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81.
目的研究超声激活血卟啉对卵巢癌细胞抑制的体外效应。方法应用一定强度的超声激活血卟啉,采用四甲基偶氮唑蓝法、克隆形成率方法检测抑制卵巢癌细胞的作用,并用显微镜观察处理后细胞形态的变化,流式细胞术检测细胞凋亡。结果超声激活血卟啉对抑制细胞生长有明显作用(P<0.05),且随着血卟啉浓度的升高,抑制作用明显增强(P<0.05)。同时,超声激活血卟啉的效应与超声辐照时间有关。结论声动力处理抑制细胞生长作用明显,并可以诱导凋亡。 相似文献
82.
目的:Rb94基因转染裸鼠肺腺癌皮下移植瘤,观察Rb94基因对人肺腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用及对鞘氨醇激酶(sphingosine kinase ,SphK)表达的影响。方法:收集一定数量的对数生长期A549 细胞,生理盐水重悬后每只裸鼠右后肢皮下接种5 × 106/0.1mL A549 细胞悬液,待瘤体生长至一定体积后随机分为4 组,分别为对照组、空载体组、脂质体组、转染Rb94基因组;每组裸鼠瘤体内分别注射PBS 、质粒pIRES 、脂质体(lipofectamine)、质粒pIRES-Rb94,观察肿瘤生长情况并检测抑瘤率;裸鼠脱颈处死后,采用Western bolt法检测瘤组织中Rb94基因表达情况,并采用实时RT-PCR 和免疫荧光法(immunofluorescence,IF )观察其对裸鼠肺腺癌皮下移植瘤中SphK表达的影响。结果:对照组及转染组裸鼠在接种部位均有移植瘤生成;与空白对照组、脂质体组、空载体组相比,转染Rb94 基因组的裸鼠移植瘤的生长速度明显减慢,肿瘤的体积较小,重量较轻,有显著性差异(P<0.05),而3 个对照组之间,无显著性差异(P>0.05);空白对照组、空载体组、脂质体组抑瘤率分别为0、11.78% 、7.86% ,而转染Rb94基因组平均抑瘤率高达51.99% ,肿瘤生长明显抑制;SphK1 在mRNA 和蛋白水平表达下调而SphK2 表达上调。结论:Rb94基因成功转染裸鼠肺腺癌皮下移植瘤;Rb94基因抑制裸鼠皮下肿瘤生长;Rb94基因抑制SphK1 的表达,增强SphK2 的表达。 相似文献
83.
利用RNAi技术抑制Bcl 2基因表达增强肺腺癌A549细胞放射敏感性 总被引:1,自引:0,他引:1
目的利用RNAi技术抑制Bcl 2基因的表达,观察其对肺腺癌A549细胞凋亡和放射敏感性变化的影响。方法构建Bcl 2基因的干扰质粒pBcl 2 siRNA,稳定转染人肺腺癌A549细胞,同时设立转染无意义链组、空载体组和未转染组。采用Real time RT PCR和Western blot方法, 观察Bcl 2基因在mRNA和蛋白水平表达的变化。采用流式细胞术和克隆形成方法,检测RNA干扰对A549细胞放射敏感性的影响。结果成功构建bcl 2 siRNA质粒,转染A549细胞,获得稳定转染细胞株A549/Bcl2 Ins;Bcl 2mRNA、 Bcl 2蛋白表达明显降低;A549/Bcl2 Ins凋亡率[(10.11±0.92)%]明显高于对照组,6Gy X线照射后凋亡率[(28.81±1.10)%]明显高于对照组及未照射组;A549/Bcl2 Ins的D0和Dq值分别为1.399和1.298,明显低于转染无意义序列细胞株A549/Bcl2 Neg(1.695和2.480)、转染空载体细胞株A549/SD (1.706和2.227)和空白对照细胞A549(1.816和2.777)。结论RNAi技术可以有效抑制肺腺癌A549细胞Bcl 2基因的表达,增强A549细胞对X线的放射敏感性。 相似文献
84.
利用裸鼠建立人肝门部胆管癌肝门移植模型 总被引:3,自引:2,他引:1
目的:应用肝门部胆管癌细胞系FRH及组织块法建立裸鼠人肝门部胆管癌肝门移植模型,观察肿瘤局部浸润和远处转移情况.方法:20只裸鼠取上腹部切口,显露肝门部,取裸鼠皮下移植瘤边缘直径约1mm组织块植入肝门部肝实质内.观察裸鼠生命体征的变化,定期处死裸鼠,取血查肝功,取肝门肿瘤、肝脏、胰腺、脾脏、胃肠、肺脏标本福尔马林液固定,苏木素-伊红染色后显微镜下观察,肝门移植瘤电镜观察.结果:20只模型全部建立成功,成瘤率100%,2周左右可触及肝门部有小结节,平均4周出现黄疸,6周左右裸鼠出现明显恶液质.解剖后发现肝门部肿瘤侵及胆囊、肝门血管和腹腔淋巴结.胰腺、脾脏、胃肠、肺脏未见转移灶.结论:肝门部胆管癌肝门移植模型成瘤率高,其转归接近临床,可用于肝门部胆管癌的实验研究. 相似文献
85.
目的:探讨Hela及HHUC细胞系中hTERT启动子的活性及其与hTERT mRNA表达和端粒酶活性之间的关系。方法:将hTERT核心启动子基因转入Hela、HHUC细胞系、人正常皮肤表皮细胞及子宫内膜上皮细胞中,检测细胞系hTERT启动子的活性、hTERT mRNA表达水平及端粒酶活性。分别以HEK293细胞系作为阳性对照,HELF细胞系作为阴性对照。结果:细胞系Hela、HHUC、人正常皮肤表皮细胞及正常子宫内膜上皮细胞中的hTERT启动子活性分别为20.1%、14.9%、0.3%和0.5%;hTERT mRNA相对表达水平分别为0.63、0.51、0和0;端粒酶活性分别为0.393、0.387、0.144和0.152。结论:宫颈癌细胞系及子宫内膜癌细胞系中hTERT启动子活性、hTERT mRNA表达水平和端粒酶活性均特异性增高,而在正常角化细胞及子宫内膜上皮细胞中则被抑制或不表达。hTERT启动子活性水平与hTERT mRNA表达水平和端粒酶活性之间有显著相关性。 相似文献
86.
目的:探讨氟化物对限制性内切酶酶切作用改变的影响。方法:常规方法提取纯化PBR322质粒;将NaF与PBR322质粒37℃共同作用1h,再用限制性内切酶BamH1对PBR322质粒进行酶切3h,同时将NaF作用的PBR322用层析柱纯化后再进行酶切反应;将酶切产物进行电泳,观察结果并拍照。结果:随着NaF浓度的增加,BamH,对PBR322的酶切作用减弱,当加入5mmol/LNaF时,BamH1几乎无酶切活性,而对加入5mmol/LNaF的PBR322用层析柱进行纯化,以除去NaF,再对其进行酶切,可完全切开。而且氟离子可导致酶切片段在电泳中显示拖尾现象。结论:氟化物可抑制限制性内切酶的酶切活性。 相似文献
87.
γ-干扰素对姜黄素抑制人卵巢癌细胞株3AO增殖的影响 总被引:5,自引:0,他引:5
目的 :研究γ 干扰素 (IFN γ)对姜黄素抑制人卵巢癌细胞株 3AO增殖的影响。方法 :采用MTT法计算细胞存活率、Giemsa染色观察细胞形态变化及凋亡情况、流式细胞术检测细胞周期变化。结果 :姜黄素可明显抑制 3AO细胞的生长 ,其半数生长抑制率 (IC50 )约为 1 8.5 μmol/L;姜黄素将肿瘤细胞聚集在S期和G2 /M期并可诱导细胞凋亡。IFN γ与姜黄素联用后 ,使上述作用明显增强 ,与两药单用组相比有统计学差异(P <0 .0 5 )。结论 :IFN γ可协同姜黄素抑制人卵巢癌细胞株 3AO增殖 相似文献
88.
目的:建立人胆囊癌裸鼠皮下瘤模型,并对其生物学特性进行初步观察。方法:培养人胆囊癌细胞系GBC-SD细胞,收集细胞并制备细胞悬液。每只裸鼠于股外侧皮下注射GBC-SD细胞悬液0.2ml(约2×106个细胞),共30只。观察GBC-SD细胞系成瘤率、成瘤时间、肿瘤生长情况及对裸鼠机体状况的影响。解剖观察瘤体情况并行病理切片观察。结果:裸鼠成瘤率为100%,GBC-SD细胞系对高周龄裸鼠亦有致瘤性,成瘤时间为1周左右。裸鼠于注射瘤细胞后约8周出现恶液质,晚期恶液质明显并衰竭死亡。荷瘤生存期平均为20周。结论:GBC-SD人胆囊癌裸鼠皮下瘤模型成瘤率高,GBC-SD细胞系对高周龄裸鼠亦有致瘤性。肿瘤生长速度稳定,易于观察,可作为胆囊癌治疗等研究的良好平台。 相似文献
89.
目的 通过检测4种免疫相关的microRNAs (miR-181a、miR-146a、miR-326和miR-142-3p)在免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中的表达,探讨miRNA在ITP中的作用及意义。方法 采用实时定量PCR(RT-PCR)法,检测34例ITP患者(ITP组)及31例健康人(正常对照组)外周血PBMCs中4种miRNAs的表达水平;改良MAIPA法检测ITP组中22例患者抗血小板自身抗体GPIIb/IIIa、GPIb/IX,分析miRNA与抗血小板自身抗体的关系,以及与血小板计数等临床指标的相关性。结果 ITP组PBMCs中miR-146a、miR-326和miR-142-3p表达水平与正常对照组相比明显降低(P<0.05),miR-146a与miR-326 (r=0.437, P=0.011),miR-146a与miR-181a (r=0.652, P<0.001),miR-326与miR-181a(r=0.745, P<0.001)的表达水平均呈显著正相关,且miR-146a与ITP患者血小板计数呈正相关(r=0.468,P=0.016)。ITP组不同性别间4种miRNAs表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。ITP组中26例患者接受糖皮质激素治疗后,有效组与无效组4种miRNAs表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。GPIb/IX、GPIIb/IIIa单阳性组、双阳性组和双阴性组间miRNAs的表达水平均无显著性差异(P>0.05)。结论 miR-146a、miR-326及miR-142-3p表达异常在ITP的发生和发展中可能发挥了一定的作用。 相似文献
90.
目的 观察人视网膜母细胞瘤基因(Rb94)对裸鼠肺腺癌皮下移植瘤的放射增敏作用及其机制。方法 将40只裸鼠分别皮下接种5×106个A549细胞,当肿瘤长至180mm3时随机分为8组,每组5只,即空白对照组、空白对照+射线组、脂质体组、脂质体+射线组、空载体组、空载体+射线组,每两组分别于肿瘤内注射PBS、脂质体、pIRES。另有转染Rb94基因组、转染Rb94基因+射线组,分别注射pIRES-Rb94。空白对照+射线组、脂质体+射线组、空载体+射线组、转染Rb94基因+射线组裸鼠瘤体内注射后加照一定剂量X线。观察肿瘤生长情况并计算抑瘤率,采用实时RT-PCR和Western bolt法检测瘤组织中Rb94基因的表达,Hoechst染色观察细胞凋亡情况,实时RT-PCR检测hTERT、Bcl-2mRNA的表达,免疫组织化学SP法检测细胞周期阻滞。结果 转染Rb94基因+射线组抑瘤率为95.84%,与转染Rb94基因组和空白对照+射线组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 Rb94基因对裸鼠皮下移植瘤具有明显的抑制作用,联合射线抑瘤效果更好,其作用机制可能与Rb94基因引起细胞凋亡、G2/M期周期阻滞以及下调hTERT、Bcl 2 mRNA的表达有关。 相似文献