干扰盐皮质激素受体基因对RAW 264.7细胞增殖和凋亡的影响

 目的：应用RNA干扰技术沉默小鼠RAW 264.7巨噬细胞盐皮质激素受体(MR)基因,建立稳定干扰细胞株,并观察其对细胞增殖和凋亡的影响。方法：针对MR基因设计合成重组MR shRNA质粒,脂质体法转染质粒至RAW 264.7细胞,经G418筛选后获得稳定表达细胞株。细胞分为3组：野生型(WT)组、阴性对照（NC）组和干扰（shMR）组。荧光显微镜下观察确定细胞的转染效率;实时定量PCR法检测细胞中MR mRNA的表达;CCK-8方法检测细胞增殖活性;流式细胞术分析细胞周期分布和凋亡情况。结果：(1) MR shRNA能明显抑制RAW 264.7细胞的MR基因表达,抑制率70%以上。(2) 从第3 d开始,shMR组细胞的生长速度明显低于NC和WT组（P<0.05）,说明MR shRNA能明显抑制细胞增殖。(3) WT、NC和shMR组的增殖指数分别为(37.2±0.5)%、(37.5±1.6)%和(31.0±1.3)%,shMR组的细胞周期出现改变,S期和G₂/M期比例明显下降,增殖指数下降（P<0.05）。(4) WT、NC和shMR组的细胞凋亡率分别为(2.18±0.36)%、(6.65±0.81)%和(7.70±1.34)%,shMR组略高于NC组,但二者的差异无统计学意义（P>0.05）。结论：本研究成功构建了稳定干扰MR基因表达的RAW 264.7细胞株,MR shRNA能够明显抑制RAW 264.7细胞增殖,但对其凋亡无明显影响。     

O等位基因引起ABO基因型与表现型定型差异

保证输血时血清学方面的安全,首要的是对受血者与献血者ABO血型定型,血清学检查通常分两个步骤.正定型通常使用鼠源单克隆抗体检测红细胞表面是否存在A或B抗原.互补的实验即反定型,利用当红细胞上缺乏A或B抗原时,人群可天然产生相对应的抗体的原理,检测血清中是否存在抗-A或者抗-B抗体.确定了受血者红细胞表面的ABO抗原以及血浆中的抗体,便能确定血型,为其提供相合的血液.     

逍遥散加减方治疗中心浆液性脉络膜视网膜病变的临床观察

目的:观察逍遥散加减方治疗中心浆液性脉络膜视网膜病变的临床疗效.方法:采用随机对照方法,将34例患者38只眼随机分为治疗组与对照组,治疗组采用中西药结合治疗,对照组采用纯西药治疗,观察两组临床疗效.结果:两组药物时中浆治疗均有效,但治疗组总有效率为94.7%,优于对照组的78.9%(P<0.05).结论:逍遥加减方治疗中心浆液性脉络膜视网膜病变有明显疗效.     

鼻腔恶性淋巴瘤的CT诊断价值

目的：探讨鼻腔恶性淋巴瘤的CT表现,旨在提高其诊断准确性。资料与方法：回顾性分析经病理证实的27例鼻腔淋巴瘤的CT表现。结果：根据2001年WHO淋巴瘤分类方法,27 例均为非霍奇金淋巴瘤（NHL）,其中B细胞淋巴瘤4例,T细胞和NK/T细胞性淋巴瘤22例,1例NHL未分型。CT表现：①病变绝大部分位于鼻腔前部（13/27）和前中部（6/27）,密度均匀,呈膨胀性生长,未见坏死液化。多伴有鼻翼、鼻背、面颊部软组织增厚、肿胀或肿块（24/27）。②向周围蔓延,浸润筛窦（15/27）、上颌窦（6/27）、蝶窦（4/27）、颞下窝（2/27）、翼腭窝（2/27）、眼眶（2/27）、鼻咽（2/27）等。③骨质破坏少而轻,一般上颌窦前壁未见破坏。④鼻前庭受累少（3/27）。⑤颈部淋巴结受累少（3/27）。⑥放化疗后,短期内病灶明显缩小或消失（14/16）。结论：鼻腔NHL具有一定的CT影像特征,CT扫描能直观全面地显示病变的侵犯范围和程度,为临床分期和治疗方案的制定提供可靠的依据。     

三例散发I型神经纤维瘤病NF1基因突变检测

目的：对3例I型神经纤维瘤病(neurofibromatosis type1, NF1)患者及其家系进行致病基因突变检测。方法：应用目标序列捕获高通量测序技术对3例I型神经纤维瘤病患者进行测序。患者检测出可疑突变类型后,应用多重连接探针扩增技术（multiplex ligation-dependent probe amplification, MLPA）及Sanger测序技术对患者及其家系成员进行突变位点验证。并采用SIFT、PolyPhen_2、Mutation Taster和GERP++软件对致病性不明的位点进行致病性预测。结果：3例I型神经纤维瘤病患者分别检测到1个NF1基因变异：NF1基因整体杂合缺失、c.4064delC和Exon14_36del。其中c.4064delC与Exon14_36del未见文献报道,为新发突变。结论：本研究中3例I型神经纤维瘤病患者中发现3个NF1基因突变,其中2个为新发突变,扩充了NF1基因突变位点。     

冬病夏治辨证穴位贴敷治疗慢性鼻炎的疗效及护理体会

目的探讨冬病夏治辨证穴位贴敷治疗慢性鼻炎的疗效观察及护理体会。方法选取该院2017年1月至2018年2月接诊的慢性鼻炎患者90例进行研究。根据治疗方法的不同,将其均分为对照组和观察组,各45例。对照组采取常规方法进行治疗,观察组采取冬病夏治辨证穴位贴敷治疗,且对观察组采取优质护理。比较分析两组患者治疗后的临床疗效、感冒次数以及治疗后3个月、6个月的复发率。结果观察组总有效率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组感冒次数频发、常发的概率显著低于对照组,偶发或不发的概率显著高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。观察组治疗后3个月、6个月的复发率均显著低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05).结论冬病夏治辨证穴位贴敷治疗慢性鼻炎,且对患者采取优质护理能够的提高疗效,改善其中医症候积分。     

调控组织因子基因表达的药物筛选研究

本研究建立TF启动子转录活性的荧光素酶基因稳定细胞株,应用该细胞模型筛选调控TF基因表达的药物,并为深入研究其分子机制打下基础。构建TF启动子的一系列5′端截短型的荧光素酶报告基因质粒(包括-2174 bp~+128 bp,-684 bp~+128 bp,-247 bp~+128 bp,-201 bp~+128 bp),将质粒电转染至U937细胞中,建立表达荧光素酶报告基因的稳定细胞株。应用ATRA验证该细胞株的功能;应用bortezomib、尿多酸肽(CDA-II)等药物处理该细胞株24小时,分析荧光素酶基因活性,筛选出能够调控TF基因表达的药物。结果发现,5 nmol/L bortezomib能激活其转录活性,上调TF转录本表达水平;1 mg/ml CDA-Ⅱ抑制TF启动子的转录活性,下调TF转录本的表达水平。TF启动子逐步截短功能分析发现,bortezomib及CDA-ⅡII调控TF启动子转录活性的区域位于-201 bp—0 bp之间。结论:本研究建立了表达TF启动子荧光素酶活性的U937稳定细胞株,并筛选出能够调控TF基因转录的药物CDA-II及bortezomib,为将来筛选新药物及深入研究其分子机...     

亲属活体肾移植应用提前口服免疫抑制方案的护理

目的探讨亲属活体肾移植中,受者应用提前口服免疫抑制治疗方案的安全性及护理特点。方法60例亲属活体肾移植受者分为两组,各30例。诱导组术中静脉点滴抗CD25抗体作免疫诱导洽疗;提前用药组术前3d开始121服免疫抑制剂。对比两组术后3个月内急性排斥和其他并发症的发．生情况。结果诱导组和提前用药组急性排斥发生率分别为6．7％和3．3％,差异无统计学意义（P〉0．05）;肝功能损害、自细胞减少、感染等发生率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论亲属活体肾移植受者提前口服免疫抑制剂可获得较好的疗效和安全性。除降低医疗费用外,尚可术前了解受者药物代谢特点。护士术前需保证受者按时服药,术后密切观察生命体征、尿量及生化指标,警惕急性排斥和不良反应。     

人工组织神经移植物对大鼠陈旧性坐骨神经缺损(60天)的修复作用

目的 观察人工组织神经移植物对陈旧性大鼠坐骨神经缺损的修复作用.方法 切除成年SD大鼠部分左侧坐骨神经,饲养60d形成陈旧性坐骨神经缺损后,以人工组织神经移植物修复缺损,同时设自体神经修复和不修复两对照组.修复术后3个月做神经-肌复合电位、腓肠肌湿重及再生神经形态学检测.结果 人工组织神经移植物修复组实验侧的运动神经传导速度、腓肠肌湿重、移植物远侧再生神经有髓神经纤维髓鞘厚度等结果与自体神经修复组相似.不修复对照组则未记录到神经-肌复合电位,未观察到再生神经纤维结构,腓肠肌湿重明显小于人工组织神经移植组和自体神经移植组.结论 人工组织神经移植物在一定程度上能修复缺损60d的大鼠坐骨神经.     

不同剂量60Co γ射线对小鼠淋巴细胞及其调节性T细胞亚群的影响

目的 分析不同剂量照射对小鼠淋巴细胞及其调节性T细胞亚群数量和表型的影响。方法 用不同剂量⁶⁰Co γ射线全身照射小鼠,分离胸腺和脾脏中的淋巴细胞,计数各样本细胞数后利用流式细胞仪分析CD4+T细胞和CD4+FOXP3+CD25+Treg细胞亚群的比例。结果 小鼠受照后胸腺细胞和脾脏细胞呈剂量依赖性减少,在照后4 d降至最低(F=118.08、144.01,P<0.05)。较高剂量照射后,胸腺中Treg细胞数随时间逐渐减少,而脾脏中该细胞亚群逐渐恢复;较低剂量照射后,胸腺中Treg细胞数有所增加。与0 Gy组相比较,Treg细胞比例随剂量增加而增加(胸腺中F=5.16、89.44、3.01,P<0.05;脾脏中F=52.02、32.13、27.45,P<0.05)。结论 不同剂量引起淋巴细胞及其Treg细胞亚群的辐射响应不同,其中Treg细胞亚群对较高剂量照射具有显著的辐射抗性,而低剂量照射可能诱导Treg细胞成熟分化或迁移。此外,淋巴细胞及其亚群的不同时间效应,也表明淋巴细胞成熟分化规律的差异。