CTLA4Ig基因重组腺病毒载体的构建及其体外表达

[目的]构建表达人CTLA4Ig的非复制型重组腺病毒载体并检测其在真核细胞中的表达.[方法]分离人外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,经RT-PCR分别扩增含抑瘤素M信号肽的CTLA4胞外段及IgG恒定区(含绞链区-CH2-CH3)基因片段.将PCR产物克隆入pCDNA3,阳性重组子以双酶切和测序鉴定.将目的基因CTLA4-Ig亚克隆入腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,与5型腺病毒骨架质粒pAdeasy-1共转染BJ5183,经细菌内同源重组构建重组腺病毒载体.采用脂质体法转染293细胞包装产生重组腺病毒,进一步感染HepG2细胞,采用RT-PCR及ELISA测定CTLA4Ig表达情况.[结果]构建了表达人CTLA4Ig基因的重组腺病毒,病毒滴度可达6×109 pfu/mL,并能在HepG2和骨髓间充质干细胞中表达CTLA4Ig.[结论]成功构建表达CTLA4Ig的重组腺病毒载体,为进一步研究肝细胞移植排异及自身免疫性疾病的免疫调节治疗提供有力的手段与工具.     

清金得生片抗肿瘤机理研究

目的：探讨中药复方清金得生片对荷瘤动物的抑瘤作用及其对免疫功能的影响。方法：以C57系小鼠造成Lewis肺癌模型、NIH系小鼠造成肝癌22(H22)和肉瘤180(S180)模型，观察清金得生片对Lewis,H22、S180的抑制作用以及对荷瘤小鼠外周血中T淋巴细胞亚群及自然杀伤细胞（NK）活性的影响。结果：清金得生片高、高、低剂量对小鼠Lewis肺癌抑瘤率分别为44.9%、38.7%和34.9%；对小鼠肝癌22(H22)抑瘤率为51.76％、46.23％、39.7％；对小鼠肉瘤180(S180)的抑瘤率为57.54％、49.60％、34.92％；能使荷瘤小鼠外周血T淋巴细胞（T）、辅助性T细胞(Th)的百分数提高，纠正Th/Ts(Ts为抑制性T细胞)的比值异常，拮抗化疗药FT-207对此类细胞的抑制作用；提高自然杀伤细胞的活性。结论；提示清金得片能使受抑制的免疫功能提高，从而达到抑制肿瘤生长，阻止癌细胞扩散的目的。     

医学图书馆信息服务的创新

在新医学信息服务模式下探讨医学图书馆服务工作的创新,指出必须转变服务观念,优化服务模式,开展新型知识型服务,完善信息服务平台,才能更好地为医学科研人员服务。     

树突状细胞及其负载胃癌细胞总RNA的抗肿瘤作用

目的 以小鼠胃癌细胞总RNA负载树突状细胞(DC),研究其抗肿瘤免疫作用。方法 磁性细胞分选器(MACS)自小鼠脾细胞中分选出CDllc 的DC作短期培养,以小鼠前胃癌细胞株的总RNA脉冲DC,分别以RNA脉冲的DC(RNA/DC)和未脉冲的DC(UDC)皮下注射免疫小鼠2次;免疫后7d,皮下接种小鼠前胃癌细胞MFC 5×105/鼠,以未作免疫注射的小鼠作为对照。接种肿瘤细胞后21d,处死实验动物,测量肿瘤体积,检测自然杀伤细胞(NK)、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性和血清IL-12含量。结果 RNA/DC免疫组、UDC免疫组和对照组的皮下肿瘤体积分别为(0.3688±0.6571)、(0.7536±0.3659)、(2.6323±1.1435)cm3。RNA/DC免疫组外周血和脾细胞NK活性均明显升高,较对照组分别高出66.2％和65.4％;其肿瘤特异性CTL也明显升高,较对照组升高49.5％。UDC组NK和CTL活性也明显高于对照组。结论 短期培养的DC和以肿瘤细胞总RNA作为抗原脉冲的DC均可诱导较强的抗肿瘤免疫。     

自然流产的遗传因素及诊断

遗传因素是导致自然流产最常见的原因，目前其临床诊断仍以常规细胞遗传学方法为主。但近年来随着荧光原位杂交、比较基因组杂交及PCR等技术的应用，不但明显提高其诊断的正确率和检出率，而且发现了除染色体异常以外的其他遗传因素。就相关的遗传因素及目前采用的几种诊断方法作一简单的综述。     

X线机高压电缆中断击穿的修复

高压电缆在大、中型X线机中是一很重要的部件,它的价值比较昂贵。当它被击穿以后可以修复。电缆的两端击穿较易修复,而中段击穿比较困难。我们在工作中曾碰到了两次高压电缆的中段击穿,两次修复后经过五年左右的使用,一直没有再次从修复部位击穿过。这种修复方法比较简单,造价很低,现简介如下,供参考。     

甘肃省1996-2005 年5岁以下儿童死亡趋势分析

5岁以下儿童死亡率是衡量一个国家或地区政治、经济、文化及卫生保健事业发展的主要指标。掌握5岁以下儿童死亡现状、死因结构及动态变化规律,可为制定儿童生存、保护战略措施提供科学依据[1]。目前世界各国都将人口平均期望寿命和国民生产总值等社会经济指标用于评价国家的综合国力[2]。本文通过对1996—2005年甘肃省5岁以下儿童死亡     

清金得生片抗小鼠Lewis肺癌作用的病理形态观察

目的：探讨清金得生片抗小鼠Lewis肺癌的作用机制。方法：将C57小鼠常规接种Lewis肺癌，随机分5组，设清金得生片高剂量组（3．5g／kg）、中剂量组（2．1g／kg）、低剂量组（1．05g/kg）、FT-207组、生理盐水组，连续灌胃给药10天，停药24h后拉颈处死，取肿瘤称重量，测量体积，肿瘤组织用10％甲醛固定，切片、HE染色。结果：清金得生片各剂量组肿瘤重量明显轻于生理盐水组，肿瘤体积明显比生理盐水组小，肿瘤重量抑制率为26．52％～46．96％，肿瘤体积抑制率为26．45％～45．06％。镜下可见部分瘤细胞体积缩小，核致密，染色质浓缩边集，个别瘤细胞核断裂形成大小不等的胞核小体，肿瘤细胞核分裂数明显减少，在大片坏死残留的肿瘤细胞周围有大量的淋巴细胞和白细胞浸润。结论：清金得生片有抑制Lewis肺癌细胞增殖，诱导细胞凋亡，以及提高机体免疫功能的作用。     

清金得生片对人肺腺癌细胞端粒酶及凋亡相关基因蛋白表达的影响

目的探讨清金得生片抑制肺癌细胞生长的相关分子机制。方法采用免疫组织化学染色(SABC)方法检测清金得生片含药血清处理后人肺腺癌细胞株端粒酶活性和凋亡相关基因bcl-2、bax的表达水平。结果清金得生片含药血清作用72h,人肺腺癌细胞端粒酶活性明显抑制,同时可下调bcl-2蛋白阳性细胞染色率、上调bax蛋白阳性细胞染色率。结论清金得生片通过抑制人肺腺癌细胞端粒酶活性,调节bcl-2和bax蛋白的表达,发挥抗肿瘤作用。