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51.
目的 探讨一步法多重RT-PCR 对儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)常见4 种融合基因的检测效果。方法 2003 年1 月至2010 年12 月确诊的ALL 患儿76 例,采集所有患儿骨髓标本,提取细胞总RNA,一步法多重RT-PCR 或常规巢式PCR 法对E2A/PBX1、MLL/AF4、BCR/ABL 和TEL/AML1 融合基因进行检测;DNA测序对PCR 结果进行验证。结果 一步法多重RT-PCR 及DNA 测序验证显示76 例ALL 患儿中,TEL/AML1融合基因阳性12 例(产物长度分别为298 bp 9 例,259 bp 3 例), E2A/PBX1 融合基因阳性3 例(产物长度373 bp), BCR/ABL 融合基因阳性1 例(产物长度2124 bp),MLL/AF4 融合基因阳性7 例(产物长度分别为427 bp 1 例,673 bp 6 例),与常规巢式PCR 检出结果一致。结论 一步法多重RT-PCR 可应用于儿童ALL 常见融合基因的检测。 相似文献
53.
目的研究中国人两种常见G6PD基因突变型G1388A和G1376T的酶活性。方法应用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)、变性梯度凝胶电泳(Denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)技术和DNA测序技术确定标本的基因型。通过G6PD/6PGD比值法检测酶活性。结果34例男性G1388A突变组G6PD活性显著高于41例男性G1376T突变组(P<0.01)。结论G1376T突变比G1388A突变更能影响G6PD酶活性,G1376T突变组酶活性较G1388T组更低。 相似文献
54.
目的验证Sysmex-XN3000全自动血细胞分析流水线网织红细胞参数参考区间是否适合于儿科实验室。方法根据ISO 15189:2012《医学实验室质量和能力的要求》和美国病理家协会对实验室质量管理的要求和实验室认可的要求,参照美国临床和实验室标准化协会C28-A3文件推荐方法,对引用厂家试剂说明书的7项网织红细胞参数的参考区间进行实验验证。结果超过90%参考个体的网织红细胞绝对值、低荧光强度网织红细胞百分率、中荧光强度网织红细胞百分率、高荧光强度网织红细胞百分率和未成熟网织红细胞比率检测值落在厂家提供的参考区间以内,超过10%参考个体的网织红细胞百分数和网织红细胞血红蛋白水平检测值落在厂家提供的参考区间以外。结论厂家提供的网织红细胞参考区间不适合于儿科实验室,应自建儿童参考区间。 相似文献
55.
幽门螺杆菌甲硝唑纸片法药敏试验标准化的探索 总被引:4,自引:0,他引:4
幽门螺杆菌(helicobacterpylori,HP)感染是一个严重的世界性问题。由于抗生素的滥用和首次治疗方案选择不当,导致HP耐药菌株增加,根治率下降,因而正确、简便地检测HP药敏试验的重要性日益突出。美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的参考方法———琼脂稀释法,因耗时、费力、成本高,难以在临床推广。我们拟通过甲硝唑对HP纸片法药敏试验条件的标准化,使纸片法药敏试验结果稳定、可靠,为HP的临床用药提供指导。本研究对2株HP标准菌株NCTC116 37、NCTC12 90 8和114株临床分离株,进行纸片扩散法和琼脂稀释法药敏试验,结果显示两者… 相似文献
56.
目的回顾性分析母乳巨细胞病毒(HCMV)DNA阳性的母亲及其婴儿HCMV感染状况。方法 268例母乳HCMV阳性的母亲入选,患儿以肝炎或黄疸为临床诊断者最多见,占39.2%,肺炎次之,占34.0%。应用荧光定量PCR(qPCR)法检测患儿不同标本类型HCMV DNA的表达量,化学发光法检测患儿血清中HCMV特异抗体免疫球蛋白G(IgG)和(或)免疫球蛋白M(IgM)的水平。结果核酸检测中患儿全血阳性者49.8%,尿液阳性者68.1%,两者差异有统计学意义(P=0.000)。同时进行了尿液和全血核酸检测的137例患儿中全血总阳性率46.0%,尿液总阳性率74.5%,两者差异有统计学意义(P=0.000)。有IgG检测结果的病例182例,175例阳性(96.2%);有IgM检测结果的病例194例,88例阳性(45.4%),IgG阳性率和IgM阳性率差异有统计学意义(P=0.000)。结论患儿尿液HCMV DNA的检出率高于全血,提示病原学检测方面尿液标本优于全血。母乳HCMV DNA阳性母亲通过母乳喂养导致婴儿患病的概率为68.1%;根据IgM结果,处于活动性HCMV感染的患儿比例为45.4%。血液IgG阳性率明显高于IgM,提示1岁以内婴儿患HCMV感染的比例很高,但要考虑到胎传抗体的可能。 相似文献
57.
目的:探讨两个原发性肉碱缺乏症家系的临床特点及基因突变位点的检测,分析其中3例患儿的猝死原因。方法回顾性分析两个原发性肉碱缺乏症家系的临床资料,分别对两个家系的先证者行血氨、血乳酸、肝酶、心肌酶测定,血酰基肉碱分析和尿有机酸分析,提示原发性肉碱缺乏症可能,进一步对两家系成员行SLC22A5基因测序分析。结果两个家系先证者游离肉碱及多种酰基肉碱明显低下,死亡患儿在发病前均有发热、呕吐、嗜睡等表现。家系Ⅰ的先证者为c.760C>T( p. R254X)纯合突变,家庭其他成员均为c.760C>T杂合子。患儿死于严重心律失常及心肌病。尸体解剖病理提示部分心肌纤维断裂或呈波浪状排列、肝细胞弥漫性脂肪变性、部分肺泡腔可见中性粒细胞浸润。家系Ⅱ中2例死亡患儿疑似“病毒性心肌炎”。先证者并未发病,但已出现轻微心肌肥厚、血氨增高等,经左卡尼汀治疗后各项指标恢复正常,存在c.760C>T和c.844dupC(p. R282fs)两个杂合突变,分别遗传自父母。结论原发性肉碱缺乏症患儿,在疾病的缓解期无特殊表现,发病急且病情迅速恶化,甚至死亡。家系Ⅰ先证者因全身肉碱缺乏而发生心源性猝死。 c.760C>T纯合突变、c.760C>T和c.844dupC复合杂合突变可能分别是家系Ⅰ和家系Ⅱ发病的分子基础。早期诊断、规范治疗是决定远期预后的关键。 相似文献
58.
目的比较末梢血两种不同采集方式对儿童全血细胞分析结果的影响。方法分别用毛细管吸取和抗凝管刮取两种方式采集两组末梢血标本,每例标本同时用两种不同的血细胞分析仪检测,并进行人工镜检。比较两组标本白细胞散点图出现异常杂点的比例、异常报警的假阳性率及白细胞分类结果的准确性。结果白细胞散点图出现异常杂点的比例,抗凝管刮取组在两种血细胞分析仪中分别为28.06%、31.65%,毛细管吸取组分别为6.42%、5.50%;未成熟细胞、异常/异型淋巴细胞、血小板聚集的异常报警假阳性率,抗凝管刮取组高于毛细管吸取组;白细胞分类结果相对人工镜检分类,抗凝管刮取组的嗜酸细胞、单核细胞分类偏差较大。结论用毛细管方式采集末梢血对血细胞分析结果的影响较抗凝管刮取方式少,更适用于临床。 相似文献
59.
由于对血细胞形态影响最小,EDTA自1993年已被国际血液学标准化委员会(ICSH)认定为血细胞分析的首选抗凝剂,并得到广泛使用,但其偶尔可导致血小板聚集,引起EDTA依赖性假性血小板减少(EDTA-PTCP),致使血细胞分析仪检测时血小板假性减少,若不及时发现,常导致临床误诊误治.现发现1例,报道如下. 相似文献
60.
目的:建立肠道腺病毒(Adv)、诺如病毒G1及G2型(NoV G1和NoV G2)、A组轮状病毒(RV A)、扎如病毒(SV)及星状病毒(HAstV)5种儿童腹泻病毒多重PCR-毛细管电泳法检测体系。方法:针对Adv、NoV G1、NoV G2、RV A、SV及HAstV保守序列设计特异性引物,设计并优化腹泻病毒的多重PCR-毛细管电泳检测体系,琼脂糖凝胶电泳确认扩增片段;进行性能(灵敏度、特异性)评估;收集185例儿童病毒样腹泻样本,采用多重PCR-毛细管电泳体系进行检测,并通过测序验证阳性结果。结果:所设计引物特异性扩增出5种腹泻病毒;多重PCR-毛细管电泳检测体系检出限为102~103 copies/μL,CV均<10%;其他腹泻病原体未出现交叉反应,无明显的非特异杂峰,特异性较好;185例临床病毒样腹泻样本检测阳性132例(71.35%),其中RV A 105例(56.8%)、Adv 22例(11.9%)、SV 15例(8.1%)、NoV G211例(5.9%)和HAstV 10例(5.4%),其中包括双病毒感染样本;毛细管电泳进样量需20μL,3 h内完成全部分析;测序结果与GeneBank比对分析,序列一致。结论:成功建立一种能够快速筛查5种常见儿童腹泻病毒的多重PCR-毛细管电泳检测方法。 相似文献