PAMAM-D对异种移植用外源基因转染猪精子细胞介导作用的研究

目的:探讨新型纳米材料聚酰胺-胺型树枝状聚合物PAMAM-D对异种移植用外源基因人衰变加速因子(hDAF)转染猪精子细胞的介导作用.方法:制备PAMAM-D/hDAF cDNA复合物,分为0.2、0.4、0.6、0.8和1.0μg组,每组eDNA再按照氮磷比10:1、20:1、40:1分别加入相应剂量PAMAM-D及不加PAMAM-D,对复合物进行酶切和电泳;将复合物与猪精子细胞共孵育后,原位杂交法检测hDAF对猪精子细胞的转染效率.结果:PAMAM-D能阻止PAMAM-D/DNA复合物中DNA的降解;PAMAM-D可以促进猪精子细胞对外源性DNA的摄取,其中0.4和0.6μg组的转染效率高于其他3组,0.4 μg线状质粒加入PAMAM-D(氮磷比20:1)转染率为(47.5±0.2)%,是不加PAMAM-D的167%.结论:以PAMAM-D为载体可以提高外源基因对猪精子细胞的转染效率,有助于外源基因与精子细胞的稳定结合.     

白细胞介素-10与器官移植

白细胞介素 1 0 (IL 1 0 )是近年发现的细胞因子网络中为数不多的抑制性细胞因子 ,主要由TH2细胞产生 ,能够抑制IL 2、IL 1、IFN γ、TNF α等多种细胞因子的合成及活性。越来越多的证据表明器官移植后产生免疫耐受时出现IL 1 0的高表达 ,而移植后发生排异反应时则表现为IL 1 0的低表达。移植后应用IL 1 0或将IL 1 0基因转染移植物能够延长移植物的存活。     

慢性前列腺炎的诊治策略

本文着重复习了慢性前列腺炎的分类,病因,诊断和治疗策略的新进展。     

维持性血透患者T淋巴细胞转化功能下降的机理探讨

尿毒症和维持性血透 (MHD)患者感染和恶性肿瘤的发病率增高 ,细胞免疫功能下降 ,严重威胁尿毒症患者的生命和 MHD患者的长期生存 ,因此 ,探讨其细胞免疫功能降低的机制极为重要。我们对 MHD患者 CD 4 细胞百分数与T淋巴细胞功能的关系进行了实验研究 ,试图为探讨 MHD患者 T淋巴细胞功能下降的机理提供依据。1　材料与方法1 .1　实验对象及分组　　透析组 1 4例 ,男 1 1例 ,女 3例 ,平均年龄38岁。接受 MHD治疗至少 3个月以上。未透析组 1 1例 ,为等待透析治疗的慢性肾衰尿毒症患者 ,男 5例 ,女 6例 ,平均年龄 34岁。正常对照组 1 5…     

20世纪末我国有关前列腺增生、前列腺癌基础研究的重要贡献及治疗概况

主要是我国学者有特点的研究成果。 我国前列腺癌的发病率是美国的1/20,但潜伏癌(尸检)的发现率,则稍低于美国,超过50岁的男性,是30％,又发现这个结果与饮食有关,黄豆类食品(包括豆腐,豆制品)有防癌的作用。根据这个研究,Jack Geller     

c-Ha-ras癌基因反义RNA抑制膀胱癌细胞生长及粘附的研究

目的 研究降低ｃ－Ｈａ－ｒａｓ癌基因表达对膀胱癌细胞生长和粘附的影响。方法 将反义ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因导入膀胱癌细胞系ＴＢＣ－１细胞株，筛选阳性细胞克隆。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交鉴定外源基因整合情况，荧光分光光度法检测ｃ－Ｈａ－ｒａｓ表达，绘制生长曲线，体外检测细胞粘附率。结果 筛选出细胞克隆ＴＢＣ－ｎｅｏ和ＴＢＣ－ａｎｔｉｒａｓ，放射自显影显示只有ＴＢＣ－ａｎｔｉｒａｓ有外源性ｃ－Ｈａ－ｒａｓ杂交带     

包含UI的人衰变加速因子重组基因在转基因鼠高效表达的研究

目的建立血管内皮细胞高效表达人衰变加速因子（hDAF）基因的转基因小鼠。方法采用受精卵显微注射法，将包含杂合内含子（UI）的人hDAF导入昆明白小鼠受精卵的雄原核内，然后将注射后仍健康的受精卵植入假孕母鼠输卵管内，待其自然分娩。应用聚合酶链反应（PCR）和Southern杂交检测G0代小鼠hDAF基因的整合情况，应用流式细胞计数（FCM）检测小鼠外周血单核细胞（PBMCs）表面hDAF的表达，应用逆转录（RT）-PCR检测转基因小鼠心脏、肝脏、肾脏和肺脏人hDAF基因mRNA的表达。结果注射后卵的存活率和幼鼠出生率分别为83．8％（941／1123）和9．5％（89／941），外源基因的整合率为22．5％（20／89），FCM检测发现其中有7只转基因小鼠PBMCs有人hDAF表达，表达强度为人PBMCs的152％～243％，并且相应小鼠的心、肝、肾及肺组织均有人hDAFmRNA表达。结论UI可以使hDAF在转基因鼠各主要脏器高效表达。     

膀胱移行细胞癌差异表达基因的克隆与鉴定

应用抑制消减杂交(ssH)构建膀胱移行细胞癌差异表达的消减文库，再应用Dot blot方法筛选出差异表达的基因，为研究膀胱癌发生、发展提供实验依据。现报告如下。