sul1基因。结果74株菌对亚胺培南和美罗培南均敏感,对其他抗菌药物的耐药率在44.6%~94.6%之间,qacE△1-sul1基因阳性有54株,阳性率74.3%。结论阴沟肠杆菌具明显的多重耐药特征,qacE△1-sul1基因携带率很高。