Celline1000高效快速生产单克隆抗体

从1975年杂交瘤技术发明以来,该技术已广泛应用于医学基础、临床诊断治疗及其它科学领域的研究[1].利用该技术生产的单克隆抗体(mAbs),普遍采用的腹水诱导法,简便、纯度高、生产成本低、周期短,不需要昂贵的设备[2],其不利因素是混杂有小鼠免疫球蛋白、具有反应活性的细胞因子、病原因子,批与批之间mAbs重复性较差.因此近10年来,体外mAbs生产出现了许多较有前景的技术,如旋转瓶培养法、滚动瓶培养法、气体透析袋法、中空纤维柱细胞培养系统、Teconomouse细胞培养系统和微型PERMTM生物反应堆(min PERMTMbioreactor)技术[3,4],Celline 1000便是其中一种适于中规模生产mAbs的装置.笔者用Celline 1000成功生产了抗-B mAbs,收获满意,报道如下.     

深圳儿童医院就诊患儿人芽囊原虫感染情况初步调查

目的初步了解深圳儿童医院就诊患儿人芽囊原虫感染情况,分析儿童感染人芽囊原虫的临床特点,为采取相应的防治措施提供科学依据。方法随机选取2017年10月至2018年3月深圳儿童医院门诊和住院患儿共1 518例,进行粪便镜检,并对镜检发现人芽囊原虫患儿进行临床特点分析。结果检出人芽囊原虫感染者6例,感染率为0.40%,不同年龄、粪便性状、性别之间感染率差异无统计学意义(P均0.05);镜下人芽囊原虫以空泡型为主,繁殖多以二分裂为主,镜下形态易与粪便杂质相混淆;临床症状以腹痛、腹泻为主;治疗方案需结合感染程度、临床症状、免疫功能等因素综合分析。结论深圳儿童医院就诊患儿人芽囊原虫感染率较低。镜检是最简单、快捷、经济的诊断方法,但其形态学识别存在一定的困难,应加强寄生虫形态学培训,提高对人芽囊原虫感染的临床认识。     

深圳市15岁以下儿童HBV感染及抗体水平调查

目的 了解深圳市儿童乙型肝炎(以下简称乙肝)流行和乙肝疫苗接种状况,为制定和调整乙肝疫苗接种策略提供依据.方法 采用时间分辨免疫荧光技术(TRFIA)对4 446名15岁以下儿童进行乙肝两对半定量检测,并对结果进行分析.结果 15岁以下儿童乙肝表面抗原(HbsAg)阳性率为1.21％,其中男孩HBsAg阳性率为1.45％,女孩HBsAg阳性率为0.85％,差异没有统计学意义.HBsAg阳性率0～6岁组为0.85％,13～15岁组为4.80％,差异有统计学意义;乙肝表面抗体(HbsAb)阳性率(≥10 U/L)为85.43％,男孩HBsAb阳性率83.94％,女孩HBsAb阳性率88.42％,性别分布差异有统计学意义.HBsAb水平有随着年龄增加而下降的趋势,TRFIA定量分析抗HBsAb结果＜10 U/L占14.28％,10～100 U/L占33.11％,＞100 U/L占52.61％.结论 年龄越小HBsAg阳性率越低,说明近年该市的乙肝防治效果非常显著,定量测定HBsAb的浓度对于了解儿童对乙肝病毒(HBV)的免疫能力,评价全面免疫的接种效果,及时补种疫苗有重要意义,有47.39％的儿童HBsAb定量值低于100 U/L,需要补种或加强乙肝疫苗,推行乙肝疫苗加强免疫策略应该是今后乙肝防治工作的重点.     

深圳地区学龄前期健康儿童干式化学心肌酶项目参考区间的建立

目的 调查深圳地区学龄前期(3～6周岁)健康儿童VITROS 350天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)的参考区间.方法 通过随机分层抽样募集学龄前期体检儿童,筛选出1 259名健康儿童抽取静脉血,用美国强生VITROS 350干式化学分析仪进行心肌酶项目检测并分析结果.结果 本地区学龄前期健康儿童不同性别血清AST、LDH、CK-MB结果差异无统计学意义(P>0.05),参考区间分别为24～42 U/L、492～805 U/L、18～41 U/L;不同性别血清CK结果差异有统计学意义(P<0.05),男童参考区间为50～224 U/L,女童参考区间为48～199 U/L.结论 建立起本地区学龄前期健康儿童干式化学心肌酶项目的 参考区间.     

某儿童医院2014年8月-12月沙门菌属菌群分布及耐药性分析

目的了解深圳市某儿童医院沙门菌的临床分布及耐药特点。方法通过回顾性调查24878例标本培养结果,分析沙门菌的检出率及其血清分型、临床分布和药敏结果。结果24878例标本中共检出沙门菌128株,以粪便为主要检出标本类型,检出的沙门菌主要分布在B群和D群,以鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌为主,分别占47.66%和30.47%,其次是B群其他血清型和C群沙门菌血清型;感染患儿较高的科室是感染病区;对检出率最高的鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌进行药敏敏感性分析,提示两种不同血清型沙门菌对氨苄西林的敏感性在8.77%-22.86%之间,对三代头孢如头孢曲松和头孢他定的敏感性介于42.86%和61.40%之间,肠炎沙门菌对碳氢酶烯类100%敏感,检出耐亚胺培南鼠伤寒沙门菌血清型。结论鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌是深圳市某儿童医院临床分离的主要沙门菌血清型,且以粪便标本为主,二者对抗菌药物的耐药性普遍较高,故需明确病原学的基础上进行目标治疗,同时要加强对儿童沙门菌感染的防控措施。     

幽门螺杆菌感染与性别和年龄关系的试验探讨

目的 探讨幽门螺杆菌(HP)感染是否存在性别差异.方法 13C呼气试验(13C-UBT)、消化道内镜活组织培养筛选幽门螺杆菌阳性患者,按照性别分组,经年龄标化后,判定感染是否存在性别差异.结果 785例女性患者HP阳性367例(46.8%),720例男性患者HP阳性253例(35.1%).女性δ基线以上的值(DOB)均值为20.3±14.1;男性DOB均值为15.5±11.6.男女DOB均值差异的t检验P＜0.05,在α=0.05水平时差异有统计学意义.结论 儿童的HP感染率显著高于成人,随着年龄的增加呈下降趋势;女性的HP感染率显著高于男性,HP载量也显著高于男性.     

多重耐药铜绿假单胞菌MexAB-OprM的表达及mexR基因的突变

目的 分析MexAB-OprM主动外排系统在铜绿假单胞菌耐药性中的作用,并讨论MexAB-OprM高表达与mexR基因突变的关系.方法 L-酚丙氨基-L-氨基酰-β-萘胺(MC207,110)联合环丙沙星(CIP)筛选13株多重耐药铜绿假单胞菌主动外排系统表型;RT-PCR检测13株多重耐药和7株全敏感的铜绿假单胞菌结构基因mexB的mRNA相对含量,推测MexAB-OprM表达水平;对6株MexAB-OprM高表达的多重耐药铜绿假单胞菌进行mexR基因扩增、测序和比对.结果 13株多重耐药铜绿假单胞菌9株主动外排系统表型阳性,阳性率69.2%;所有检测株中均有MexAB-OprM表达,其中有6株多重耐药株高表达;6株多重耐药高表达株中有5株存在mexR基因的突变.结论 MexAB-OprM主动外排系统高表达是导致本院铜绿假单胞菌多重耐药的重要原因,而mexR基因的突变又是导致MexAB-OprM高表达的主要原因.     

深圳地区儿童 MP实验室常规检测及分子流行病学特征

目的：分析深圳地区2010～2012年该院门诊及住院患儿肺炎支原体（M P ）感染分子流行病学特征，探讨实验室常规检测结果在M P感染诊断中的意义。方法选取2010～2012年诊断为呼吸道感染患儿，筛选出M P感染及非M P感染。对M P感染患儿3年间性别、年龄等流行病学特征进行分析，比较MP感染及非MP感染实验室常规检测及超敏C反应蛋白水平的差异。结果男性MP-DNA阳性检出率略高于女性，差异无统计学意义（P＞0．05）；MP感染在不同年龄群体均有发生，小于1岁MP-DNA阳性检出率最低，3～＜6岁患儿MP-DNA检出率最高（P＜0．05）；实验室常规检测及超敏C反应蛋白水平在MP感染诊断中无特异度。结论深圳地区MP分子流行病学显示MP感染具有季节性，实验室常规检测及超敏C反应蛋白水平不能作为MP实验室诊断的依据。     

腺病毒与呼吸道合胞病毒肺炎患儿外周血淋巴细胞亚群差异分析

目的比较腺病毒(adeno virus,ADV)与呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)肺炎患儿及健康儿童外周血淋巴细胞亚群的百分比例并探讨其临床意义。方法收集2014年1月~2015年12月期间在深圳市儿童医院住院的腺病毒肺炎患儿(ADV组)30例,呼吸道合胞病毒肺炎患儿(RSV组)30例(入选依据:60例病毒感染患儿肺部听诊均可闻及中小湿啰音,肺部X线片有点状或片状阴影,临床诊断为肺炎,直接免疫荧光法检测相关病毒抗原结果为阳性且无其他病原感染的临床及实验室证据)以及健康体检儿童(健康组)35例,应用流式细胞术检测上述研究对象外周血中CD3~+T细胞,CD3~+CD4~+T细胞,CD3~+CD8~+T细胞,CD3~-CD56~+NK细胞及CD3~-CD19~+B细胞的百分比并比较各组间的差异。结果与健康组相比较,ADV组[(55.04±8.45)%vs(69.07±9.30)%,t=3.32,P=0.002]与RSV组[(60.90±11.12)%vs(69.07±9.30)%,t=2.43,P=0.004]的CD3~+T细胞比例均下降,差异具有统计学意义(P0.01),特别是ADV组[(21.26±6.16)%vs(26.97±7.63)%,t=1.87,P=0.04]与RSV组[(21.56±7.06)%vs(26.97±7.63)%,t=1.68,P=0.04]的CD3~+CD8~+T细胞比例明显下降,差异具有统计学意义(P0.05);与此同时,与健康组相比,ADV组[(28.22±5.16)%vs(17.06±6.42)%,t=3.25,P=0.001]和RSV组[(29.14±10.96)%vs(17.06±6.42)%,t=2.79,P=0.009]的CD3~-CD9~+B细胞比例升高,差异具有统计学意义(P0.05)。与健康组[(13.54±5.95)%,t=2.01,P=0.03]及ADV组[(16.26±8.34)%,t=2.89,P=0.005]相比,RSV组的CD3~-CD56~+NK细胞亚群比例[(9.59±5.54)%]下降,差异具有统计学意义(P0.05)。结论腺病毒肺炎和呼吸道合胞病毒肺炎患儿外周血淋巴细胞亚群比例存在统计学差异,病毒性肺炎患儿体内可能存在免疫应答紊乱。     

大肠杆菌不耐热肠毒素突变体可作为鼻腔免疫流感疫苗的佐剂

作者使用定点突变的大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)作为佐剂,与流感病毒血凝素(HA)疫苗一起经鼻腔接种小鼠,对其免疫效果及安全性进行了探讨.取6～8周龄雌性BALB/c小鼠为免疫对象,HA疫苗由流感病毒PR8(H1N1)制备.用定点诱变方法替换Al亚单位上某一氨基酸,得到LT7K、LT61F、LT112K、