慢病毒载体介导的RNAi技术构建稳定抑制β-catenin的人鼻咽癌细胞株

目的建立稳定抑制β-catenin基因表达的人鼻咽癌6-10B细胞株,为探讨Wnt/β-catenin信号在鼻咽癌发生中的作用提供细胞模型。方法于β-catenin CTNNB1基因编码区选择3个siRNA靶点合成3对shRNA干扰序列,分别与pLKO.1载体连接,构建pLKO.1-sh-β-catenin质粒(干扰组1)、pLVTHM-sh-β-catenin(干扰组2)和pLKO.1-sh-β-catenin-Neg质粒(阴性对照组);将重组质粒与慢病毒包装质粒共转染293T细胞,收集含慢病毒颗粒的上清液感染人鼻咽癌6-10B细胞,感染pLKO.1-sh-β-catenin和pLKO.1-sh-β-catenin-Neg质粒的细胞经嘌呤霉素筛选并扩大培养后得到稳定克隆株。Western blot检测干扰组β-catenin抑制效率及下游基因c-myc蛋白的表达;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测比较细胞增殖状况,Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移率。结果 Western blot检测结果显示pLKO.1-sh-β-catenin(干扰组1)干扰效率最佳,β-catenin及c-myc蛋白表达减少;MTT检测显示干扰β-catenin后细胞吸光度下降,细胞增殖受到抑制;穿过Transwell小室底膜的细胞数:干扰组1为(23.5±4.6)个,明显低于阴性对照组(50.3±5.3,P<0.01)及空白对照组(54.3±5.6,P<0.01)。结论成功构建了β-catenin shRNA慢病毒表达载体,建立了稳定抑制β-catenin基因表达的人鼻咽癌6-10B细胞株,为进一步研究以β-catenin为靶点的鼻咽癌基因治疗奠定基础。     

志愿者行记(六)

5月25日 回到医疗点上，输液的人已经坐满了帐篷，独不见黄队长的影子，感觉医疗点上很安静，李姐在收拾着地上的杂物，两个老大夫在忙着量血压，不过我发现那只血压表的指针早已经偏离了0点很远，失去了意义，有很多病人都是来看皮肤病的，包括一些军人，他们多数是因为脚烂，脱下鞋来脚趾缝被泡成白色的表皮绽着血口，我想第一次世界大战时所描述的军人“战壕足”，     

腹腔镜联合胆道镜下胆总管切开取石25例手术配合

2007年1月～2009年7月,我们为25例胆总管结石患者行腹腔镜联合胆道镜下胆总管切开取石术,经精心护理,效果满意.现报告如下. 1资料与方法 1.1临床资料 25例患者术前检查均为明确的胆总管结石,无胆道狭窄、肿瘤的存在,不合并二级胆管以上肝内胆管结石.平均手术时间为1.5 h,术后患者切口感染2例,胆瘘3例(经腹腔引流后治愈).     

篮球运动中助跑单脚起跳对髋关节造成损伤的生物力学分析

助跑单脚起跳属于速度-力量型运动,速度素质和爆发性用力的能力对跳跃起着决定性的作用.助跑单脚起跳技术包括:起跳脚着地支撑、缓冲阶段,再到蹬伸离地.而髋关节的最大力量决定着着地支撑技术的稳定性,决定了起跳效果的好坏,同时此部位也较容易发生损伤,所以本实验以篮球运动的三步上篮最后一步的单脚起跳为例,通过等速肌力测试着重对起跳腿髋关节肌群作评定,从而进一步探讨经常助跑单脚起跳篮球运动员容易造成髋关节损伤的机理进行生物力学分析.     

东菱精纯克栓酶治疗TIAs的TCD观察

目的应用经颅多普勒(TCD)技术观察东菱精纯克栓酶(DF-521)治疗频发的短暂性脑缺血发作(TIAs)的疗效。方法100例TIAs住院患者随机分为DF-521治疗组(50例)和川芎嗪-阿司匹林对照组(50例)。应用TCD技术,分别观察两组血流动力学变化,并进行对比研究。结果治疗组的血流动力学变化明显优于对照组(P<0.01),停止发作时间早于对照组。结论DF-521治疗TIAs起效快、效果好、安全性高。应用TCD技术,为指导临床和评估疗效提供了有力的依据。     

30 h睡眠剥夺条件下睡眠惯性期间情绪评价研究

目的探讨睡眠惯性期间情绪主观评价及随时间变化情况。方法30h睡眠剥夺后,小睡组从14:00唤醒即刻开始测试,随后每30min测试1次,共5个时间点;非小睡组也在相同的时间点测试。采用情绪评价量表(POMS)和视觉类别问卷(VAS)评价。结果在睡眠惯性期间,POMS与基线值比较,V、F各时间点得分以及D的前两个时间点得分差异均有显著性(P<0.001,P<0.05)。VAS在“警觉性”、“精力充沛的”、“思睡的”项目评分中,两组测试得分几乎与基线值差异均有显著性。对小睡组和无小睡组不同指标各时间点测值进行重复测量统计分析,结果显示除POMS中A(E5.55=0.557),VAS中“易怒的”(E5.50=2.008),多话的(E5.50=2.027),其余指标各时间点间差异有显著性,两组间差异无显著性。结论30h睡眠剥夺后,1h小睡后的主观自评得分变化趋势和情绪正性自评好于无小睡组。     

腹茧症5例临床分析

目的 了解腹茧症的临床表现特征及手术探查中的特异性表现，认识其诊断难度，探讨手术方法。方法 总结2000年3月至2005年4月我院收治的5例腹茧症病人，其中女3例，男2例，术前均未明确诊断或发生误诊；其中2例术前诊断为阑尾炎，2例术前诊断为肠梗阻，1例术前诊断为下腹部混合性包块；5例均行手术治疗，采用包膜切除局部小肠松解及阑尾切除。结果 5例均达到临床缓解，随诊至目前均无临床症状复发。结论 腹茧症术前诊断困难，大多不能明确诊断；术前影像学检查虽有一定特异性但受诸多因素制约。建议手术采取较为保守的包膜切除及小肠松解手术可收到良好的治疗效果，手术常规切除阑尾。     

C-erbB-2、Bcl-2、MDR-1在食管癌中的表达及临床意义

目的　研究C -erbB - 2、Bcl- 2、MDR - 1在食管癌中的表达及临床意义。方法　应用免疫组化法 ,检测 5 0例食管癌组织及癌旁粘膜组织中C -erbB - 2、Bcl- 2、MDR - 1的表达水平。结果　在食管癌中C -erbB - 2、Bcl- 2、MDR - 1表达阳性率分别为 5 4 0 %、44 0 %、2 8 0 %,均呈高表达 ,与病理分级、浸润深度、淋巴结转移关系密切 ,P <0 0 5。结论　C -erbB - 2、Bcl- 2、MDR - 1与食管癌的发生发展关系密切 ,C-erbB - 2、Bcl- 2可能是食管癌预后的重要生物学指标。     

电刀包皮环切改良缝合术98例的治疗体会

我科对98例需行包皮手术患者采用电刀包皮环切改良缝合术，取得了较好疗效，现报告如下。 1临床资料 1．1一般资料 98例患者均为男性，10岁以下12例，占12．2％；10～20岁43例，占43．8％；20～30岁31例，占31．7％；30～40岁8例，占8．2％；40岁以上4例，占4．1％。一期愈合95例，占96．9％；轻度感染6例，占3．1％。     

托吡酯多中心开放性治疗老年癫痫的临床观察

目的 研究单用或加用托吡酯治疗老年癫痫患者的疗效和不良事件.方法 在一项托吡酯治疗癫痫的多中心开放实验中.对全国52家医院门诊病例的119例60岁以上的老年癫痫患者疗效进行分析.剂量采用8周加量期到200 mg/d,接着是12周的稳定期,治疗期间每月随访一次.结果 稳定期结束后,119例患者中有106例(89.1%)发作减少超过50%.119例患者中65例单用托吡酯治疗.有效率为93.8%,54例合并用药,有效率为83.8%.各种类型癫痫患者单用或加用托吡酯治疗后,发作完全控制的患者的例数均超过50%.单用或加用托吡酯治疗病程分别为小于1年、1～3年、4～6年、大于6年的患者的发作减少频数分别为92.86%、91.67%、100%、94.44%和80.00%、85.71%、70.00%、86.36%.合并用卡马西平、丙戊酸钠、苯妥英钠、苯巴比妥、安定的患者总有效率分别为:79.41%、87.50%、85.71%、0%、80%.单用托吡酯治疗老年患者副作用程度较轻.结论 托吡酯无论单用或加用治疗老年癫痫患者,在稳定期结束后发作次数均明显减少,单用副作用程度较轻.不同的发作类型、基础病程、加用药物对疗效无明显影响.