Study on mitochondrial DNA diversity among 7 inbred strains of mice

Objective：To study the genetic variation of mitochondrial DNA （mtDNA） among common laboratory strains of inbred mice. Methods： The genetic polymorphism of mtDNA among 4 classical laboratory strains of inbred mice and 3 inbred strains of mice established in China was analyzed by polymerase chain reaction coupled with restriction fragment length polymorphism（PCR-RFLP） and PCR coupled with single-stranded conformation polymorphism（PCR-SSCP）. Results： With regard to the D-loop （Displacement loop, D-loop）, tRNA^ Met＋Glu＋Ile, and ND3 （NADH dehydrogenase subunit 3, ND3） gene fragments of mtDNA from these mice,no variation was revealed by PCR-RFLP at 46 restriction enzyme sites. Further analyzed by PCR-SSCP,the D-loop 5＇fragment and 3＇end fragment of mtDNA from these mice also showed no genetic variation. Conclusion： Owing to maternal mode of inheritance of mtDNA,the results indicate that these common inbred strains of mice share the same maternal lineage.     

肠道菌群影响无菌小鼠对卵清蛋白的敏感性

目的 通过观察过敏和无过敏反应小鼠肠道菌群在无菌小鼠肠道内定植后对卵清蛋白(OVA)刺激的反应,探究肠道菌群在食物过敏中的作用.方法 采集用卵清蛋白成功诱导出的过敏和无过敏反应SPF级小鼠的粪便,分别移植给无菌小鼠(各10只),为过敏组(FA组)和无过敏反应组(NR组).粪菌移植后第3周,两组分别随机抽取7只再用OVA激发为实验组(FA-o组、NR-o组),余3只为生理盐水对照组(FA-c组、NR-c组).用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术评价粪菌移植后肠道菌群在肠道内的定植情况,比较FA组和NR组肠道菌群的差别.观察两组再用OVA激发后的临床表现,HE染色观察小鼠空肠组织形态学改变.结果 (1)粪菌移植后第3周,与供体小鼠相比,FA组与NR组小鼠肠道菌群的DGGE条带多数一致,而FA组与NR组肠道菌群比较,DGGE条带有明显不同,聚类分析和主成分分析(principal component analysis,PCA)两组均能很好分离,测序结果也表明无过敏反应组中厚壁菌门的细菌占优势,过敏组中变形菌门的细菌占优势;(2)移植粪菌的无菌鼠再次用OVA激发时,FA-o组有临床表现,NR-o组无明显临床表现;HE染色可见FA-o组较NR-o组小鼠空肠绒毛上皮细胞局灶性坏死、脱落,炎性细胞浸润明显严重.结论 肠道菌群不同使无菌小鼠对OVA的敏感性不同,说明肠道菌群的变化可能是食物过敏的始动因素,肠道菌群可传递宿主对食物过敏的敏感性.     

洛伐他汀在巴马香猪体内的绝对生物利用度

遗传学控制在非人灵长类动物人工繁殖种群诸多管理环节具有至关重要的作用。本文紧密围绕遗传学控制的目标,从非人灵长类动物家系建立、家系确认,数量遗传性状及遗传多态性检测等方面综述了遗传学控制的实施要素。对非人灵长类动物种群实行遗传学控制,对于维持种群的遗传多样性,提高动物长期的生存力和繁殖率,满足医学生物学实验需要具有现实意义。     

建立我国规模化无菌动物高效研究应用体系

无菌动物与宏基因组技术是驱动人体健康微生物组研究的两大动力。没有无菌动物菌群（株）移植模型,就无法确立菌群与疾病的因果关系;没有无菌动物,就没有菌群与人体疾病研究飞速发展的今天与明天。无菌动物应用已形成有菌与无菌动物比较、菌群（株）移植、基因工程动物无菌化、无菌动物发育四种通用研究模式,研究模式的标准化将加大无菌动物研究应用规模及速度。本课题组经过十几年努力,已建成国内体量大、技术体系稳定、服务单位多、具有较大影响力的无菌动物平台,为国内生物医学、畜牧、食品微生物组科学问题解决提供了有力支撑。但是,目前我国无菌动物规模小、效率低、供用平台与应用条件分离,无菌动物基础理论与技术体系尚待发展,难以满足日益增长的应用需求。亟待建立规模化无菌动物高效研究应用体系,以适应我国微生物组研究高速发展。     

nm23／NDPK基因,整合蛋白,Ⅳ型胶原酶及尿激酶的表达与鼠肺癌转…

观察肺癌ｎｍ２３／ＮＤＰＫ，整合蛋白，Ⅳ型胶原酶，尿激酶的表达与肺癌转移的相关性。方法以ＡＢＣ免疫组织化学染色，对不同转移力４株人肺癌裸鼠移植瘤及８７例人肺癌临床标本作上述４种分子表达的观察，并在裸鼠体内观察整合蛋白β１抗体及其配体ＲＧＤ多肽对移植瘤生长及转移的影响。１；人肺癌移植瘤与临床标本均呈ｎｍ２３／ＮＤＰＫ高表达，且与淋巴结转移无显著相关。２．４株移植瘤总体上呈β１亚族整合蛋白低表达，且与     

高低转移性小鼠肝癌细胞系基因组的不稳定性

目的：了解小鼠高、低转移性肝癌细胞系Hca／16A3—F(F)和Hca／A2—P(P)发生基因组不稳定性情况。方法：随机选择小鼠7号和ll号染色体上21个微卫星多态标记，采用聚合酶链式反应—简单重复序列多态性(simple sequence length poly—morphism，SSLP)方法对F和P细胞系进行分析。结果：F和P细胞系有信息的微卫星基因座等位基因与近交系C3H小鼠相同，且存在多基因座等位基因异常；P和F细胞在3个基因座表现不同的等位基因条带。结论：小鼠高、低转移性肝癌细胞系存在基因组不稳定性，并在小鼠肝癌的发生、发展中起重要作用；源自纯合性小鼠的一个肿瘤的两个亚克隆细胞系存在不同的遗传学特征。     

羊胎提取液的实验研究

目的对羊胎提取液的理化性质及生物学活性进行初步研究。方法理化性质检测采用光谱法、液相色谱法、氨基酸分析法等 ,活性测定采用活性E花环试验法和淋巴细胞转化实验法。结果羊胎提取液是多肽和核酸的混合成分 ,pH 6 .8～ 7.5 ,在 2 5 1nm波长处有一特征吸收 ,含 17种氨基酸。多肽、核酸、总氮含量和分子量依据不同工艺而定 ,蛋白质反应阴性 ,具有明显的细胞免疫调节功能。结论羊胎提取液可作为一种新型的免疫调节剂     

三个鼠源性肿瘤细胞系的RAPD分析

目的：探讨鼠源性肿瘤细胞系基因组不稳定程度或基因组损伤与肿瘤发生的关系。方法：用145条RAPD引物对鼠源性Lewis肺癌、SCC891乳腺癌及B16黑色素瘤及其相应正常组织基因组DNA进行RAPD扩增，扩增产物在含溴化乙锭的1．5％琼脂糖凝胶中电泳，紫外透射仪上观察照相。结果：145条引物绝大多数能扩增出清晰、明显的条带。多数引物扩增出的条带呈单态性，在肿瘤及其相应正常组织之间无差异。部分引物扩增出的DNA序列在肿瘤组织与其相应正常组织间存在差异，表现为多态性，即肿瘤组织与其相应正常组织的DNA片段相比，出现带的缺失、增加、移动和强度变化。扩增Lewis肺癌的105条引物中有25条表现多态性；扩增B16黑色素瘤的105条引物中有24条表现出多态性；扩增SCC891乳腺癌的120条引物中有18条表现出多态性。结论：RAPD扩增结果表明三个恶性度较高的瘤株，其基因组损伤程度亦较高，表现为基因拷贝数的增加或等位基因的丢失，进步证实了细胞的癌变与基因组某些改变密切相关。     

不同限饲水平下巴马香猪血液生理、生化指标的比较

目的 测定不同限饲水平下巴马香猪重要血液生理、生化指标,探讨限饲对血液生理生化指标的影响.方法 将336头断奶巴马香猪根据不同限饲水平按完全随机法分为对照组、80％日粮组和50％日粮组,每组112头,在60日龄和90日龄前腔静脉采集血液样本,对重要的10项血液生理指标和7项血液生化指标进行测定,统计不同限饲水平下指标的差异.结果 血液生化指标中ALT、TP、UREA和CREA指标值随着限饲水平的上升而上升;而TCHOL和GLU指标值随着限饲水平的上升而下降(P＜0.05).血液生理指标中RBC、HGB、HCT、MCH和MCHC指标含量随着限饲水平的上升而上升;而PLT、MCV、RDW-SD和RDW-CV指标含量随着限饲水平的上升而下降(P＜0.05).结论 巴马香猪在3个限饲水平下,血液生理、生化指标存在明显差异;按80％日粮限饲的巴马香猪更能获得稳定标准的巴马香猪血液生理、生化指标.     

CYP3A29稳定表达HepG_2细胞株的建立及其硝苯地平代谢活性鉴定

目的建立稳定表达Bama小型猪CYP3A29的HepG2细胞株。方法通过总RNA提取、经RT-PCR得到Bama小型猪CYP3A29的基因,并将此基因克隆至亚克隆载体PMD18-T上得到重组质粒pMD-3A29;以测序正确的重组质粒pMD-3A29为模板,采用PCR扩增CYP3A29基因并在其3′添加组氨酸标签,扩增产物经BamHI/XhoI双酶切,将带有组氨酸标签的CYP3A29基因定向克隆至pcDNA3.1(+)中,并测序验证;将测序正确的CYP3A29基因通过脂质体转染至HepG2细胞,G418筛选10代,经RT-PCR及Western-blot分析及探针药物硝苯地平对重组细胞进行活性鉴定。结果与HepG2相比,HepG2-CYP3A29细胞株具有极显著的硝苯地平氧化活性。结论成功建立了稳定表达CYP3A29的HepG2细胞株,可用于相关药物代谢研究。