促排卵药雷洛昔芬对小鼠着床窗期子宫内膜COX-2和LPAR3表达的影响

目的 通过分析新促排卵药雷洛昔芬(raloxifene,RAL)对着床窗期小鼠子宫内膜容受性标志物环氧合酶-2(cyclooxygenase 2,COX-2)和溶血磷脂酸受体3(lysophosphatidic acidreceptor 3,LPAR3)表达的影响,探讨雷洛昔芬是否损害小鼠子宫内膜容受性. 方法 雌性昆明系小鼠60只,随机分为RAL用药促排卵组和自然受孕对照组.在雌鼠妊娠第4.5 d,采用免疫组化法检测COX-2和LPAR3在2组雌鼠子宫内膜中的表达. 结果 COX-2、LPAR3 2个因子在RAL用药组和自然受孕对照组小鼠中的表达均无显著性差异,P＞0.05. 结论 通过RAL用药来进行促排卵,对着床期小鼠子宫内膜COX-2和LPAR3表达水平的影响不明显,对子宫内膜容受性未发现产生不良损伤.     

男性不育患者精子DFI与其他精液参数的关系

目的通过研究精子DNA碎片指数(DFI)与其他精液参数的相关性,探讨精子DFI在诊断和治疗男性不育中的临床应用价值。方法收集2019年1月至2020年1月在该院生殖中心就诊的959例男性不育患者的精液标本,通过计算机辅助分析系统进行精液常规检测,运用Diff-quik染色法对精液进行染色处理后再作形态学分析,采用精子染色质扩散试验检测精子DFI,根据精子DFI值分组,Ⅰ组精子DFI<30%,Ⅱ组精子DFI≥30%,并对精子DFI与其他精液参数的相关性进行分析。结果Ⅰ组有754例;Ⅱ组有205例。Ⅰ组的精子存活率、前向运动精子百分率(PR)、非前向运动精子百分率(NP)和正常形态精子百分率明显高于Ⅱ组,差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ组患者的年龄、不动精子百分率(IM)明显低于Ⅱ组,差异有统计学意义(P<0.05)。精子DFI与精子存活率、PR、NP、正常形态精子百分率呈负相关(r=-0.409、-0.402、-0.198、-0.216,P<0.05),而与患者年龄和IM呈正相关(r=0.181、0.402,P<0.05)。结论精子DFI与多项精液参数相关,因此精子DFI检测应与精液常规检测及精子形态学分析相结合,为临床评估男性不育患者的生育力提供可靠且准确的评价指标。     

清远地区男性不育症患者精液质量与年龄的关系

目的：探讨清远地区男性不育症患者精液质量与年龄的关系。方法选取该院生殖中心男科门诊就诊的727例男性不育症患者为研究对象,依据年龄分为5组：≤25岁、＞25～30岁、＞30～35岁、＞35～40岁、＞40岁。采用计算机辅助精液分析（CASA）技术以及 Diff-Quick 快速染色法进行精液质量分析。结果＞30～40岁年龄段男性精液浓度较高,各年龄组间精液浓度变化没有统计学差异（P ＞0．05）。随着年龄的增长,前向运动（PR）精子比例、精子总活力以及精子存活率呈相对下降趋势,但各组间无明显统计学差异（P ＞0．05）。＞25～30岁组各项精液参数指标均达到 WHO 标准的比例最高,占该组人数的38．19％,＞40岁组比例最低,占该组人数的27．42％。结论随着年龄的增长,男性的精液质量呈下降趋势,但是不育症可发生在生育期男性的任何阶段。     

精浆NAG和血清FSH联合检测在梗阻性无精子症诊治中的应用

目的：探讨精浆中性α糖苷酶（NAG）和血清促卵泡生成素（FSH）联合检测在梗阻性无精子症诊断中的意义。方法分析24例男性无精子症患者（14例为梗阻性无精子症,10例为非梗阻性无精子症）精浆NAG和FSH 水平,与16例健康已生育男性（正常对照组）的检测结果进行相关性分析,同时结合睾丸体积和详细的病史资料判断无精子症病因及分型。结果无精子症患者（包括梗阻性和非梗阻性无精子症组）与正常对照组年龄差异无统计学意义（P＞0．05）,非梗阻性无精子症组睾丸体积明显比梗阻性无精子症组和正常对照组小（P＜0．01）。无精子症患者NAG含量均明显低于正常对照组（P＜0．01）,FSH 水平均明显高于正常对照组（P＜0．01）;梗阻性无精子症组NAG和血清FSH 水平明显低于非梗阻性无精子症组（P＜0．01）。结论精浆NAG和血清FSH 联合检测具有经济、快速、安全、无创等优点,对无精子症的诊断和临床指导治疗具有重要意义。     

人睾丸特异性新基因hTSC29合成肽单克隆抗体制备与鉴定北大核心CSCD

目的:制备和初步鉴定人睾丸特异性新基因h TSC29(Gen Bank登录号:BC032957)合成肽的单克隆抗体(m Ab)。方法:利用生物信息学方法对h TSC29的蛋白质序列进行分析和预测,根据免疫原性、表露性、亲疏水性及柔韧性4个参数,合成一段由18个氨基酸组成的多肽,并以此为抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合后,通过有限稀释法筛选阳性克隆,采用ELISA法、Western blot、免疫组化和免疫荧光法鉴定h TSC29 m Ab的特异性。结果:获得了1株稳定分泌h TSC29 m Ab的杂交瘤细胞株,分泌的抗体属Ig G2b(κ)亚型,杂交瘤细胞培养上清效价达到1∶104;Western blot鉴定表明,制备h TSC29 m Ab可特异性地识别人睾丸总蛋白中Mr约为60 000处的蛋白;免疫组织化学和免疫荧光结果显示h TSC29蛋白主要定位在正常人睾丸组织中的精母细胞和精子细胞。结论:成功建立了1株稳定分泌抗h TSC29 m Ab的杂交瘤细胞株,其分泌的抗体效价高、特异性强,为进一步研究h TSC29的功能提供了特异的检测工具。     

男性不育患者解脲脲原体感染与精子质量的相关性

目的 探讨男性不育症患者解脲脲原体(UU)感染与精子质量的相关性。方法 580例男性不育患者根据精液解脲脲原体(UU)培养结果分为阳性和阴性2组,比较2组精液参数,包括精液量、精子浓度、精子存活率、精子活力、精子形态等。结果阳性组患者精液量、存活率、前向运动精子(PR)、不活动精子(IM)、精子中段形态计数和阴性组比较,差异有统计学意义(P0.05)。精液浓度、非前向运动(NP)、正常精子形态计数、精子头部及尾部形态计数,差异无统计学意义(P0.05)。结论 UU感染可对精液常规主要参数产生不良影响,应引起临床高度重视。进行UU检测,可提高疗效。     

人睾丸特异性新基因hT279单克隆抗体制备及其应用

目的构建人睾丸特异性新基因hT279(GenBank登录号BC016750)的原核表达载体,纯化融合蛋白并以其为抗原免疫Balb/c小鼠制备抗人睾丸特异性hT279蛋白单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定。方法用PCR方法得到睾丸特异性新基因hT279并克隆至pET32a原核表达载体中,转化大肠杆菌BL21诱导融合蛋白表达;获得的可溶性蛋白经亲和层析纯化、SDS-PAGE鉴定后,免疫Balb/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗hT279 mAb,并通过间接ELISA、Western blot和免疫组织化学法对mAb进行特性鉴定。结果实现了hT279的原核表达,获得了1株稳定分泌抗hT279 mAb的杂交瘤细胞株4B2,抗体亚型为IgG2b(κ),效价达到1×104。Western blot鉴定表明,该mAb在人正常睾丸蛋白中相对分子质量约为22 000处检测到特异条带。免疫组织化学显示hT279蛋白主要在正常人睾丸的精母细胞及圆形精子细胞中表达,而在男性不育患者睾丸组织中表达消失。结论成功制备出1株抗hT279的mAb 4B2,为进一步研究hT279在人类精子发生中的功能和男性不育症的诊断提供了特异的检测工具。