自噬抑制联合吉非替尼对MDA-MB-468细胞敏感性的影响

目的 自噬是细胞内的一种溶酶体降解过程,通过降解损伤的蛋白以及衰老的细胞器来维持细胞稳态,也是肿瘤治疗耐药性产生的原因之一.本实验探讨自噬抑制剂联合吉非替尼(gefitinib,GE)对人三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC) MDA-MB-468细胞敏感性的影响.方法 常规复苏、传代培养MDA-MB-468细胞,待细胞处于对数生长期后分别以GE单药或联合自噬抑制剂3-methyladenine(3MA)或联合bafilomycin A1 (BAF)处理细胞.MTT比色法检测细胞相对增殖率,克隆形成实验检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白的表达.结果 自噬抑制剂明显增加GE的细胞毒性,MTT比色法检测GE联合3MA、BAF处理MDA-MB-468细胞48 h后半抑制率(IC50)分别为(4.1±0.2)和(3.8±0.3)μmol/L,显著低于单用GE组的(7.0±0.2) μmol/L,Z=-2.611,P＜0.017.克隆形成实验显示,GE与自噬抑制剂联合3MA、BAF克隆形成率分别为(29.85±5.54)％和(33.58±6.31)％,显著低于单用GE组(63.46±8.32)％,Z=-2.309,P＜0.017.细胞凋亡的研究显示,自噬抑制可促进细胞凋亡,GE联合3MA、BAF后,凋亡率分别为(23.37士2.71)％、(18.71±2.81)％,高于单用GE组(12.43±3.18)％,Z=-2.309,P＜0.017.蛋白质印迹法检测结果显示,GE处理诱导自噬增加,自噬抑制剂联合GE后,MDA-MB-468细胞Cleaved Caspase-9和Cleaved Caspase-3蛋白的活性增加.结论 自噬抑制可增加MDA-MB-468细胞对GE的敏感性,自噬抑制剂联合GE可能通过启动Caspase级联反应促进MDA-MB-468细胞凋亡.     

肝癌介入治疗并发胃穿孔1例护理体会

介入放射治疗是治疗晚期肝癌的有效手段,具有易操作,损伤性小,患者易接受等优点,但存在引起急性胃粘膜病变的危险,现就我科１例介入治疗并发胃穿孔的护理体会介绍如下。１病例简介患者,男,６６岁,因右上腹胀痛不适３个月,伴纳差、乏力而就诊。经Ｂ超、ＣＴ检查诊...     

中心静脉导管在引流中的应用体会

癌症患者中晚期会不同程度地出现胸腹腔积液或心包积液,为了改善癌状,减轻痛苦,常需要穿刺放液,传统的穿刺引流是多次重复穿刺,这样不仪会增加病人的痛苦,而且会引起多种并发症,我科自1998年1月～2000年4月应川中心静脉导管穿刺引流,收到满意效果,现将体会介绍如下。     

中心静脉导管在引流中的应用体会

癌症患者中晚期会不同程度地出现胸腹腔积液或心包积液,为了改善症状,减轻痛苦,常需要穿刺放液,传统的穿刺引流是多次重复穿刺,这样不仅会增加病人的痛苦,而且会引起多种并发症,我科自1998年1月～2000年4月应用中心静脉导管穿刺引流,收到满意效果,现将体会介绍如下.     

服用牛黄解毒片勿超过1周

牛黄解毒片是一种祛火药,许多人只要有牙疼、头痛的症状就自行服用;有些爱美女性开辟新用途--利用其泄泻的作用来减肥.     

碘伏配合湿润烧伤膏治疗褥疮的临床观察

目的 探讨碘伏配合湿润烧伤膏治疗溃疡期褥疮的临床疗效。方法 将48例溃疡期褥疮随机分为两组，观察组采用碘伏配合湿润烧伤膏治疗，对照组采用常规换药配合红外线灯照射治疗。结果 观察组及对照组治疗2周后总有效率分别为100％和75％，两组治疗效果对比差异有显著性（X^2=4．76，P〈0．05）。结论 本方法体现了中西医结合的优越性，操作简便、价格低廉，值得在临床或家庭中广泛推广使用。     

延续护理对社区居家脑卒中吞咽障碍患者康复的影响

目的：探讨延续护理对居家脑卒中吞咽障碍患者的影响。方法将65例出院后仍伴有吞咽功能障碍的脑卒中患者按出院顺序分为干预组（33例）和对照组（32例）,干预组患者实施延续护理干预措施,对照组患者按常规进行出院指导及定期复查,于出院当天及出院6个月评价两组患者吞咽功能及并发症发生情况。结果干预组患者吞咽功能康复总有效率为87.9%优于对照组的65.6%（χ2=4.53,P<0.05）,干预组患者误吸发生率3.0%低于对照组的25.0%（χ2=4.86,P<0.05）,干预组患者吸入性肺炎发生率为0低于对照组的18.8%（χ2=4.76,P<0.05）。结论延续护理可以明显改善患者的吞咽功能,减少并发症的发生,值得临床推广应用。     

内质网应激PERK途径在高糖诱导血管平滑肌细胞向成骨样细胞转化中的作用

目的：研究高糖刺激SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（VSMCs）向成骨样细胞转分化中内质网应激蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）途径的作用。方法原代培养VSMCs,分为正常对照组（5mmol/L D-葡萄糖）,甘露醇组（5mmol/L D-葡萄糖＋25mmol/L甘露醇）,高糖组（30mmol/L D-葡萄糖）,高糖＋PERK-小干扰RNA（siRNA）转染组（30mmol/L D-葡萄糖＋PERK-siRNA转染）,高糖＋RNA干扰阴性对照组（30mmol/L D-葡萄糖＋乱序RNA转染）。分别作用48和72h。逆转录-聚合酶链反应及Western blot分别从信使RNA（mRNA）和蛋白质水平检测不同时间点内质网应激相关分子GRP78、PERK、p-PERK、eIF2α、p-eIF2α、ATF4的改变,以及成骨样细胞标志性分子核心转录因子（Cbfα-1）、骨钙素以及平滑肌细胞标志性分子α-SMA的改变情况。应用碱性磷酸酶（ALP）活性检测试剂盒检测ALP的活性。结果与正常对照组和甘露醇组比较,在mRNA水平,高糖组和高糖＋RNA干扰阴性对照组PERK和eIF2α表达升高（P＜0.05）,PERK-siRNA转染后其表达水平均降低（P＜0.05）,在蛋白质水平,PERK、p-PERK、eIF2α、p-eIF2α表达升高（P＜0.05）,PERK-siRNA干预后其表达均降低（P＜0.05）。高糖刺激VSMCs后ALP活性升高（P＜0.05）,PERK-siRNA转染后其表达均降低（P＜0.05）。结论内质网应激PERK途径在高糖诱导VSMCs由收缩表型向成骨样细胞表型转化中发挥作用,抑制PERK途径可以部分阻止这一转化过程。