中国经采供血HIV感染长期不进展者CD4~+T淋巴细胞趋化因子受体表达研究

目的:了解中国经采供血HIV感染长期不进展者CD4+T淋巴细胞趋化因子受体表达,分析其与疾病不进展的关系。方法:收集43例经采供血HIV感染长期不进展者、82例无症状HIV感染者、35例AIDS病人及40例健康对照的抗凝全血,用流式细胞仪检测趋化因子受体CCR5、CXCR4的表达,并分析其与病毒载量、CD4+T淋巴细胞绝对值及T淋巴细胞活化的相关性。结果:长期不进展组CD4+T细胞表面CCR5的表达明显低于无症状HIV感染组及AIDS组(P0.01),与健康对照无显著差异;CD4+T细胞表面CXCR4的表达各组无显著差异。CD4+T细胞表面CCR5的表达与CD4+T细胞数量显著负相关(r=-0.498,P0.05),与病毒载量无显著相关性。CD4+T细胞表面CCR5的表达与HLA、CD38在CD4+、CD8+T细胞的表达水平显著正相关(P0.001,CD38在CD4+T细胞的表达除外),CD4+T细胞表面CXCR4的表达与HLA在CD4、CD8+T细胞的表达水平显著负相关(P0.01)。结论:HIV感染长期不进展者CD4+T细胞趋化因子受体CCR5表达维持较低水平,与疾病不进展相关。     

中国HIV/AIDS患者保守表位的2F5抗体与疾病进展关系

目的 研究中国HIV/AIDS患者gp41保守表位中和抗体2F5与疾病进程的关系.方法 应用合成4(ELDKWA)-C24肽及gp41抗原肽包被96孔酶标板,ELISA方法检测特异性抗体水平.提取正常人外周血单个核细胞(PBMC),应用HIV-1 SF33毒株进行病毒多轮感染PBMC中和试验.结果 缓慢进展者(slow progressor,SP)的2F5样中和抗体水平显著高于典型进展者(typical progressor,TP)(P<0.05);2F5样中和抗体水平与gp41特异性抗体水平正相关(r=0.406,P<0.05).结论 中国HIV.-缓慢进展者体内具有高水平的2F5样抗体,2F5抗体可能是疾病不进展的保护性因素之一.     

三、四代酶联免疫吸附试验应用于HIV-1早期感染者的比较

目的 评价三代ELISA及四代ELISA对于HIV早期感染血样的灵敏度、窗口期和一致率.方法 收集2008至2010年在沈阳市的男男同性恋人群随访中发现HIV抗体阳转及中国医科大学附属第一医院就诊患者中发现的蛋白印迹试验(WB)确认带型不全患者HIV早期感染者血浆67份,进行三代ELISA、四代ELISA、WB确认试验及HIV-1 RNA检测.比较三代ELISA、四代ELISA对阳转期标本的检测灵敏度、一致率并动态观察血清阳转过程分析窗口期.三代与四代ELISA试剂灵敏度比较卡方检验进行统计学分析.结果 67份早期HIV-1感染者血清标本中,三代ELISA检出56份阳性,11份阴性,灵敏度83.6％(95％ CI72.5％～91.5％),四代ELISA检出63份阳性,1份灰区,3份阴性,灵敏度94.0％(95％ CI 85.4％～98.3％),四代ELISA灵敏度高于三代ELISA(x2=16.1,P＜0.01).三代ELISA与四代ELISA一致率86.6％(95％ CI76.0％～93.7％).三代ELISA阳性者感染时间最早为16 d,四代ELISA阳性者感染时间最早为9d.三、四代ELISA窗口期存在明显的个体差异.结论 四代ELISA对于HIV早期感染标本的检测灵敏度明显高于三代ELISA,窗口期更短.四代ELISA更适用于高危人群中的HIV早期感染的筛查.     

HIV/AIDS患者B7-H1的表达特点及与疾病进展关系研究

目的 研究HIV/AIDS患者外周血mDC及不同亚群T淋巴细胞B7-H1及PD-1的表达水平,分析其与疾病进展的相关性,探讨B7-H1及PD-1信号通路在HIV感染中的作用.方法 采集中国医科大学附属第一医院艾滋病研究所红丝带门诊36例未经抗病毒治疗的HIV/AIDS患者(无症状HIV组、AIDS组)及20名健康对照组...     

HAART治疗后不同免疫应答人群T细胞特征研究

目的探讨HIV感染者经高效抗逆转录病毒治疗(HAART)后不同免疫应答情况下T细胞的免疫特征。方法选取中国医科大学附属第一医院经HAART治疗的HIV感染者27例,按照免疫应答情况将其分为免疫无应答者(INR,14例)和免疫应答者(RES,13例),另有健康对照者(NC)25例。利用流式细胞仪对上述人群CD4~+T细胞数量、胸腺输出功能、活化及凋亡情况进行分析比较。结果 HIV感染者在HAART治疗后CD4~+T细胞数量持续增长,RES组CD4~+T细胞数量明显高于INR组。感染者治疗后的胸腺输出功能与CD4~+T细胞数量呈正相关(r=0.503 7,P=0.012 1),INR的胸腺输出功能显著低于RES(P0.05)。感染者CD4~+T细胞活化水平与CD4~+T细胞数量呈负相关(r=-0.469 7,P=0.017 8),INR的活化水平显著高于RES(P0.01)。感染者细胞凋亡水平与CD4~+T细胞数量呈反比(r=-0.547 2,P=0.018 7),INR的CD4~+T细胞凋亡水平明显高于RES(P0.01)。结论较低的胸腺输出功能、过度的活化及凋亡水平对抗病毒治疗后的免疫重建都将产生不利的影响。     

中国部分地区人免疫缺陷病毒耐药及其影响因素分析

目的分析吉林、黑龙江、河南、陕西、辽宁、内蒙古、云南7省人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者耐药变异情况及其影响因素。方法2005年5月至9月将中国医科大学附属第一医院艾滋病研究所问卷调查的718例HIV感染者治疗和漏服情况,RT-PCR和套式PCR扩增HIVpol区基因,逆转录酶和蛋白酶基因序列,与国际HIV耐药数据库比对辨别耐药变异。结果治疗组HIV抑制情况显著好于未治疗感染者(P<0.01),但其耐药变异高于未治疗组(P<0.05);抗病毒治疗6个月以内组耐药突变率显著低于6个月以上组(P<0.01);依从性好的患者HIV耐药突变率明显低于依从性差的患者(P<0.05),HIV抑制情况明显优于依从性差的患者(P<0.05);D4T/3TC/NVP方案HIV抑制效果明显优于其他方案(P<0.01),HIV耐药突变率也较低(P<0.05)。结论随着抗病毒治疗时间延长,耐药突变率显著增高,服药依从性与耐药突变显著相关。一线治疗方案首选D4T/3TC/NVP。     

家族性高胆固醇血症遗传因素筛查的研究进展

家族性高胆固醇血症(FH)是常见的常染色体显性遗传代谢病,发病率约为杂合FH为1/(137～350),纯合FH为1/(16万～30万),早期诊断和治疗对于该人群至关重要,但全球超过190个国家的FH检出率甚至不足1%。现在临床上常用的FH诊断标准主要依赖胆固醇水平检查和患者的健康调查信息,在不进行基因检查的情况下确诊率十分有限,所以基因检测被认为是FH诊断的金标准,阳性结果可以直接确诊。国际上常用的FH基因筛查策略包括无差别普查(Uni S)、瀑布式筛查(Cas S)、反瀑布式筛查(RCS)、目标人群筛查(Tar S)以及电子病例库筛选(e HRI)。我国目前尚没有任何国家层面的FH流行病学调查,也没有官方的适应国情和人群的筛查方案和诊断或治疗指南出台,使得我国在这方面严重落后于国际水平。所以当务之急是尽快得出合适的基因检测方法和筛查方案来切实提高我国FH的检出率,再结合临床确保检出患者得到适合的治疗,最大程度的使众多FH患者获益。     

以胞苷三磷酸为起始物酶促合成多聚胞苷酸

啤酒酵母发酵液与大肠杆菌多核苷酸磷酸化酶(PNPase)共同作用,使胞苷三磷酸(CTP)减磷生成胞苷二磷酸(CDP)然后,聚合成大分子多聚胞苷酸(Poly C),分子量在4S 以上,平均摩尔转化率为40%左右。     

生物工程在国外制药工业中的应用概况(一)

生物工程是本世纪七十年代开始发展起来的一门新兴技术。广意的生物工程包括遗传工程、细胞工程、酶工程和发酵工程。其主要的技术核心是遗传工程和细胞工程。生物工程能广泛用于医药、食品、农业、化工、能源以及环保等各个部门,因此西方专家预测在今后5年至20年内,随着这门新兴学科的不断发展并用于生产实践,不仅会收到巨大的经济效益,而且与之有关的工业结构也会发生深刻地变化。     

人类免疫缺陷病毒/艾滋病患者中和抗体保守表位氨基酸变异研究

目的 探讨人类免疫缺陷病毒／艾滋病（HIV／AIDS）患者中和抗体保守表位氨基酸变异特征，为开展中和抗体免疫治疗和疫苗设计奠定理论基础。方法 RT-PCR及nest-PCR扩增HIV／AIDS患者HIV-1外膜env C2～C3区基因，双脱氧终止法进行核酸序列测定，翻译为氨基酸序列，并与HIV-1SequenceDatabase参考毒株中和抗体表位数据比对辨别其保守表位氨基酸突变情况。结果 HIV-1外膜蛋白gp120 C2～C3区，HIV感染者和AIDS患者CD4结合位点（CIMBS）、CD4诱导（CD4i）、2G12三种类型中和抗体保守表位氨基酸均存在突变，两组病例表位突变率差异无统计学意义（均P〉0．05）；CD4BS保守表位突变有370E／Q（12．1％），370E／K（4．5％），266A／S（1．5％），368D／E（1．5％）；CD4i保守表位突变有370E／Q（12．1％），370E／K（4．5％），381E／D（7．6％），381E／V（1．5％）；2G12保守表位突变有295N／V（19．7％），295N／T（6．1％），295N／D、295N／K、295N／E（各1．5％），297T／I（9．1％），297T／S、297T／N（各1．5％）。结论 我国HIV／AIDS患者HIV-1外膜蛋白gp120 C2～C3区中和抗体CIMBS、CD4i、2G12保守表位氨基酸均存在突变，但尚处于低突变水平；不同类型中和抗体保守表位各氨基酸位点的变异程度有差异。