微量固相(聚苯乙烯小珠)放射免疫法检测HBcAb的初步研究

自发现乙型肝炎核心抗原(HBcAg)、抗体(抗-HBc)系统以来,有关此系统的研究进展很快。国内已有应用微量补结法、免疫粘连血凝法(IAHA)及间接血凝法(PHA)检测抗-HBc的报道。国内外还先后报道了用取自     

丙型肝炎病毒E2蛋白在大肠杆菌中的表达及初步纯化

ＨＣＶＥ２抗体在慢性ＨＣＶ感染中有较高的检出率（８０％～９７％）,与病毒血症密切相关,抗体滴度与病毒复制、ＨＣＶＲＮＡ的滴度相关。本研究在大肠杆菌中高效表达了ＨＣＶＥＺ蛋白,并进行了蛋白的初步纯化。用分子克隆技术,将ＨＣＶＥ２基因连接到非融合蛋白的原核表达载体ＰＫＫ２２３－３上,并转化大肠杆菌,经扩大培养,提取质粒进行酶切鉴定而获得含有Ｅ２基因的阳性克隆（ｐＫＫＥ２）。挑取Ｅ２阳性克隆单个苗落接种于１ｍｌ培养基中,３７℃振摇培养,细菌生长至对数生长期时,加入ＩＰＴＧ诱导Ｅ２蛋白表达５小时。离心去…     

HCV E2和HBV preS融合蛋白真核表达载体的构建及在哺乳动物细胞中的表达

目的:构建丙型肝炎病毒(HCV)E2和乙型肝炎病毒(HBV)preS融合蛋白的真核表达载体.方法:用PCR方法扩增HBV preS和HCV E2蛋白基因,并将二者克隆到真核表达载体pcDNA3中,用脂质体转染试剂将其转入COS7细胞,通过免疫荧光检测细胞瞬时表达的融合蛋白.结果:E2-preS融合蛋白基因包括了全长的HBV preS和HCV E2蛋白基因,嵌合基因长度约1.6 kb.表达载体在COS7细胞表达出了E2-preS融合蛋白.结论:构建的E2-preS融合蛋白表达载体能在哺乳动物细胞中表达融合蛋白,为获得真核表达的融合蛋白及研究此蛋白的免疫原性打下基础.     

基因免疫诱导小鼠产生抗丙型肝炎病毒E2糖蛋白抗体

目的：通过基因免疫诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠产生抗Ⅲ型中国株ＨＣＶ来源Ｅ２糖蛋白的体液免疫应答。方法：质粒ｐ３Ｗ１４在ＮＩＨ３Ｔ３细胞中能够表达Ｅ２糖蛋白，纯化该质粒并用于ＢＡＬＢ／ｃ小鼠直接肌注，于加强注射后不同时相采血，以重组的Ｅ２糖蛋白检测特异性抗Ｅ２抗体。结果：接种ｐ３Ｗ１４质粒的小鼠中可检出抗Ｅ２抗体（５／６），抗体滴度１∶１５～１∶１２０。结论：采用含Ｅ２／ＮＳ１基因的质粒ＤＮＡ免疫，成功地诱导小鼠产生抗Ⅲ型株来源的Ｅ２抗体。     

HBV感染血清中HBsAg的Pre-S_2 PHSA受体及PHSA结合活性的实验研究

本文通过对HBV感染中Pre-S、PHSA受体及PHSA结合活性的实验研究,显示了三者关系。实验证明:PHSA受体与Pre-S有免疫及生化活性的一致性。PHSA结合活性在HBV感染中即为PHSA受体,但它也存在于其它感染中。文章还讨论了不同试剂与三者检出的关系。     

两种国产甲肝试剂盒的临床评估

国产甲肝诊断试剂盒在国家“七五”科技攻关项目之前质量较差,且未进行过系统的验证。现经实验证明:参加验证课题的两家国产总抗HAV及抗HAV-IgM的酶标试剂与同类Abbott试剂比较,在敏感性(99.24％～93.62％)、特异性(96.51％～91.23％)、总符合率(98.33％～96.10％)等诸方面,及其它技术指标上,均接近同类试剂的国际水平。     

第六届国际病毒性肝炎及肝病会议(伦敦)情况介绍

第六届病毒性肝炎及肝病国际会议于1987年5月26～28日在伦敦召开,会议每3年由美国和英国的有关专家轮流召集。参加本次会议的有各国专家近千人,世界上知名的肝炎专家大部份都出席了这次会议。现将会议内容简单介绍如下。     

慢性丙肝患者外周CTL对HCV抗原位点的特异性识别及受HLA的限制

目的研究丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染后外周血中细胞毒Ｔ细胞（ＣＴＬ）对ＨＣＶ的识别杀伤。方法用ＨＣＶＮＰ合成肽Ａ链和Ｂ链从ＰＢＭＣ中经反复刺激产生ＨＬＡＢ４４限制的ＨＣＶ抗原特异ＣＴＬ，对５位人类白细胞抗原（ＨＬＡ）Ｂ４４分子阳性的丙肝患者，６位ＨＬＡＢ４４阴性的丙肝患者及５位ＨＬＡＢ４４阳性，但ＨＣＶ阴性的对照者外周ＣＴＬ对ＨＣＶ核壳蛋白（ＮＰ）的反应进行研究。结果发现ＣＴＬ能识别一个ＨＣＶＮＰ位点，该位点位于ＨＣＶ核壳蛋白的第８１～１００个氨基酸残基之间。而此位点的识别受ＨＬＡⅠ类分子Ｂ４４的限制。在５位ＨＬＡＢ４４阳性的患者，其ＣＴＬ对此位点有明显的细胞毒作用，而其余６位ＨＬＡＢ４４阴性的患者及５位正常对照者，均无此种细胞毒作用。结论在慢性丙肝患者外周血存在ＣＤ８＋的ＣＴＬ，这种ＨＣＶ特异的ＣＴＬ能够识别一个ＨＣＶ的核壳蛋白（ＮＰ）位点，此位点位于ＨＣＶＮＰ残基第８１到１００之间。并且识别此位点的ＣＴＬ受ＨＬＡⅠ类分子Ｂ４４的限制。本文结果为ＨＣＶ感染后，体内细胞免疫在病毒清除中的作用及发病机理的研究提供了方法和线索。     

国产丙肝诊断试剂质量可靠

由中国药品生物制品检定所祁自柏等人完成的“丙肝试剂系列国家标准参考品及高质量诊断试剂的研究”,获2003年国家科学技术进步奖二等奖。进行确证的抗HCV分片断确证试剂,以及直接检测丙肝病毒基因的HCVRNAPCR试剂。其中抗HCVEIA试     

乙型肝炎病毒表面抗原单克隆抗体杂交癌细胞系的建立及抗体的鉴定

对乙肝病毒(HBV)各抗原成分的单克隆抗体(McAb)已经研制和应用,其中以对表面抗原(HBsAg)特异的McAb建株较多。单克隆抗HBs是对HBsAg复杂的抗原性进行精细分析的有力工具,并有助于对HBsAg的免疫检测。