L-15N亮氨酸和质谱测定大鼠肝蛋白质合成

目的:建立稳定同位素L-15N亮氨酸测定大鼠肝蛋白质合成率的方法.方法:分别测定静脉注射相同剂量L-15N亮氨酸不同时相的大鼠肝15N丰度及不同剂量L-15N亮氨酸同一时相的大鼠肝15N丰度.结果:大鼠肝游离氨基酸池中15N同位素丰度在注射后30 min内呈线性上升并达高峰,维持4 h后缓慢下降,肝蛋白质中的15N丰度30 min至12 h基本维持不变;随着注射剂量的增加,大鼠肝蛋白质分数合成率亦增加,当L-15N亮氨酸剂量＞1.0 mmol/kg,分数合成率并不随施加L-15N亮氨酸剂量的加大而增加.结论:在进行大鼠肝蛋白质合成率测定时,一次性静脉注射的测量最佳时限为30 min,剂量为1.0 mmol/kg.     

基质金属蛋白酶9水平在脑梗死出血转化中的临床意义

目的 探讨血浆基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平在急性脑梗死出血转化中的临床意义.方法 157例发病24 h内急性脑梗死患者,根据是否存在出血转化分为脑梗死组(梗死组,135例)和脑梗死出血转化组(转化组,22例);于起病24 h急诊行血浆MMP-9水平测定,并分析其与脑梗死出血转化、梗死体积大小和病情严重程度的相关性.结果 转化组血浆MMP-9水平高于梗死组(P＜0.01);梗死体积大者血浆MMP-9水平也明显高于中、小梗死者(P＜0.01);NIH卒中量表(NIHSS)评分≥7分者血浆MMP-9的含量亦明显上调(P＜0.01).结论 血浆MMP-9水平与脑梗死出血转化的发生及梗死体积大小、病情严重程度相关.脑梗死早期检测血浆MMP-9可作为临床预测脑梗死出血转化的参考指标.     

深低温冷冻对鼠异体异位气管移植体免疫调节的影响

目的研究应用深低温冷冻处理气管移植体,异体异位移植后移植体的结构变化,并观察术后CD3阳性淋巴细胞在移植体中的浸润情况,探索应用深低温冷冻来降低免疫排斥反应的可行性。方法取SD大鼠5个环气管段冷冻后作为供体气管移植体,行冷冻或未冷冻同种异体异位移植于Wister大鼠腹腔大网膜内。64只Wister大鼠按接受移植体是否在术前行深低温冷冻及术后处死时间,等分为8组,于术后1周、4周、8周、12周分别取标本行大体及病理学检查,组织学半定量测定上皮、软骨情况,免疫组织化学法检测各组CD3阳性淋巴细胞浸润的情况。结果冷冻组气管移植体管腔通畅度优于未冷冻组(P<0.01);1、4、8周两组比较,冷冻组上皮积分低于未冷冻组(P<0.01),而软骨形态结构积分较未冷冻组高(P<0.01);冷冻组软骨积分不随术后存活时间延长减低,未冷冻组上皮积分与术后存活时间成反比,且该组软骨形态结构积分与术后存活时间成反比。CD3阳性细胞浸润主要见于黏膜下层及气管环间,可见于气管软骨,冷冻组CD3阳性细胞浸润数积分低于未冷冻组,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论异体异位移植后,气管移植体管腔结构保持良好,可长期存活,深低温冷冻可降低气管移植体的抗原性,减轻移植后的免疫排斥反应。     

异体脐带间充质干细胞对大鼠心脏移植的免疫调节**☆

背景：有资料表明骨髓间充质干细胞可延长小鼠和狒狒异体皮肤移植存活时间,降低造血干细胞移植后急性和慢性移植物抗宿主病的发生,但目前尚未见关于大鼠脐带间充质干细胞用于心脏移植减少排斥反应的报道。 目的：观察异体脐带间充质干细胞对大鼠心脏移植的免疫调节作用。 方法：DA大鼠20只作为供体,Lewis大鼠20只作为受体,均随机分为2组,即药物干预组、对照组,每组供受体大鼠各10只。采用双套管法将供体大鼠的左肺动脉和无名动脉分别与受体大鼠心脏的颈外静脉和颈总动脉在显微镜下行端端吻合,建立异位心脏移植模型。Wistar孕鼠1只,采用胶原酶消化法分离培养脐带间充质干细胞。造模后,细胞移植组经尾静脉注射脐带间充质干细胞,对照组同法注射氯化钠注射液。检测移植心脏的存活时间,采用心脏移植急性排斥反应诊断标准对移植心脏进行组织病理学评分,苏木精-伊红染色观察移植心脏淋巴细胞浸润程度。 结果与结论：与对照组比较,细胞移植组移植心脏存活时间显著延长(P=0.001),急性排斥反应病理学评分显著降低(P=0.000 4)。对照组心肌组织内有大量淋巴细胞和单核细胞浸润,细胞移植组心肌组织内有少量淋巴细胞浸润,心肌间质轻度水肿。结果证实大鼠脐带间充质干细胞可诱导心脏移植免疫耐受,减轻免疫排斥反应,延长心脏存活时间。     

乳晕放射状切开松解合并双环形荷包缝合治疗乳头内陷

目的：介绍一种有效治疗乳头内陷的手术方法。方法：采用乳晕放射状切口切开乳晕皮肤,离断松解短缩的纤维结缔组织及平滑肌,松解后应用双环形荷包缝合形成乳头颈部和根部并防止回缩。结果：应用该方法矫正治疗乳头内陷11例,术后回访1～6个月,其中10例效果良好,1例一侧乳头重新回缩。结论：乳晕放射状切开松解合并双环形荷包缝合法对于矫正乳头内陷是一种良好的手术方法,对Ⅰ型和Ⅱ型乳头内陷有其良好的应用效果。     

影响5-FU 疗效的研究进展

癌症是导致我国居民死亡的首要原因,近50年来发病率一直处于上升趋势。5-FU 至今仍是治疗乳腺癌、结肠癌、胃癌等肿瘤最常见的药物前体之一,其活性产物能够影响DNA的合成及RNA翻译过程。虽经历年不断改良,但由于越来越多的患者对5-FU 产生耐药性,其总体有效率仍不尽如人意。5-FU 耐药机制的阐明有利于制定合理的个体化治疗方案、提高治疗效果、改善肿瘤患者预后以及开发新的更有效的抗肿瘤药物。近年来各国研究人员对5-FU 的耐药机制、生物调控、前体药物开发、给药方式、疗效判断等的大量研究取得了很多有意义的结果。例如黏蛋白MUC1、DPD 基因拷贝数、O6- 甲基鸟嘌呤-DNA 甲基转移酶（MGMT）、热休克蛋白27、40（Hsp27、Hsp40）、表皮生长因子受体8（EGFRv Ⅲ）等与5-FU 敏感性降低有关,而OPRT（乳清酸磷酸核糖转移酶）、钙敏受体（CaSR）、5- 氯-2,4- 二羟基吡啶（CDHP）、前列腺凋亡反应蛋白4（par4）、PG490、罗格列酮、雷帕霉素、基质金属蛋白酶1 组织抑制剂（TIMP- 1）、酪丝缬肽（YSV ）、5- 杂氮脱氧胞嘧啶（DAC ）、中药复方等可以增加5-FU 的化疗敏感性。REG IV、中间丝蛋白CK- 18、胰岛素样生长因子结合蛋白-3（IGFBP-3）、增殖诱导配体/肿瘤坏死因子超家族成员13（APRIL/TNFSF 13）等可被作为判断5-FU 治疗预后判断的血清学标志物。本文对5-FU 作用机制、化疗敏感性影响因子、耐药细胞基因表达谱改变以及可能用于临床5-FU 治疗预后判断的血清标志物等领域的最新进展和研究动态作一综述。      

激活HaCat细胞表面TLR促进细胞迁移的初步研究

目的观察长链游离脂肪酸对体外培养的角质形成细胞的作用,探讨其促进细胞迁移的机制。方法 (1)体外培养HaCat细胞。(2)免疫印迹法(Weston bloten)检测HaCat细胞表面TLR2、TLR4表达。(3)划痕实验法检测激活TLR对HaCat细胞迁移率的影响。(4)Real Time-PCR法分析N、PA、SA、LPS组MMP-3、MMP-9、TIMP-1的表达。结果 (1)HaCat细胞表面有丰富的TLR2、TLR4受体表达。(2)SA、LPS激活细胞表面TLR后可以明显促进细胞迁移,从而发挥促进创面愈合的作用。结论 SA、LPS可促进角质形成细胞迁移从而促进创面愈合;其机制可能为:SA作用于TLR促进细胞释放MMP-1、MMP-9、抑制TIMP-1表达等因素有关。     

温心汤对冠心病缓慢性心律失常患者心脏自主神经功能的影响

目的:探讨温心汤对冠心病缓慢性心律失常患者心脏自主神经功能的影响。方法:将152例冠心病缓慢性心律失常患者随机分为对照组与治疗组,每组76例。对照组采用卡托普利、单硝酸异山梨酯、肠溶阿司匹林治疗,治疗组采用温心汤治疗。比较两组治疗前后临床症状、动态心电图平均心率、最慢心率、即刻心率及心率变异性指标[全部窦性心搏NN间期(standard deviation of NN intervals,SDNN)、每5 min NN间期平均值标准差(standard deviation of average 5 min NN intervals,SDANN)、相邻NN间期差值的均方根(square root of the mean squared differences NN intervals,RMSSD)、低频与高频比值(low frequency/jigh frequency,LF/HF)]等变化情况,并对两组临床疗效及安全性进行评价。结果:治疗组总有效率为92.11%,对照组总有效率为73.68%,治疗组优于对照组,差异有统计学意义(P0.05);与治疗前比较,治疗后两组中医证候积分、SDANN、RMSSD均下降,而平均心率、最慢心率、即刻心率、SDNN、LF/HF均上升,差异均有统计学意义(P0.05);治疗后两组比较,治疗组中医证候积分、SDANN、RMSSD均低于对照组,心率、最慢心率、即刻心率、SDNN、LF/HF均高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05);两组在治疗期间均未见肝功能、肾功能异常及不良反应。结论:采用温心汤治疗冠心病缓慢性心律失常具有较好临床疗效,能改善心脏自主神经功能。     

高效液相色谱串联质谱法同时检测人血浆伊马替尼及代谢物

目的：建立一种同时测定人血浆中伊马替尼及其活性代谢产物N-去甲基伊马替尼的高效液相色谱串联质谱（HPLC-MS/MS）法,并应用于检测胃肠间质瘤患者伊马替尼及代谢物的浓度。方法：血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以含0.1%甲酸的水溶液和甲醇溶液为流动相;采用梯度洗脱,Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈（2.1 mm×50 mm,1.7 μm）色谱柱进行分离,流速为0.3 mL·min^-1;柱温为35℃。ESI离子源,正离子模式,多反应监测,用于定量分析的离子对为m/z494.2→m/z394.3（伊马替尼）、m/z480.3→m/z394.3（N-去甲基伊马替尼）、m/z502.5→m/z394.4（内标,伊马替尼-D₈）。结果：伊马替尼和N-去甲伊马替尼的线性范围均为50~10 000 ng·mL^-1,定量下限为50 ng·mL^-1,伊马替尼及代谢物的准确度分别为97.9%~109.0%,95.5%~103.5%,日内和日间变异系数<10%。结论：本方法简便、准确、灵敏、专属性强,适用于人血浆中伊马替尼及其代谢物浓度的检测。     

2例链球菌中毒性休克综合征

链球菌中毒性休克综合征（Streptococcal Toxic Shock syndrome STSS）为与A组溶血性链球菌感染相关的严重疾病。它主要表现为皮疹,高热,休克,急进性的多器官功能障碍,病死率极高,预后不良。现报告2例链球菌中毒性休克综合征患者