经输血传播疾病的实验室检测及其进展

目前 ,已知的输血传播疾病有十几种 ,其中主要有乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病 (ＡＩＤＳ)、梅毒、人类Ｔ淋巴细胞白血病病毒Ⅰ /Ⅱ型 (ＨＴＬＶ Ⅰ /Ⅱ )感染和巨细胞病毒感染 (ＣＭＶ)等。目前 ,大多数国家已规定必须对献血者及血液筛查这 6种病原体。现就目前这几种主要输血传播疾病的实验室检测及其新进展情况作一概述。一、血清免疫学检测1 乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)感染检测[1] :对献血者ＨＢＶ感染的检测 ,大多数国家通常只检测ＨＢＶ表面抗原 (ＨＢｓＡｇ)。检测ＨＢｓＡｇ方法有间接免疫凝集试验 ,如间接血凝试验(ＩＨＯ)、乳胶凝集试验…     

抗干扰素抗体及临床意义的研究进展

干扰素作为一蛋白质制剂用于临床治疗，可导致特异性抗干扰素抗体的产生。本文就抗干扰素抗体的发生情况、影响发生率的因素和对临床治疗的意义作一综述。     

不同人群输血传播病毒感染的检测和传播途径分析

目的 了解深圳地区不同人群TTV感染状况,探讨TTV传播途径。方法建立套式聚合酶链反应方法．对临床病毒性肝炎病人、血液透析病人、静脉吸毒者、性病患者和献血者人群进行TTV DNA的PCR检测,并对部分阳性株进行序列测定。结果非甲-戊型肝炎病人、血透患者和反复输血病人TFVDNA阳性率分别为41.7％、40.5％和35．7％．明显高于甲-丙型肝炎病人（17．7％,P〈0．01）;静脉吸毒者中TTV DNA阳性率高达39．3％,明显高于献血者人群（20．4％。P〈0．05）：ALT异常献血员中TTV DNA检出率为明显高于无偿献血员人群（P〈0.05）;性病患者生殖道分泌物中TTV DNA检测出率为15．8％。2株TTV分离株与TTV标准株（AB008394）同源性在92．5％以上。结论TTV感染与肝炎有关。可能是非甲-度型肝炎的病原之一;TTV除了经血源途径传播外。性传播可能成为重要传播途径之一。     

手足口病发病情况分析

目的:分析手足病的发病情况,探究手足病发病机理以及总结治疗该病的方法。方法:对2008年至2011年来我院就诊的手足口病患者进行发病情况分析,主要观察比较患者发病时间、临床症状等。结果:对所有患者的临床资料进行比较后,发现患者的男女比例差异明显(P<0.05)且患者的年龄均小于7岁,2～4岁的患者较多,共为99例,同时还发现,2008年～2010年这三年中,6月～8月均为发病人数最多的时期,与其他时间段相比较,差异显著(P<0.05)。在201例患者中,体温明显增高的患者有147例(73.13%);159例(79.10%)患者出现口腔粘膜病变;且有患者均出现皮疹,皮疹处大于等于三处的的患者13例(6.47%),其余患者皮疹处均小于三处;71例(35.32%)患者出现呼吸道系统异常的现象,包括流口水、咳嗽、流鼻涕等;21例(11.94%)患者出现消化道异常,包括恶心、呕吐等现象;24(10.45%)例患者出现精神异常。结论:手足口病的患者年龄偏小,且夏季为其高峰期,应宣传疾病知识,并提倡注意个人卫生,从而防治手足口病的产生和传播。     

原位杂交法检测非甲─非庚型肝炎患者肝组积中新型肝炎病毒DNA

目的证实在非甲-非庚型病毒性肝炎患者肝组织中一种新型肝炎病毒（transfusion－transmittedvirus，TTV）的存在．方法采用地高辛素标记TTVDNA探针以原位杂交技术对51例血清学病毒标记非甲-非戊型、免疫组化检测肝组织中HGVNSS阴性的病毒性肝炎患者石蜡包埋肝组织进行了检测．结果各型病毒性肝炎肝组织中TTV基因的总检出率为27．5％，其中急性轻型肝炎的检出率为30．8％（4／13），急性重型肝炎（1／8，12．5％），亚急性重型肝炎（3／7，42．9％），慢性肝炎（2／6，33．3％），活动性肝硬变（2／9，22．2％），慢性重型肝炎（1／4，25％），原发性肝癌（1／4，25％）TTVDNA表达于肝细胞核或胞浆内，以核型多见．在急性肝炎，TTV阳性细胞弥漫分布于肝小叶内，慢性肝炎于汇管区附近较为密集，而在肝硬变病例，阳性细胞在假小叶内多呈片簇状不规则分布结论在不明原因病毒性肝炎患者血清及肝组织中TTVDNA的检出表明TTV为一种新型的肝炎病毒，TTV为一种嗜肝性病毒，在我国存在着TTV感染     

核酸检测技术在深圳地区献血者血液病毒筛查中的应用

血液安全主要依靠对献血者的筛选和采用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）办法对血液中输血相关病毒抗体和／或抗原的检测。由于病毒感染“窗口期”的存在,以及ELISA检测方法的局限性等因素,输血传播疾病的风险依然存在。     

携带乙肝核心抗原基因复制缺陷型重组腺病毒的高效制备和表达

目的构建表达乙肝病毒核心抗原(HBcAg)的复制缺陷型重组腺病毒载体。方法扩增乙肝病毒(HBV)C基因片段,亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV上,与5型腺病毒骨架质粒pAdeasy-1共同电转化到大肠杆菌BJ5183内进行同源重组,经卡那霉素抗性筛选和酶切鉴定筛选出携带HBVC区基因的重组腺病毒载体,用脂质体包裹PacⅠ酶切线性化的重组质粒,转染到293细胞内进行重组腺病毒的包装。体外转染真核细胞,通过示踪基因绿色荧光蛋白表达的观察、RT-PCR和ELISA检测目的基因的表达。结果成功获得重组腺病毒质粒pAd-HBc。重组质粒pAd-HBc导入293细胞,经过包装和二次扩大培养获得了具有感染能力的重组腺病毒颗粒Ad-HBc,其病毒滴度达5×109pfu/mL,并能在真核细胞中有效表达目的基因。结论成功构建表达HBcAg复制缺陷型重组腺病毒载体,为进一步开展HBV基因治疗研究提供实验基础。     

对HBsAg和抗-HCV ELISA筛查阳性献血者进行确认试验分析

目的 探讨对HBsAg和抗-HCV ELISA筛查阳性献血者进行确认试验分析的意义。方法分别采用中和试验对ELISA检测HBsAg阳性献血者和重组免疫印记试验(RIBA)对抗-HCV阳性献血者进行确认检测，并对确认试验阴性献血者进行NAT检测。结果38693份献血者中，ELISA筛查出HBsAg和抗-HCV阳性分别为381(0．98％)份和173(0．45％)份。在ELISA筛查出的381份HBsAg阳性献血者中，经中和试验确认HBsAg阳性352份，29份为阴性；173份抗-HCV阳性献血者中，RIBA试验确认79份阳性。59份阴性。35份为可疑；29份中和试验确认HBsAg阴性标本和94份RIBA确认抗-HCV阴性或可疑的标本．NAT检测HBV DNA和HCV RNA均为阴性。结论对献血者进行HBsAg和抗-HCV确认试验能够避免假阳性结果的发生，有利于保护献血者的利益和推动志愿无偿献血事业的开展。     

应用通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应检测肠道病毒

目的设计通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应(RT-n-PCR),以求敏感、特异及快速诊断肠道病毒(EV)感染。方法在EV基因组5'端非编码区(5'-UTR)设计2对通用引物,建立RT-n-PCR检测方法。结果共有104份临床标本检测到相应大小扩增条带,阳性率31.8%(104/327);在147例病例中粪便和咽拭子EV阳性比较差异无统计学意义(P>0.05)。病例总阳性数64例,阳性率38.8%(64/165)。正常儿童与可疑EV感染病人EV阳性率比较差异有统计学意义(u=3.38,P<0.01)。结论RT-n-PCR可以准确快速地检测出肠道病毒,同时检测多份标本可以提高EV阳性率。     

血液透析病人中输血传播病毒（TTV）感染的检测及序列分析

目的：检测我国南方地区血液透析的病人中经输血传播病毒（ＴＴＶ）的感染。方法：采用ＴＴＶ基因组ＯＲＦ１区段设计特异性引物,建立巢式ＰＣＲ方法检测４８例血液适析病人血清标本中ＴＴＶ ＤＮＡ,并对分离出的２例ＴＴＶ部分基因进行核苷酸序列分析。结果：血液透析病人ＴＴＶＤＮＡ阳性率为４１．７％（２０／４８）,２例ＴＴＶＤＮＡ基因序列与日本ＴＴＶ基因相对应位置的核苷酸同源性分别为９２％和９５％。结论：我国南方