胆囊良恶性病变中胆囊星形细胞标记物及其调控因子的表达研究

目的 探讨胆囊腺癌、癌旁组织和慢性胆囊炎组织中GSCs和其调控因子TGF β1mRNA和CTGFmRNA表达水平及其临床病理意义。方法 108例胆囊腺癌、46例癌旁组织和35例慢性胆囊炎手术切除标本常规石蜡包埋切片，GSCs染色方法为平滑肌肌动蛋白（α SMA）单抗EnVisiomTM免疫组化法，TGF β1mRNA和CTGFmRNA染色方法为原位杂交法。结果 胆囊腺癌α SMA，TGF β1mRNA，CTGFmRNA表达阳性率及其评分明显高于癌旁组织和慢性胆囊炎（P<0.05或P<0.01）；但腺瘤癌变、肿块最大径<2cm、无淋巴结转移和未侵犯周围组织者的α SMA，TGF β1mRNA，CTGFmRNA表达阳性率及其评分明显高于低分化腺癌、肿块最大径≥2cm、淋巴结转移和侵犯周围组织器官者（P<0.05或P<0.01）；胆囊腺癌中α SMA，TGF β1mRNA，CTGFmRNA表达评分之间均呈高度密切正相关（α SMA vs TGF β1mRNA, r=0.82; α SMA vs CTGFmRNA r=0.75; TGF β1mRNA vs CTGFmRNA, r=0.78）结论 α SMA，TGF β1mRNA，CTGFmRNA均为反映胆囊腺癌进展、生物学行为及预后的重要生物学标记物，TGF β1和CTGF在活化GSCs方面可能具有重要调控作用。     

胰腺和胰肾联合移植的进展

胰腺移植和胰肾联合移植已经成为治疗终末期患者器官衰竭的有效方法，尤其是近年来的一些重大进展明显改善了移植的效果。笔者就移植胰腺胰液引流选择、供胰静脉回流的方式、免疫抑制方案等方面进行综述。     

乙型肝炎病毒e抗原在肝细胞内作用蛋白AK026018亚细胞定位的研究

目的：确定肝细胞内乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)作用蛋白AK026018的亚细胞定位，初步研究该蛋白的生物学功能。方法：应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术，从HepG2细胞中扩增编码AK026018蛋白的全基因，构建真核表达载体pEGFP-AK，转染HepG2、293T细胞系，在激光共聚焦荧光显微镜下与转染空载体pEGFP-N1的细胞比较观察。结果：经限制性内切酶分析和DNA序列测定鉴定构建的重组表达载体正确。通过激光共聚焦荧光显微镜观察，转染了重组栽体pEGFP-AK的细胞绿色荧光信号较集中分布于胞浆中。而空载体pEGFP-N1转染的细胞绿色荧光信号在整个细胞中均匀分布。结论：成功分离了AK026018全基因序列并构建了真核表达载体，该基因表达产物亚细胞定位于细胞浆中。     

脂联素对L6大鼠骨骼肌细胞葡萄糖摄取的影响

目的观察脂联素对L6大鼠骨骼肌细胞基础及胰岛素诱导的葡萄糖摄取的影响。方法1. 将L6细胞分为脂联素处理组（脂联素刺激30?min）、胰岛素处理组（10?nmol/L胰岛素刺激20?mi n）和对照组。处理后分别测定各组细胞的葡萄糖摄取率。2. 将稳定表达葡萄糖转运子4（Gluosetransporter 4, GLUT4）的L6细胞(L6 GLUT4细胞)分为6组：① 对照组; ② 脂联素处理组：脂联素刺激30?min;③ 低浓度胰岛素处理组：0.1?nmol/L胰岛素刺激20?min; ④ 高浓度胰岛素组：10?nmol/L胰岛素刺激20?min; ⑤ 脂联素预处理+低浓度胰岛素组：脂联素预处理30?min,0.1?nmol/L胰岛素刺激20?min; ⑥ 脂联素预处理+高浓度胰岛素组：脂联素预处理30?min,10?nmol/L胰岛素处理20?min。处理后分别测定各组细胞的葡萄糖摄取率及GLUT4细胞膜含量。结果L6细胞：脂联素处理组葡萄糖摄取率与对照组差异无统计学意义(P＞0.05) 。L6 GLUT4细胞：① 脂联素处理组细胞膜GLUT4含量、葡萄糖摄取率与对照组差异均无统计学意义(P均＞0.05);②　低浓度胰岛素处理组细胞膜GLUT4含量、葡萄糖摄取率均显著高于对照组（P均＜0.01）;脂联素预处理+低浓度胰岛素组细胞膜GLUT4含量、葡萄糖摄取率均显著高于脂联素处理组（P均＜0.01）以及低浓度胰岛素处理组（P均＜0.01）;③　高浓度胰岛素处理组葡萄糖摄取率、细胞膜GLUT4含量均显著高于低浓度胰岛素处理组（P＜0.05,P＜0.01）;脂联素预处理+高浓度胰岛素组与脂联素预处理+低浓度胰岛素组比较,葡萄糖摄取率显著升高（P＜0.05）,而GLUT4细胞膜含量升高不显著（P＞0.05）;脂联素预处理+高浓度胰岛素组葡萄糖摄取率显著高于单纯高浓度胰岛素组（P＜0.01）,而GLUT4细胞膜含量差异无统计学意义（P＞0.05）。结论① 脂联素对骨骼肌细胞的葡萄糖基础摄取无明显影响;② 脂联素本身不足以诱导骨骼肌细胞的GLUT4细胞膜转位及葡萄糖摄取;③ 脂联素可增加胰岛素诱导的骨骼肌细胞的葡萄糖摄取,其机制可能与加强胰岛素诱导的GLUT4细胞膜转位以及增加细胞膜GLUT4对葡萄糖的转运效率有关。     

水蛭素对大鼠缺血皮瓣血管生成的促进作用及机制

【摘要】目的 研究水蛭素对大鼠缺血皮瓣血管生成的促进作用及其可能机制。方法 取10只SPF级SD大鼠,分别于大鼠背部中线双侧制备缺血皮瓣模型,右侧皮下注射水蛭素2 ATU（实验组）,左侧皮下注射等量生理盐水（对照组）。分别于术后3、7 d,对皮瓣组织行HE染色,经免疫组织化学染色检测后计算血管密度值;术后7 d时,计算皮瓣成活率,用蛋白质免疫印迹法检测血管内皮细胞生长因子（VEGF）、血小板反应蛋白1（TSP l）、p38 MAPK及ERK1/2磷酸化表达情况。结果 HE染色显示,实验组术后3、7 d时皮瓣组织坏死较对照组明显减少,新生血管较对照组明显增多（P＜005）。与对照组比较,实验组术后7 d时皮瓣成活率明显增高（P＜001）。免疫组织化学染色结果显示,术后3 d对照组皮瓣组织表皮层、真皮层均出现明显坏死;术后7 d时,由于对照组皮瓣组织大面积坏死,未观察到成功染色的血管;实验组术后3、7 d时皮瓣组织均未见明显坏死区。实验组术后3、7 d时血管密度值较对照组明显增加（P＜001）,实验术后7 d时血管密度值明显高于术后3 d（P＜005）。实验组术后7 d时VEGF表达水平较对照组明显升高,TSP 1表达水平较对照组明显降低（P＜001）。与对照组比较,实验组术后7 d时p38 MAPK磷酸化表达水平明显降低,ERK1/2磷酸化表达水平明显升高（P＜005）。结论 水蛭素具有促进大鼠缺血皮瓣新生血管形成的作用,其作用机制可能在于诱导血管内皮生长促进因子VEGF的表达和下调血管内皮生长抑制因子TSP 1的表达,可能与p38 MAPK、ERK1/2信号通路密切相关。     

骨髓间充质干细胞和嗅黏膜神经干细胞共移植治疗大鼠脊髓损伤

【摘要】目的 探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)和嗅黏膜神经干细胞(OM NSCs)共移植对大鼠脊髓损伤后运动功能的影响。方法 分别提取培养并鉴定大鼠BMSCs和OM NSCs。将60只雄性SPF级SD大鼠随机分为假手术组（仅做椎板切除,不损伤脊髓）,对照组（在脊髓损伤区域注射5 μL生理盐水）,BMSCs移植组（在脊髓损伤区域注射5 μL 5×104个细胞BMSCs单细胞悬液）,OM NSCs移植组（在脊髓损伤区域注射5 μL 5×104个细胞 OM NSCs单细胞悬液,BMSCs和OM NSCs共移植组（在脊髓损伤区域注射5μL 1〖DK〗∶1 5×104个细胞BMSCs和OM NSCs细胞混悬液）。细胞移植后第1、3、7、14、21、28天分别对大鼠进行BBB评分,28天后处死大鼠,分离脊髓组织,进行免疫荧光染色观察细胞迁移情况。结果 造模后,大鼠双后肢瘫痪,BBB评分0分。细胞移植后14天起,与对照组相比,干细胞移植组运动功能有显著改善,BBB评分比较差异具有统计学意义（P＜005）。与BMSCs移植组和OM NSCs移植组相比,移植后21、28天,共移植组BBB评分显著增加（P＜005）。免疫荧光观察结果表明,脊髓损伤28天后,损伤区脊髓内可见空泡形成,两种干细胞聚集在空泡周围,BMSCs在损伤区分布较为集中,而OM NSCs相对散在分布,细胞较为伸展。结论 干细胞移植可以一定程度上恢复脊髓损伤大鼠的运动功能,BMSCs和OM NSCs两种干细胞共移植效果优于单细胞移植。     

基于心超技术评价青年高血压并发左室肥厚疗效的药物流行病学研究

摘 要 目的：探讨高血压并发左室肥厚青年患者使用比索洛尔治疗方案的降压疗效,以心脏超声技术检查结果评价比索洛尔对左室肥厚的有效性。方法：采用分层整群抽样的方法抽取高血压并发左室肥厚患者的青年病例,根据降压药物使用情况分为暴露组（比索洛尔+氨氯地平）和对照组（氯沙坦+氨氯地平）,暴露组患者数206例,对照组患者数231例,比较患者治疗前后的血压、左室射血分数（LVEF）、左室质量指数（LVMI）、舒张早期二尖瓣口峰值流速/舒张晚期二尖瓣口峰值流速（E/A）、舒张早期二尖瓣环运动速度/舒张晚期二尖瓣环运动速度（Em/Am）的变化,并比较两组的有效性。 结果：暴露组降压有效率为86.89%,对照组降压有效率为84.85%,组间差异无统计学意义（P＞0.05）。暴露组患者收缩压由（150.71±18.32）mmHg降至（127.95±11.36）mmHg,舒张压由（96.53±7.72）mmHg降至（84.61±5.49）mmHg,差异均有统计学意义（P<0.01）;对照组患者收缩压由（151.23±17.84）mmHg降至（129.67±13.78）mmHg,舒张压由（99.25±7.46）mmHg降至（85.77±4.30）mmHg,差异均有统计学意义（P<0.01）;但两组间的基线状态、治疗后收缩压、舒张压差异均无统计学意义（P＞0.05）。暴露组患者E/A值由（0.77±0.14）升高至（0.85±0.12）,Em/Am值由（0.60±0.13）升高至（0.72±0.11）,对照组患者E/A值由（0.78±0.13）升高至（0.86±0.12）,Em/Am值由（0.65±0.10）升高至（0.77±0.11）,各组组内的差异均有统计学意义（P＜0.05）,但两组间的基线状态、治疗后E/A、Em/Am的差异均无统计学意义（P＞0.05）。两组患者LVEF均呈上升趋势、LVMI均呈下降趋势,但组内及组间的差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论：高血压并发左室肥厚青年患者使用比索洛尔治疗方案的有效性与氯沙坦差异没有统计学意义,可以推荐比索洛尔用于青年高血压并发左室肥厚患者的治疗。     

青藤碱对脓毒血症模型大鼠急性肾损伤的保护作用

目的 探讨青藤碱(SIN)对脓毒血症大鼠急性肾损伤的保护作用。方法将SD大鼠75只随机均分为假手术组、脓毒血症模型组和SIN小、中、大剂量组,建模,术后24 h采用ELISA法测定血清、尿液中性粒细胞明胶相关脂质转运蛋白(NGAL)、肾损伤分子1(KIM-1)水平及血降钙素原(PCT)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)浓度,并对结果进行统计分析。结果和脓毒血症模型组相比,SIN大、中剂量组NGAL和KIM-1均显著降低;SIN大、中、小剂量组PCT均较脓毒血症组显著降低,而BUN及Scr均显著低于模型组;SIN大剂量组肾脏病理明显改善。结论SIN有效降低血清和尿液NGAL和KIM-1,降低血清PCT、BUN和Scr浓度,对脓毒血症所致的急性肾损伤起到一定保护作用。     

妊娠期糖尿病孕妇IGF-1表达与新生儿免疫球蛋白和T细胞亚群的相关性分析

本研究通过比较妊娠期糖尿病孕妇(观察组)和正常妊娠孕妇(对照组,)胎盘组织中胰岛素样生长因子-1 (IGF-1)表达强度,以及新生儿外周血免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)和T细胞亚群(CD3、CD4、CD8、CD4/CD8)水平,以探讨IGF-1对新生儿免疫球蛋白和T细胞亚群的影响。结果显示:观察组孕妇胎盘组织IGF-1表达强度大于对照组,观察组新生儿外周血IgG、CD3、CD4和CD4/CD8低于对照组,而CD8高于对照组,Spearman分析显示IGF-1表达强度与IgG、CD3、CD4、CD4/CD8呈负相关(Rs=－0.539,－0.421,－0.389,－0.503,P＜0.05),而与CD8呈正相关(Rs=0.412,P＜0.05)。本研究结果说明:妊娠期糖尿病孕妇胎盘组织IGF-1表达强度明显增加,并影响新生儿外周血免疫球蛋白和T细胞亚群,引起新生儿免疫功能低下。     

沙格列汀联合二甲双胍对新诊断2型糖尿病患者血清炎症因子及胰岛β细胞功能的影响分析

将2型糖尿病患者共80例分为对照组(n=40)和观察组(n=40),对照组患者给予二甲双胍治疗,观察组患者给予沙格列汀联合二甲双胍治疗。两组患者治疗后空腹及餐后2小时血糖、肿瘤坏死因子-α(TNF-a)水平较治疗前均明显降低(P<0.05),可溶性类肿瘤坏死因子细胞凋亡弱诱导剂(sTWEAK)较治疗前明显升高(P<0.05),且对照组与观察组患者治疗后血糖控制指标及炎症因子间差异有显著性(P<0.05),且观察组患者的糖化血红蛋白达标率更高;两组患者治疗后胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平均明显降低(P<0.05)而胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)明显升高(P<0.05),且与对照组患者相比,观察组患者的上述指标变化更显著(P<0.05)。因此,沙格列汀联合二甲双胍可以纠正新诊断2型糖尿病患者炎症因子水平、改善胰岛β细胞功能,有效控制血糖。