HPLC-ESI-ITMSn法鉴定麻黄碱及其大鼠体内主要代谢产物

目的建立快速灵敏的LC-ESI-ITMSⁿ分析检测麻黄碱及其大鼠体内代谢物的方法。方法以麻黄碱对照品对LC-ESI-ITMS²色谱及质谱条件进行了优化，分析总结其电喷雾质谱的一级电离规律和多级质谱裂解规律，以此作为麻黄碱大鼠体内代谢物分析鉴定的依据。健康大鼠空腹灌胃麻黄碱10 mg·kg^-1，收集0~48 h的尿样，经C₁₈小柱固相萃取分离纯化后，直接采用LC-ESI-ITMSⁿ方法对尿样进行测定。结果根据生物体内药物代谢转化规律及母体药物的色谱-质谱行为规律，在尿样中鉴定出3个第I相代谢产物，未发现第II相代谢产物。结论本方法灵敏、快速、选择性高、专属性好，可用于麻黄碱的代谢产物研究。     

反相高效液相色谱法测定加味左金丸中盐酸小檗碱和吴茱萸次碱的含量

 目的建立同时测定加味左金丸中盐酸小檗碱和吴茱萸次碱含量的反相离子对液相色谱法。方法采用Agilent ZOR-BAX SB-C₁₈柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-乙腈-15 mmol·L^-1SDS水溶液(20∶40∶40,pH 7.5)流动相,检测波长343 nm。结果盐酸小檗碱和吴茱萸次碱的线性范围分别为12～120和0.45～6.81 mg·L^-1,盐酸小檗碱的回收率为99.21%,RSD=1.60%;吴茱萸次碱的回收率为101.40%,RSD=3.32%。结论采用本方法同时测定加味左金丸中盐酸小檗碱和吴茱萸次碱含量具有简便、快速、准确等优点。     

痹痛消三联疗法治疗腰肌纤维织炎疗效观察及护理

腰肌纤维织炎,是常见病、多发病,表现为腰部疼痛、僵硬、活动受限,给患者造成体力劳动、工作能力和生活质量下降,2009年2月至2010年11月,笔者采用痹痛消三联疗法治疗腰肌纤维织炎,取得良好效果,报告如下。     

进展期胃癌腹腔镜切除术后炎性反应和疼痛因子研究

目的 探讨腹腔镜切除术对进展期胃癌患者术后炎性反应和疼痛因子的影响.方法 选择2019年3月-2021年3月该院进展期胃癌患者82例,依据随机数表法分为观察组(n=41)和对照组(n=41).对照组实施开腹胃癌根治术,观察组实施腹腔镜下胃癌根治术.比较两组患者手术指标和术后并发症,观察术前、术后3和7 d血清炎性因子[...     

益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾间质Wnt与NF-κB影响的研究

目的:观察益肾胶囊对糖尿病肾病(DN)大鼠模型肾间质Wnt4、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(PGSK-3β)及核因子-κB(NF-κB)表达水平的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠32只,体重(200±20g),随机选取8只作为正常组,其余予腹腔注射链脲佐菌素,制备糖尿病肾病动物模型,造模成功后随机分成4组:模型组(n=8),益肾胶囊组(n=8)和氯沙坦组(n=8)。连续给药12周。12周末,检测各组大鼠24h尿蛋白定量,血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),取肾组织行HE染色、免疫组化。光镜下观察肾间质病理变化情况,用免疫组化法检测Wnt4、PGSK-3β与NF-κB表达水平,行实时荧光定量(FQ-PCR)法测定肾组织中Wnt4、NF-κBmRNA的表达。结果:12周末,与正常组比较,模型组大鼠24h尿蛋白定量、血Scr、BUN明显增加,肾间质Wnt4、PGSK-3β与NF-κB表达水平明显升高,肾组织Wnt4、NF-κBmRNA表达水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,益肾胶囊治疗组大鼠24h尿蛋白定量、血Scr、BUN明显减少,肾间质Wnt4、PGSK-3β与NF-κB表达水平明显降低,肾组织Wnt4、NF-κBmRNA表达水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。氯沙坦治疗组与益肾胶囊治疗组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:益肾胶囊可能通过调节DN肾间质Wnt4、PGSK-3β、NF-κB的表达,影响了NF-κB和Wnt通道的信号转导,延缓了DN的进展。     

川芎中川芎嗪和阿魏酸含量的毛细管电泳测定

目的：研究川芎中川芎嗪和阿魏酸的毛细管电泳分离分析的可行性。方法：通过用毛细管区带电泳分离、紫外检测模式研究内标、电泳缓冲液、进样方式、分离电压等对样品中川芎嗪和阿魏酸分离与定量的影响,优化实验条件。结果：以对硝基苯甲酸为内标,未涂层熔融石英毛细管(39.5 cm×50 μm ID,有效分离长度34.8 cm)为分离通道,30 mmol.L^-1硼砂缓冲液(pH 9.43)为电泳介质,34 kPa.s压力进样,17 kV分离电压,295 nm检测,川芎嗪和阿魏酸分别在7～423 μg.mL^-1和4～900 μg.mL^-1范围内可进行定量检测,回收率分别为100.9％±1.9％和99.8％±1.0％。结论：毛细管电泳法可用于川芎中川芎嗪和阿魏酸的同时分离分析。     

胶原膜引导下同种骨颗粒修复兔桡骨节段性缺损

背景：胶原膜是一种可吸收引导成骨材料,同种异体骨是较为理想的骨替代材料,但单独应用均有其不足,拟将两种材料结合使用以期达到理想效果。 目的：利用膜引导组织再生技术,观察胶原膜复合同种骨颗粒修复兔桡骨节段性骨缺损的成骨速度和质量,并与单纯胶原膜进行比较。 设计、时间及地点：同体对照观察实验,于2004-09/2005-02在中国辐射防护研究院医用组织库中心实验室完成。 材料：胶原膜规格20 mm×20 mm,由北京天新福医疗器材有限公司提供。同种异体骨颗粒按美国组织库标准制备,直径0.2~0.7 mm,由山西省医用组织库提供。 方法：健康成年新西兰大白兔40只,制备双侧15 mm桡骨缺损模型,采用同体对照方法,实验侧（左侧）缺损区移植胶原膜及同种骨粒,对照侧（右侧）仅移植胶原膜。 主要观察指标：光镜组织学观察骨缺损愈合情况,计算机图像分析仪计算骨小梁的成骨面积,扫描电镜观察缺损再生修复情况。 结果：①光镜组织学变化：实验侧新骨增生明显,迅速,以膜性化骨及软骨内化骨的方式由骨缺损周围向中央成骨或以同种骨粒为中心由周围向骨粒内成骨,最后骨膜形成,新髓腔不断扩大、再通,骨重建顺利,缺损修复完成。对照侧成骨方式以软骨化骨为主,新骨形成较同期实验侧慢,新骨成熟度不如实验组。②成骨面积图像分析：结果显示术后2,4,8周新生骨小梁成骨面积均大于同期对照侧（P < 0.05）。③扫描电镜观察：术后8周实验侧有较多分泌胶原的成骨细胞和带有较多突起的骨细胞,钙盐沉积,骨质排列开始有序。对照侧软骨与类骨质互相存在,低倍下骨基质排列无序,胶原纤维编织样排列。术后12周实验侧骨质排列有序,胶原粗大排列整齐,大量骨细胞方向有序,大量钙盐沉积,可见哈佛氏管和血管。对照侧骨质排列有序,但胶原纤维较细、基质钙化程度不如实验侧。 结论：两种方法均能成骨修复缺损,但胶原膜复合同种异体骨粒组成骨速度快,且成骨质量优于单纯胶原膜组。     

大鼠粪样中山莨菪碱及其代谢物的串联质谱法检测

目的运用液相色谱-电喷雾串联质谱(LC-MSn)法检测大鼠粪样中山莨菪碱及其代谢物。方法收集灌胃山莨菪碱(25 mg.kg-1)的大鼠粪样,用水浸泡后,以乙酸乙酯萃取,采用LC-MS及LC-MSn等方法检测原药及其代谢物。根据代谢物相对分子质量的变化(ΔM)及其多级质谱数据,鉴定并阐述其结构,同时与空白粪样及山莨菪碱相比较。结果在服药后的大鼠粪样中发现山莨菪碱及其7种代谢产物,分别为6β-羟基托品、N-去甲基-6β-羟基托品、N-去甲基脱水山莨菪碱、脱水山莨菪碱、N-去甲基山莨菪碱、羟基山莨菪碱以及托品酸等。结论该方法灵敏、快速、简便、有效,适合于生物样品中的药物及其代谢产物的快速鉴定。     

高效液相色谱串联电喷雾质谱法测定大鼠血浆中水苏碱

 目的应用LC/ESI-ITMS检测大鼠血浆中水苏碱的含量。方法取血浆样品0.2mL,经3 mL乙腈-甲醇(90∶10)混合液沉淀蛋白并萃取后,以甲醇-水-甲酸(70∶30∶1,pH 3.5)为流动相,用Agilent zorba Extend-C₁₈色谱柱分离,通过电喷雾离子阱质谱,以选择离子反应监测(SRM)方式进行检测检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z144→m/z84(水苏碱)和m/z166→m/z148(内标,麻黄碱)。结果水苏碱线性范围为0.02～5.00 mg·L^-1,定量限20μg·L^-1,最低检测限为1μg·L^-1,日内、日间测定值RSD小于5.4%。在大鼠体内药动学研究中,应用此法测定了6只大鼠给予盐酸水苏碱后血浆中水苏碱的浓度。结论该法快速灵敏,准确度高,适用于大鼠体内水苏碱的药动学研究。     

山麦冬多糖对免疫低下小鼠的保护作用

目的:研究山麦冬多糖对免疫低下小鼠的保护作用.方法:采用小白鼠60Co-γ射线全身照射和注射环磷酰胺,形成免疫损伤模型,观察山麦冬多糖对模型小鼠的免疫活性的影响.结果:与模型小鼠比较,山麦冬多糖高剂量组(1600mg/kg)和低剂量组(400mg/kg)对由60Co-γ射线和环磷酰胺造成的小鼠免疫器官损伤有一定的恢复作用,能显著增强免疫低下小鼠的胸腺和脾脏重量,还能升高注射环磷酰胺小鼠外周血的白细胞数.小鼠体内实验表明,山麦冬多糖还对小鼠原发性肝癌实体瘤有一定的抑制作用.结论:山麦冬多糖对免疫低下小鼠有保护作用.