肺炎支原体抗原量子点免疫层析法的建立及初步应用

目的建立肺炎支原体(Mp)抗原量子点免疫层析的检测方法,初步评价其在临床辅助诊断中的应用价值。方法在偶联剂碳二亚胺EDC和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)作用下,使鼠抗人Mp单克隆抗体(针对P1蛋白)与羧基量子点(CdSe/ZnS)偶联,制备量子点标记抗体包被在玻璃纤维膜上,以另一株Mp单抗(针对P1蛋白)作为捕获抗体包被在硝酸纤维素膜(NC膜)上,建立双抗体夹心量子点免疫层析法检测肺炎支原体抗原。该方法检测130份临床咽拭子标本,并与荧光聚合酶链反应方法相比较。结果经过一系列的反应条件优化,确定偶联剂EDC用量为0.4mg/mL,sulfo-NHS用量为0.58mg/mL,标记抗体浓度1∶100稀释,捕获抗体浓度为0.75mg/mL,反应时间为10min。量子点免疫层析法检测临床标本,阴性符合率为96.4%,阳性符合率为90.0%。结论量子点(CdSe/ZnS)标记免疫层析法检测Mp与荧光聚合酶链反应法具有较好的符合性,该方法操作简便、检测快速、灵敏度高,适用于Mp感染的早期诊断。     

1693例难治性肺炎患儿支气管肺泡灌洗液病原体培养分析

目的了解儿童难治性肺炎患儿感染的病原体及其耐药情况。方法对深圳市儿童医院2008年5月—2014年12月收治的难治性肺炎住院患儿行支气管镜术,并对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行病原体培养及耐药性检测。结果共纳入1 693例难治性肺炎患儿,226例患儿BALF标本培养病原体273株,革兰阳性菌占38.10%(104/273),其中肺炎链球菌71株、金黄色葡萄球菌23株;革兰阴性菌占58.24%(159/273),包括副流感嗜血杆菌44株,肺炎克雷伯菌28株,大肠埃希菌19株,铜绿假单胞菌17株;检出真菌10株,其中8株为白假丝酵母菌。肺炎链球菌对喹诺酮类、头孢曲松和头孢噻肟敏感性较高。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)占金黄色葡萄球菌的26.32%。副流感嗜血杆菌产β-内酰胺酶的菌株占32.72%,肺炎克雷伯菌中产β-内酰胺酶的菌株占62.96%。结论难治性肺炎患儿病原体主要为肺炎链球菌、副流感嗜血杆菌等,经验性治疗应重点覆盖上述病原体,疗效不佳时应考虑耐药可能,并及时根据培养和药敏结果进行目标性治疗。     

儿童临床检验采血中奖赏缓解疼痛和焦虑的性别差异性研究

目的　探讨在儿童临床检验末梢采血中奖赏缓解焦虑和疼痛的性别差异。方法　选取160 例在门诊检验科采血 的患儿,随机分为男童对照组、女童对照组、男童奖赏组和女童奖赏组。对照组采用常规采血流程,无任何干预手段。 奖赏组在采血前被告知进行采血可被奖励卡通贴纸。观察者使用儿童焦虑和疼痛评估量表（children’s anxiety and pain scales,CAPS）和面部疼痛修订评估量表（faces pain scale-revised,FPS）评估患儿采血前及采血时的焦虑水平以及采 血时的疼痛水平。结果　男童对照组采血前和采血时的CAPS 评分高于女童对照组（2.475±1.28,95%CI =2.07~2.89 vs 1.93±1.12,95%CI= 1.57 ～ 2.28;2.65±1.21,95%CI =2.26~3.04 vs 2.08±0.94,95%CI= 1.77~2.38）,差异具有统计学 意义（P ＜ 0.05）。男童对照组采血时的FPS 评分也高于女童对照组（7.18±1.95,95%CI =6.55~7.80 vs 6.28±1.64, 95%CI=5.76~6.81）,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。与对照组相比,卡通贴纸的奖赏显著降低了男童采血时 的CAPS 评分（2.65±1.21,95%CI =2.26~3.04 vs 1.58±0.96,95%CI =1.27~1.88） 和FPS 评分（7.18±1.95,95%CI =6.55~7.80 vs 5.77±1.71,95%CI= 5.22~6.32）,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。但是奖赏不能降低女童的CAPS 评分（2.08±0.94,95%CI= 1.77~2.38 vs 2.13±1.18,95%CI =1.75~2.50）和FPS 评分（6.28±1.64,95%CI =5.76~6.81 vs 6.07±1.90,95%CI =5.46~6.68）,差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。结论　卡通贴纸作为奖赏对缓解不同性别的儿 童采血时的疼痛和焦虑的效果存在差异。     

IgE高亲和力受体MS4A2基因单核苷酸多态性与哮喘气虚体质患儿相关性研究

目的探讨IgE高亲和力受体MS4A2基因外显子及其侧翼区碱基序列单核苷酸多态性与哮喘气虚体质患儿相关性。方法选取58例气虚体质哮喘患儿作为哮喘组,50例健康体检儿童作为实验对照组。提取哮喘组和对照组外周血基因组DNA样本,应用PCR技术扩增MS4A2基因外显子及其侧翼区序列。扩增产物直接测序,确定碱基类型。结果通过测序结果分析,发现三个内含子多态（rsl441586,rs2847663,rs512555）,一个外显子多态（rs569108）。rs569108位点AG基因型频率高于正常对照组（X2=7.938,P=0.0189）。结论rs569108位点AG型多态可能是导致气虚体质患儿哮喘的易感因素。     

深圳地区儿童临床分离的711株肺炎链球菌分布及耐药性分析

目的分析某儿童医院临床分离的肺炎链球菌的分布及其对青霉素与其他12种抗菌药物的耐药情况,指导临床合理用药。方法收集2007年4月-2010年2月新住院及门诊患儿各类标本,经实验室培养、分离,采用VITEK Compact鉴定肺炎链球菌711株;全自动药敏分析系统分析肺炎链球菌对上述抗菌药物的敏感性。结果 711株肺炎链球菌主要分离自痰标本(83.26%),其次为鼻咽拭子(8.86%)及静脉血(4.36%);主要分布在呼吸/消化内科(39.94%)和心血管内科(22.50%)。对青霉素敏感率为15.61%,青霉素不敏感率为84.39%(600株);对红霉素、复方磺胺甲(口恶)唑和阿莫西林的耐药率分别为91.98%、86.32%和31.23%;对万古霉素、利奈唑胺耐药率为0.00%。结论儿童肺炎链球菌耐药情况严峻,必须加强对肺炎链球菌耐药性和抗菌药物使用情况的监测。     

上海市平凉社区人群出生体重与成年后代谢异常

目的　调查不同出生体重儿成年后代谢异常的现患率,探索两者的关系。方法　对上海市平凉社区糖尿病流行病学调查中15 ~74岁有确切出生体重记录的1 010名中国人(男性390例,女性620例)检测体重指数、腰围、臀围、腰臀比、血压、空腹血糖、胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇。以单变量及多变量分析方法观察不同出生体重儿成年后代谢异常的差别及两者的关系。结果　低出生体重者( <2 5kg) 56人,高出生体重者(≥4kg) 53人、正常出生体重者901人。低出生体重组成年后BMI均高于正常出生体重组,其中女性体质指数和腰围、腰臀比两组差异有统计学意义(P<0. 01 )。男性高出生体重组成年后腰围和臀围均较正常出生体重组高,两组差异有统计学意义(P<0 .05);低出生体重组成年后肥胖、高胆固醇血症、糖尿病及糖尿病合并高血压的患病率均高于正常出生体重组(P<0 .05、P<0 .01、P<0 05、P<0. 01),高出生体重组成年后肥胖发生率和高血压患病率均高于正常出生体重组(P<0 .05);低出生体重与成年后超重肥胖、腹型肥胖、高胆固醇血症及糖尿病的发病呈显著性相关。结论　低出生体重与成年后肥胖、糖脂代谢异常相关,是成年后发生超重肥胖、高胆固醇血症和糖尿病的危险因素。     

天灸疗法对支气管哮喘患儿血清中IL-4,IL-6和TGF-α的影响

目的探讨天灸疗法防治小儿支气管哮喘的作用机制。方法通过对支气管哮喘缓解期患儿进行天灸疗法治疗,采用ELISA法检测正常组和治疗组治疗前后血清中IL-4、IL-6和TNF-α的含量。结果天灸疗法能够显著降低支气管哮喘患儿血清中IL-4、IL-6和TNF-α的含量,与治疗前相比具有显著统计学意义(P0.01)。结论天灸疗法可能通过调节支气管哮喘患儿的免疫功能从而防治哮喘的反复发作和发展。     

肠道病毒71型致病机制及检测方法研究进展

正肠道病毒71型(EV71)是引起婴幼儿手足口病的主要病原体之一~([1])。受EV71病毒感染的患者因免疫反应不同会有不同的表现症状,主要为手、足、口、咽峡等处疱疹和发热、皮疹等轻微症状,但部分婴幼儿可能出现中枢神经系统感染及心肌炎等,严重威胁到婴幼儿的健康。因此对EV71致病机制和早期检测的研究十分必要。目前,学者们对EV71的发病机制有一定的认识,但仍然需要进一步探索。EV71感染检测的主要途径有分子生物学检测和血清学检测,各具特色。本文主要对EV71的致病机制和检测方法研究进展作一综述。     

单克隆抗体生产技术的现状与前景

自从Kohler和Milstein于1975年发明杂交瘤技术以来,该技术已广泛应用于医学基础研究,临床诊断治疗及其他科学领域的研究.随着机械化工、计算机学科的发展,单克降抗体(mAb)的生产技术日益丰富.本文对体内外生产mAb的技术及其优缺点作一综述,力图展示近年来mAb技术的最新动态及发展前景.       

A群链球菌抗原快速检测法在儿童A群链球菌感染性疾病诊断中的应用

目的:探讨A群链球菌(GAS)抗原快速检测法在儿童GAS感染中的临床应用价值。方法:收集2015年1月至2019年12月在深圳市儿童医院门诊和住院部就诊的疑为GAS感染的患儿44 733例。采集所有患儿的咽拭子标本,用BinaxNOW Strep A Test试剂进行GAS抗原快速检测,其中有346例患儿的咽拭子先接种...