一阶导数分光光度法测定灭滴灵栓的含量

 采用一阶导数分光光度法测定灭滴灵栓的含量，克服了非水溶媒滴定法国温热萃取溶剂的刺激性和腐蚀性，操作简便、快速，结果准确。平均回收率为101．1％±0．66％，RSD为0．65％（n＝6）。     

远红外热像变化可作为针刺治疗急性周围性面瘫的评价指标

背景：以往实验构建了针刺加远红外热像治疗面瘫,并已证明无论何种证候的面瘫,皆可采用针刺加远红外热像治疗,可明显缩短病程,治愈率高,无任何后遗症。但尚未了解应用远红外热像判断软组织供血状态从而评价病程变化的效果。 目的：动态监测急性周围性面瘫患者针刺治疗前后头面部远红外热像的改变。 方法：正常对照组为接受健康体检者40例,病例组为临床诊断为急性周围性面瘫的患者40例。应用重庆伟联公司生产ATIR-M301B非制冷焦平面医用远红外热像仪(热敏度为0.05 ℃),在环境温度为20~25 ℃的检查室中,采取头、面部远红外热图。采用本机提供的分析软件,分别比较同一受检者针刺治疗前后头面部左、右两侧面颊、内眦、眶上、额及舌区等5个测温区远红外热像的温度差,并行统计学分析。 结果与结论：正常组头面部远红外热像显示面颊、内眦、眶上、额部及舌区5个测温区左、右两侧的温度差异无显著性意义(P > 0.05) 。远红外热像可较好地反映急性周围性面瘫患者针刺治疗前后头面部供血状态的变化,针刺治疗前急性期面瘫侧呈充血性改变,患侧面颊、内眦、眶上、额及舌区5个测温区温度明显高于健侧(P < 0.05~0.001)。针刺治疗后头面部远红外热像显示面颊、内眦、眶上、额部及舌区5个测温区左、右两侧的温度无明显差异(P > 0.05)。表明远红外热像可为临床诊断和治疗急性周围性面瘫提供无创的客观评价指标。 关键词：远红外热像;急性周围性面瘫;针刺疗法;疗效分析;评价指标     

海藻酸钙微球与海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊包裹对不同种类细胞生长的影响

目的：观察海藻酸钙微球或海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊包裹对不同特性细胞生长的影响。方法：实验于2004-04／2005-04在解放军总医院老年医学研究所细胞生物学研究室完成。细胞：牛肾上腺嗜铬细胞、Swiss小鼠胚胎成纤维细胞株（3T3）、人早幼粒白血病细胞株。仪器和试剂：加拿大Sun氏静电微囊发生仪；体视显微镜；海藻酸钠，聚赖氨酸、氯化钙、柠檬酸钠。制备海藻酸钙微球和海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊，分别用其包裹3T3细胞、牛肾上腺嗜铬细胞及人早幼粒白血病细胞。按照细胞的不同及包裹材料的不同，分为裸细胞组、海藻酸钙微球组、海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊组。在光镜下观察体外培养的微球、微囊及细胞的形态、存活率、增殖率。细胞增殖率=培养后细胞数-培养前细胞数／培养前细胞数&;#215;100％。结果：光镜下见包裹后即刻海藻酸钙微球和海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊呈大小均一的半透明圆球，直径150-300μm，表面光滑。培养24h时，牛肾上腺嗜铬细胞、3T3或人早幼粒白血病细胞均呈单个细胞，均匀分散于微球或微囊内。培养120h时，牛肾上腺嗜铬细胞、3T3和人早幼粒白血病细胞在海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊内聚集成团块，而在海藻酸钙微球内仍呈单个细胞散在分布。①海藻酸钙微球或海藻酸钙～聚赖氨酸-海藻酸钙微囊内高增殖活性的3T3或人早幼粒白血病细胞的存活率显著高于牛肾上腺嗜铬细胞（74．38&;#177;7．72，89D8&;#177;3．05，87．48&;#177;3．43，92．40&;#177;7．56，72．67&;#177;2．08，89．33&;#177;5．13，P〈0．01）；海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊内细胞存活率均显著高于海藻酸钙微球内同一种细胞的存活率（87．88&;#177;38,89．08&;#177;3．05，89．63&;#177;5．55，85．33&;#177;4．86,92．40&;#177;7．56，95．08&;#177;3．81，83．67&;#177;5．51，89．33&;#177;5．13，85．33&;#177;2．08，P〈0．01）。②在不同状态下，培养72和120h时，人早幼粒白血病细胞或3T3细胞的增殖率存在差异，海藻酸钙微球或海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊内同种细胞的增殖率显著高于裸细胞组（2．54&;#177;0.55,5：20&;#177;2．38,2．30&;#177;0．70,2．26&;#177;0．83，3．89&;#177;1．89，13．37&;#177;16．14，P〈0．05）；而在不同状态下牛肾上腺嗜铬细胞的增殖率差异无显著性（P〉0．05）。③在相同状态下，培养72和120h时，人早幼粒白血病细胞增殖率明显高于3T3或牛肾上腺嗜铬细胞（18．66&;#177;7．76，39．11&;#177;16．06，P〈0.01）；而3T3与牛肾上腺嗜铬细胞的增殖率差异无显著性（P〉0．05）。④对同一种细胞，培养24，72和120h时，海藻酸钙微球与海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊相比，其细胞的增殖率差异均无显著性（P〉0．05）。结论：在培养条件下，海藻酸钙微球或海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊包裹似更利于该3种细胞的生长；海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊包裹较海藻酸钙微球包裹更利于同种细胞的生长。     

AR-GFP融合基因真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达

目的：构建由绿色荧光蛋白（GFP）标记的人醛糖还原酶（AR）融合基因真核表达载体并在HEK293细胞中表达。 方法:应用DNA重组技术构建AR与GFP的融合基因（AR-GFP），将AR-GFP插入pcDNA3.1/myc-HisA真核表达载体中，通过磷酸钙共沉淀转染HEK293细胞，倒置荧光显微镜评价转染效率，Western blotting 技术检测AR基因在转染细胞中的整合及表达，分光光度法（UV法）测定AR表达活性，用公认的AR抑制剂（ARI）反证活性AR的存在。结果:荧光显微镜对转染细胞的观察及Western blotting 结果证实AR-GFP融合蛋白在HEK293细胞中表达，UV法测活、ARI抑制试验均未证实其生物学活性。 结论:转染的HEK293细胞可成功地表达AR-GFP融合蛋白，但不能成为ARI真核细胞筛选模型。     

我国汉族妇女维生素D 受体基因多态性和骨质疏松关系的研究

旨在探讨维生素D受体 (VDR)基因多态性与骨质疏松的关系 ,采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性技术对 162例健康汉族中老年妇女和 17例骨质疏松患者的VDR基因进行分型 ,并计算其基因频率分布。结果 :正常对照组VDR基因bb、Bb、BB基因型分别为 91.36%、8.64%、0 % ;骨质疏松组分别为 82 .35%、17.65%、0 % ,两组各型均无显著性差异。VDR基因多态性具有种族差异性 ,就目前调查例数而言 ,我国汉族人骨质疏松与BB基因型无明显相关性。     

携带SV40T/HSV-tk基因永生化正常成人肝细胞的构建

目的构建永生化正常成人肝细胞为生物型人工肝提供安全有效的人肝细胞源。方法转染包装细胞,获得逆转录病毒;将该病毒感染正常成人肝细胞HL-7702;更昔洛韦毒性实验检测转染后肝细胞内HSV-tk基因;RT-PCR法检测转染后细胞内SV40T的mRNA;Western Blot法和免疫荧光染色检测转染后细胞内SV40T基因的蛋白表达。结果更昔洛韦检测转染后的肝细胞存活良好,而转染前的肝细胞死亡。RT-PCR法显示转染后的肝细胞内存在SV40T mRNA;Western Blot法和免疫荧光染色法显示转染后肝细胞内存在SV40T蛋白。结论转染后的正常成人肝细胞中含有SV40T和HSV-tk基因,并表达相关蛋白。     

体外培养APA微囊化肿瘤坏死因子α/293细胞对结肠癌细胞增殖的影响

背景：积极探索结肠癌相关基因及抑癌基因已成为新的研究热点,人肿瘤坏死因子α是一个重要的促炎因子和免疫调节因子,对肿瘤的免疫治疗具有一定的疗效。 目的：观察体外培养海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(alginate-polylysine-alginate,APA)微囊化肿瘤坏死因子α/293细胞对结肠癌细胞增殖的影响。 方法：采用前期建立的制备方法,用APA微囊分别包裹人肿瘤坏死因子α/293细胞,APA微囊化0/293细胞。取对数生长期结肠癌(Lovo)细胞,配制成所需浓度的细胞悬液,接种24孔板培养,分别加入低、中、高剂量稳定转染的APA微囊化肿瘤坏死因子α/293,即分为5个实验组,APA微囊化肿瘤坏死因子α/293细胞低剂量组、中剂量组、高剂量组、阴性组为APA微囊化0/293细胞组,阳性组加入肿瘤坏死因子α,MTT法检测490 nm吸光度;通过对人肿瘤细胞增殖抑制实验,观察对结肠癌细胞(Lovo)增殖的抑制作用。 结果与结论：体外培养中,加入APA微囊化0/293细胞组对结肠癌细胞增殖无抑制作用;而APA微囊化肿瘤坏死因子α/293细胞中、高剂量组和阳性组,在24,48,72 h的A值低于APA微囊化0/293细胞组(P < 0.05),提示APA微囊化人肿瘤坏死因子α/293细胞所分泌肿瘤坏死因子α对结肠癌细胞有增殖抑制效应,均呈现出良好的数量依赖关系。     

31例脊髓拴系综合征患者的远红外热像特征分析

目的分析脊髓拴系综合征患者的远红外热像特征。方法我院诊断出的脊髓拴系综合征患者31例,暴露检查部位,应用ATIR-M301B非制冷焦平面远红外热像仪,采取不同部位远红外热图,测量远红外热像图中同部位两侧的温度差,并进行统计学分析。结果脊髓拴系综合征患者检测部位的远红外热像显示,双下肢远红外热像图呈左右不对称分布,主要呈缺血性改变。肌肉萎缩的下肢呈低温改变,腰骶部脂肪沉积的呈低温改变;足部溃疡处呈高温改变;既往曾行手术的瘢痕处呈高温改变。红外热像检查结果与患者主诉和主要异常体征检查基本一致。结论远红外热像检查能较好的反映出脊髓拴系综合征患者身体相应部位的异常温度变化,为临床诊治该类疾病提供功能学影像依据,是对CT和MRI及超声等组织形态学影像技术的重要补充。