中国HIV-1感染疾病长期不进展者CCR2-64I、SDF1-3’A和CCR5Δ32的基因变异研究

目的 探讨CCR2-641、SDF1-3’A、CCR5Δ32基因变异对中国HIV—1感染疾病长期不进展者（long-term nonprogressors，LTNPs）疾病进程的影响。方法 收集17例中国HIV-1感染LTNPs和39例中国HIV-1感染疾病典型进展者（typical progressors，TPs）的抗凝全血标本，用全自动核酸提取仪提取基因组DNA，采用PCR／RFLP技术对CCR2、SDF1、CCR5基因进行检测分析。结果 LTNP组的CCR2-64I、SDF1-3’A基因突变率分别为50％和62．5％，TP组的CCR2-64I和SDF1-3’A基因突变率分别为23．08％、33．33％，LTNP组CCR2—64I、SDF1-3’A基因突变率明显高于TP组（P〈0．05）；LTNP组有1例CCR5Δ32杂合突变，未发现纯合变异，而TP组未发现CCR5Δ32突变。结论 CCR2-64I、SDF1-3’A和CCR5Δ32基因突变可能是中国HIV-1感染者疾病长期不进展的保护性因素之一。     

中国HIV-1感染者KIR基因多态性与疾病进展关系的研究

目的 通过对中国HIV-1感染缓慢进展者(TP)和典型进展者(TP)杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因频率的研究,探讨中国人群K/R基因多态性与HIV-1感染者疾病进程的关系.方法 采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术,分析43例HIV-1感染SP和38例TPKIR基因位点的多态性.结果 SP组和TP组的KIR2DS3等位基因频率分别为3.6%和14.2%,SP组显著低于TP组,两组的KIR2DS3等位基因频率差异具有统计学意义(P=0.018,OR=0.210,95%CI=0.053-0.833);SP组的活化性KIR基因数目低于TP组,但差异无统计学意义(P=0.208).结论 低表达KIR2D53基因可能是延缓中国HlV-1感染者疾病进程的保护因素之一.     

中国HIV/AIDS患者NK细胞及NKT细胞变化的检测

目的　探讨HIV感染后机体NK(naturalkillercells)及NKT细胞的变化情况。方法　取外周血细胞 ,用标记荧光的抗体进行染色 ,流式细胞仪分析HIV AIDS患者NK和NKT细胞的变化。结果　HIV AIDS患者NK、NKT细胞和CD4 + T细胞显著低于正常对照 ;CD8+ T细胞显著高于正常对照。HIV AIDS患者NK百分数显著低于正常对照 ,与CD4 + T细胞数量成正比 ,r=0 .2 89,P <0 .0 1 ;NKT细胞数量与CD4 + T细胞数量成正比 ,r =0 .378,P <0 .0 1 ;与CD8+ T细胞数量成正比 ,r =0 .340 ,P <0 .0 1 ;长期不进展组NKT、NK细胞数量与正常对照组差异无显著性。结论　HIV感染可明显降低HIV AIDS患者NK和NKT细胞数量 ,NK和NKT细胞变化与疾病进展密切相关。     

HIV/AIDS患者CCR5、CXCR4的表达与疾病进展的关系

目的　了解HIV AIDS患者淋巴细胞表面第二受体CCR5、CXCR4的表达 ,分析其与疾病进展的关系 ,探讨HIV感染的免疫基础。方法　收集 33例HIV AIDS患者及 13例健康对照的抗凝全血 ,用流式细胞仪检测第二受体CCR5、CXCR4的表达 ,并分析第二受体表达与病毒载量、CD4 + T淋巴细胞绝对值及T淋巴细胞活化 (HLA DR+ CD38+ )的相关性。结果　艾滋病组CD4 + 、CD8+ T淋巴细胞表面CCR5表达高于无症状HIV 1感染组及健康对照 (P <0 .0 0 1) ;艾滋病组CD8+ T淋巴细胞表面CXCR4表达低于健康对照 (P <0 .0 1)。HIV AIDS患者CD4 + 、CD8+ T淋巴细胞表面CCR5的表达与病毒载量明显正相关 (P <0 .0 1) ;与CD4 + T淋巴细胞绝对值明显负相关 (P <0 .0 1) ,与T淋巴细胞活化(HLA DR+ CD38+ )水平明显正相关 (P <0 .0 0 1)。结论　HIV 1感染者第二受体CCR5的表达与机体对HIV的免疫反应及疾病进展密切相关。     

经血感染HIV/AIDS患者pDCs与艾滋病疾病进展关系的研究

目的 了解中国HIV/AIDS患者外周血中类浆细胞样树突状细胞（plasmacytoid dendritic cells，pDC）绝对值的变化，分析其与HIV感染及疾病进展的关系。方法采集56例未经治疗的H1VIMDS患者及34例健康人抗凝静脉血，采用流式细胞仪单平台检测技术，分析计算三色荧光抗体标记的全血中pDC（Lin1^＋／HLA-DR^＋／CD123^＋）绝对值。结果MDS组pDC绝对值为3．31个／μl（0．31～6．46个/μl），显著低于正常对照组、HIV慢性感染组及HIV感染疾病长期不进展（long term non-progressors，LTNP）组（P〈0．01）。HIV慢性感染组pDC绝对值为5．27个/μl（2．25～9．80个/μl），显著低于正常对照组及LTNP组（P〈0．01）。LTNP组pDC绝对值为9．95个／μl（6．16～20．88个／μl），显著高于正常对照组（7．84个/μl，3．45～13．97个／μl，P〈0．01）。56例HIV/AIDS患者pDC绝对值与CD4^＋T淋巴细胞绝对值及百分率呈显著正相关（r=0．422，P〈0．01；r=0．488，P〈0．01），与病毒载量呈显著负相关（r=-0．444，P〈0．05）。结论HIV／AIDS患者pDC数量减少，并且随疾病进展逐渐下降；HIV感染LTNP的血pDC数量显著高于HIV慢悱感染者及MDS患者，甚至高于正常对照。提示外周血pDC在控制HIV感染方面有重要作用，与艾滋病疾病进展明显相关。     

HIV感染者急性期血浆CCL2水平与病毒载量关系分析

目的探究HIV感染者急性期血浆CCL2水平与病毒载量相关性以及动态变化关系。方法选取中国医科大学附属第一医院红丝带门诊HIV感染者54例,对样本的CCL2水平、病毒载量进行分析。结果急性期CCL2表达水平与病毒载量呈正相关(r=0.2920,P=0.0464);急性期CCL2水平与病毒载量存在一致的动态变化关系,在ART中断后,CCL2表达水平随着病毒载量增高而增高。急性期CCL2水平与HIV感染1年时间点的病毒载呈正相关,ROC曲线分析显示急性期血浆CCL2水平对HIV感染1年后病毒载量高低分组(高组≥4.5 Lg copies/mL,低组≤3.5 Lg copies/mL)的预测价值为80.30%(AUC=0.8030,P=0.0444),Kaplan-Meier生存分析显示急性期CCL2 high组(≥12.30pg/mL)的HIV感染者,其发生高水平病毒载量(≥4.5 Lg copies/mL)结局事件所需时间更短(P=0.0339)。结论HIV感染者急性期血浆CCL2水平与病毒载量水平呈正相关,急性期血浆CCL2高表达预示HIV感染者体内更快的疾病进展。CCL2有希望作为一个阻断靶点,限制HIV的侵袭能力。     

单核细胞TLR7/8表达与HIV-1感染疾病进程关系的研究

目的 对HIV-1感染者单核细胞TLR7/8表达水平及与疾病进展的相关性进行研究,探讨单核细胞TLR7/8在HIV-1疾病进程中的作用.方法 选取63名HIV-1感染者及18名健康对照,应用MACS磁珠分选法纯化CD14+单核细胞,用2.5μg/ml R848刺激单核细胞TLR7/8,QIAGEN公司的RNA提取试剂盒提取单核细胞总RNA,实时定量RT-PCR测定TLR7/8的mRNA表达.结果 HIV-1感染者单核细胞TLR7和TLR8的表达水平与CIM+T细胞显著正相关(r=0.614,P＜0.01;r=0.419,P＜0.01).TLR7 mRNA表达:缓慢进展组明显高于HIV感染组、AIDS组和健康对照组(P＜0.05),HIV感染组明显高于AIDS组(P＜0.05);TLR8 mRNA表达:缓慢进展组明显高于AIDS组(P＜0.05).体外用R848刺激11LR7后表达显著下调,而TLR8的表达稳定.结论 AIDS疾病进程中HIV-1感染者单核细胞TLR7/8表达水平明显下降,TLR7的表达水平下降更显著.     

中国HIV/AIDS患者tat第一外显子基因变异特点与疾病进展关系的研究

目的了解中国HIV／AIDS患者tat第一外显子的基因序列的特征和变异特点，探讨其与HIV-1感染者疾病是展之间的关系。方法选取40例辽宁和吉林HIV感染后临床进程不同的人抽取外周血，提取核酸，用套式聚合酶链反应（PCR）扩增HIV-1的tat基因，并进行核酸测序，生成系统进化树。结果长期不进展者、无症状感染者及AIDS患者的tat基因序列与相应亚型的国际流行株序列比较，各组均存在与流行株序列不一致的氨基酸变异，而且某些变异具有组间特异性。在系统树分析中各组聚集在一起，呈混合分布。结论中国HIV／AIDS患者tat第一外显子一些位点的基因变异可能与疾病进展有关，某些位点的基因变异可能会降低病毒的复制能力。     

新疆静脉吸毒者HIV-1原发耐药分析

目的研究新疆伊犁州经静脉吸毒(IDU)感染人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)未经抗病毒治疗者原发耐药株的流行情况。方法于2009年12月—2010年3月收集新疆伊犁州77例IDU HIV-1感染者血样及流行病学信息,提取血浆病毒RNA,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和巢式PCR方法扩增pol基因区1.3 kb片段并测序;构建系统进化树分析病毒亚型,提交斯坦福大学HIV耐药数据库进行耐药性分析。结果 77例感染者中,76例(98.7%)为CRF07_BC亚型,1例(1.3%)为B亚型;蛋白酶区未检出主要耐药突变,耐药相关次要突变主要出现在第10、58和71位;其中71位氨基酸突变发生频率最高(11/77),其次为第10位(6/77)和第58位(3/77);第71位氨基酸由野生型的A突变为V者7例,突变为T者3例,突变为I者1例;第10位氨基酸由野生型的L突变为I者5例,突变为V者1例;第58位氨基酸由野生型的Q突变为E者3例;1例病例逆转录酶区同时存在Y181C及M184V耐药突变。结论新疆伊犁州未接受抗病毒治疗的IDU感染者中检出原发耐药株,原发耐药率处于较低水平,但应加强该地区IDU感染者的耐药监测,防止耐药株产生和流行。