重组腺相关病毒Ⅰ型/大鼠肿瘤坏死因子受体:Fc(rAAVⅠ/ratTNFR:Fc)的构建和在大鼠体内表达的初步研究

目的构建携带大鼠肿瘤坏死因子Ⅱ型受体胞外区和大鼠免疫球蛋白IgG1 Fc段融合基因的重组Ⅰ型腺相关病毒(rAAVⅠ/ratTNFR:Fc),并对该病毒在Lewis大鼠体内的表达和生物学活性进行初步研究,探讨以该重组腺相关病毒载体应用于类风湿关节炎基因治疗的可行性.方法首先以RT-PCR分别从大鼠脾细胞和大鼠淋巴细胞总RNA中扩增出大鼠肿瘤坏死因子Ⅱ型受体胞外区和大鼠免疫球蛋白IgG1 Fc段基因,并以重叠延伸PCR的方法将二者融合后克隆入pSNAVⅠ载体质粒进行重组病毒生产.在获得重组病毒后于Lewis大鼠肌肉注射,于不同时间ELISA测定血清ratTNFR:Fc表达,并以TNF-α细胞毒中和实验测定重组病毒表达产物的生物学活性.结果所构建的重组病毒rAAVⅠ/ratTNFR:Fc基因结构与预期一致;病毒于Lewis大鼠肌肉注射后可表达ratTNFR:Fc蛋白,含有ratTNFR:Fc蛋白的血清可以有效中和大鼠TNF-α对L929细胞的杀伤作用.结论本研究所构建的携带大鼠肿瘤坏死因子Ⅱ型受体胞外区和大鼠免疫球蛋白IgG1 Fc段融合基因的重组Ⅰ型腺相关病毒(rAAVⅠ/ratTNFR:Fc)可以用来作为阻断TNF-α的手段于大鼠类风湿关节炎模型上进行基因治疗研究.     

正交试验法优选镇痛宁浸膏的制备工艺

用正交试验法，以三七皂甙为指标，优选了镇痛要浸的渗漉法提取工艺，通过对实验结果的分析，验证，选择了最适的提取工艺。     

社区糖尿病的健康教育

糖尿病 (DiseaseMellitus,DM)是一种严重危害人体健康的慢性终身性疾病 ,其发病率正以惊人的速度增长。我国糖尿病发病率 80年是 0 6 7% ,86年是 1 2 6 % ,94年是 2 2 8% ,2 0 0 0年全国每分钟发病30 0 0人 ,据预测 2 0 5 0年全世界糖尿病发病率最高的是中国和印度。加强社区糖尿病的健康教育能提高社区人群对糖耐量减低 (IGT)和糖尿病的认知能力 ,有助于降低IGT患者的糖尿病发病率[1] 。1995年世界糖尿病日的主题是糖尿病教育 ,各发达国家早在六七十年代就开始重视糖尿病的社区健康教育工作 ,随着我国人民生活水平的不断提高 ,生活方…     

微机预测茶碱血药浓度及个体给药的研究

目的：用一次茶碱血药浓度值来预测慢性阻塞性肺疾病（ＣＯＰＤ）患者口服氨茶碱后任何时间体内茶碱的血药水平，并提供茶碱的个体给药方案。方法：应用药代动力学原理，并由计算机协助处理，建立起ＣＯＰＤ患者群体药动学模型。在此基础上，提出以个体因素与经验公式判断药动学参数初值，代替Ｂａｙｅｓｉａｎ公式中的预估值。结果：通过该模型实现了茶碱血药浓度的预测，并建立个体给药方案。经３０例ＣＯＰＤ患者临床验证，茶碱血     

青年人胃癌的临床处理

本文收集1987～1992年在本科行手术治疗并在术后行综合治疗的35岁以下青年人胃癌29例，现报告如下。材料和方法收治的青年人胃癌29例，占同期收治病人的4．33％（29／670）。男12例，女17例，平均年龄31．48岁（25～35岁）。病程1个月～3年，平均9．2个月。上腹部疼痛不适82％，黑便28％，呕吐24％，贫血55．l％。治疗：29例中19例行RZ、R3根治术，2例行姑息性手术，手术切除率72．4％（ZI／29）。余仅行探查术或捷径手术。本组无围手术期死亡患者。2例女性术中发现卵巢占位，同时行双侧卵巢切除。经病理证实为库根勃格氏瘤，分别存活15个…     

连续性血液净化辅助治疗重症急性胰腺炎疗效分析

目的观察重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）在常规治疗基础上进行连续性血液净化（continuous blood purification,CBP）治疗的效果。方法选择我院ICU中明确诊断为重症急性胰腺炎的患者55例,以行常规治疗的患者30例为对照组,在常规治疗基础上进行连续性血液净化治疗的患者25例为观察组,比较两组治疗72h后APACHEII评分、胰腺CT积分及各种血清生化指标变化情况。结果治疗72h后,与对照组比较,观察组患者APACHEⅡ评分、白细胞、血清淀粉酶、尿素氮、肌酐、C-反应蛋白、总胆红素均明显改善,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论连续性血液净化治疗可早期纠正SAP患者的全身炎症反应,改善全身状况,防止并发症的发生,能有效缓解病情。     

生物反馈治疗抽动秽语综合征临床观察

为了探讨生物反馈技术在抽动秽语综合征治疗中的作用，本文以５０名门诊患儿随机分为治疗组（３２例）和对照组（１８例），两组均口服中低剂量的氯哌啶醇（平均２．１±０．３ｍｇ／日），治疗组配合使用肌电型生物反馈仪，１５天后进行疗效评价和对比。结果显示治疗组的疗效较对照组好，有显著性差异；同时提示由于小年龄组配合较差，难以采用生物反馈疗法；在生物反馈治疗过程中，要重视家庭中的巩固训练。     

三维超声波诊断子宫异常的临床价值分析

目的：研究子宫异常运用三维超声诊断的临床价值。方法：我院选择2012年8月-2014年8月间诊治的180例由于子宫异常出血、不孕等疾病到医院就诊的患者,分别对患者进行二维、三维超声检查,比较两种检查方法的准确率、检查时间以及影像效果等等。结果：本文通过对中检查方法进行比较,三维超声的准确率更高,超声波时间段,同时检查时能够通过三个切面进行观察,效果明显优于二维超声。三维超声检查的特异性、敏感度以及精确度全部能够达到100％,但是二维超声只能达到90％,70％,86．2％,特别是先天性子宫畸形的精确度,三维超声能够达到100％,而二维超声只能达到28．6％。结论：子宫异常患者运用三维超声波诊断的准确率更高,临床价值显著。     

全科团队式管理对社区脑卒中患者康复效果的影响

目的探讨全科团队式管理对社区脑卒中患者康复效果的影响。方法116例脑卒中患者采用随机数字表法分为干预组（56例）和对照组（60例）,对照组进行常规社区随访和治疗,干预组患者实施全科团队式管理。分别于治疗前和治疗1年后进行一般状况调查表、汉密尔顿抑郁量表（HAMD）、功能综合评定量表（FCA）的测试。结果干预后,干预组的HAMD总分变化值较对照组明显减低,差异有统计学意义（t=6．97,P=0．000〈0．05）;干预组患者的自我照料能力、运动功能总分、社会认知能力、认知能力总分及FCA总分均明显高于对照组,差异有统计学意义（t=禾08、5．89、8．16、4．50、8．90,均P〈0．05）。结论将脑卒中患者引入全科团队式管理服务模式,有利于提高脑卒中患者的整体康复水平。     

反转录病毒介导基质金属蛋白酶特异性组织抑制剂1基因转染骨髓间充质干细胞的成骨能力

背景：间充质干细胞成骨分化早期是成骨性细胞外基质细胞外间质的堆积,其主要成分均是基质金属蛋白酶特异性组织抑制剂1(tissue Inhibitor of Metalloproteinases 1,TIMP-1)作用的基质金属蛋白酶作用底物,通过增加TIMP-1的表达,是否可以抑制基质金属蛋白酶的活性,进而影响间充质干细胞的成骨分化能力？ 目的：观察反转录病毒介导TIMP-1基因转染骨髓间充质干细胞的成骨能力。 方法：设计In-Fusion引物扩增TIMP-1基因片段,与酶切后线性化的pBABE-Puro反转录病毒表达载体进行位点同源重组,构建TIMP-1基因反转录病毒表达载体,RT-PCR和测序验证,并使用GP-293细胞进行包装。通过密度梯度法分离人下颌骨来源骨髓间充质干细胞,流式细胞仪验证其表面标记。将TIMP-1反转录病毒包装液感染骨髓间充质干细胞并筛选稳定表达TIMP-1细胞株,RT-PCR和蛋白电泳验证其表达,并使用成骨诱导液诱导10 d,观察其对成骨能力的影响,RT-PCR验证其成骨相关基因的表达。 结果与结论：经测序证实,RT-PCR所获得的TIMP-1基因 cDNA 序列与NM_003254.2(624 bp)序列完全一致;通过表面标记鉴定证实成功分离了人骨髓间充质干细胞,并具良好的成骨、成脂能力;RT-PCR和Western Blot验证反转录病毒载体成功介导TIMP-1转染骨髓间充质干细胞,RT-PCR表明成骨诱导10 d时,TIMP-1基因感染组成骨增加,RUNX-2和COL1 mRNA表达增加。提示TIMP-1基因可通过反转录病毒成功转染人骨髓间充质干细胞,并能促进其成骨。