人参三七川芎提取物抑制p53基因表达促进衰老内皮细胞增殖的研究

目的:探讨益气活血中药对血管内皮细胞衰老和p53基因表达的干预作用。方法:分离人脐静脉内皮细胞(HUVEC),传代培养至第4代,血管紧张素Ⅱ(AngⅡ,10-6mol/L,48h)诱导其衰老;分为空白对照组、AngⅡ组、中药提取物组和替米沙坦组;观察各组不同时间点β-半乳糖苷酶染色、CCK-8细胞计数、细胞周期分析、p53 m RNA及蛋白表达。结果:AngⅡ组较空白对照组β-半乳糖苷酶阳性染色细胞数增加(P<0.05);CCK-8检测活细胞数减少(P<0.05);细胞大量停滞于G0/G1期,而S期和G2/M期逐渐消失(P<0.05)。中药提取物组和替米沙坦组β-半乳糖苷酶阳性染色细胞数下降(P<0.05),CCK-8活细胞数增加(P<0.05),细胞周期阻滞改善(P<0.05)。中药早期作用更加明显(P<0.05)。AngⅡ呈时间依赖性上调p53 m RNA和蛋白表达;中药提取物和替米沙坦两组p53表达均明显下调(P<0.05);中药早期作用更加明显(P<0.05)。结论:益气活血中药能够有效地延缓血管内皮细胞衰老,其机制可能与抑制p53基因表达有关。     

短时大量吸烟对长期吸烟者和不吸烟者高密度脂蛋白功能影响的实验研究

目的:研究短时大量吸烟对长期吸烟者和不吸烟者血浆高密度脂蛋白(HDL)抗氧化、抗趋化和介导胆固醇外流能力的影响.方法:20例不吸烟者(不吸烟组)和10例长期吸烟健康受试者(长期吸烟组)短期大量吸烟(2小时内吸8支烟)前后,测定HDL抗铜离子诱导脂蛋白氧化的能力(以氧化迟滞时间表示)、改善巨噬细胞趋化性的能力(以细胞迁移数表示)以及HDL介导的巨噬细胞内NBD-胆固醇外流率的变化.结果:不吸烟组和长期吸烟组短时大量吸烟后HDL抗氧化能力均显著下降[氧化迟滞时间缩短,不吸烟组:(93.8±10.8)分比(88.5±10.8)分,P<0.05;长期吸烟组:(115.2±19.0)分比(89.4±20.3)分,P<0.05],抗趋化能力也均下降(细胞迁移数增多,不吸烟组:5.7±3.1比7.3±3.5 ×104,P<0.05;长期吸烟组:5.5±2.3比6.4±2.4 ×104,P>0.05),但两组人群短时大量吸烟前后HDL介导的胆固醇外流率均没有明显改变(不吸烟组:0.187±0.062比0.215±0.069,P>0.05;长期吸烟组:0.291±0.063比0.280±0.060,P>0.05).结论:短时大量吸烟可降低HDL的抗氧化和抗趋化能力.     

儿童脑寄生虫病9 例临床分析

目的探讨儿童脑寄生虫病的临床特征。方法回顾分析2014年12月至2018年12月收治的9例脑寄生虫病患儿的临床资料。结果男6例、女3例,平均发病年龄(2.81±1.53)岁。5例有流行病学接触史。主要临床表现为发热8例,精神疲倦7例,呕吐5例,头痛2例,抽搐2例,左下肢瘫痪1例,共济失调1例,意识模糊伴精神行为异常1例,右上肢痛觉敏感1例。外周血嗜酸性粒细胞增高8例;脑脊液常规和生化异常8例,其中5例嗜酸性粒细胞增高;血清和脑脊液寄生虫抗体均阳性5例。脑脊液二代测序检出广州管圆线虫2例。头颅MRI显示软脑膜强化2例,脑实质信号异常4例。最终7例确诊脑寄生虫病,分别为广州管圆线虫病5例、脑弓形虫病1例、脑裂头蚴病1例;临床疑诊2例。7例给予阿苯达唑治疗,1例先后经乙酰螺旋霉素、复方新诺明治疗,另1例手术治疗。7例痊愈无后遗症,1例遗留左下肢跛行,1例失访。结论伴外周血嗜酸性粒细胞增高的儿童颅内感染性疾病应警惕脑寄生虫病,广东地区尤其应注意广州管圆线虫病。     

大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为具有起搏功能的心肌细胞

目的 寻求体外诱导骨髓问充质干细胞分化为具有起搏功能的心肌细胞的方法和途径.方法 分离大鼠骨髓间充质干细胞,在体外分别用5-氮胞苷(5AZA)、碱性成纤维细胞生长因子(bFCF)+内皮细胞生长因子(EGF)、肝细胞生长因子(HGF)、干细胞因子(SCF)和窦房结心肌细胞(SAN CMs)裂解液进行诱导.观察细胞形态,用免疫组化和流式细胞技术测定心脏特异性肌钙蛋白T(cTnT)、连接蛋白43以及超极化激活的核酸环化酶门控的离子通道(HEN)2/4的表达,并测定细胞起搏电流If.结果 上述方法均能在体外将干细胞诱导为表达心肌细胞特异性蛋白的心肌样细胞,并且均有HCN2表达.5-AZA、bFGF+EGF和SAN CMs组表达HCN2比例较高(22.9%、22.3%和11%),且均能测到起搏电流(If)的存在.结论 窦房结裂解液是体外诱导骨髓间质干细胞分化为具有起搏功能的心肌细胞的理想方法,HCN是很有前景的分选具有起搏功能的心肌细胞的标志蛋白.     

蛋白A免疫吸附治疗儿童水通道蛋白4抗体阳性的视神经脊髓炎谱系病一例

患儿女,11岁,因“右眼视物不清10 d”于2020年3月就诊于广州市妇女儿童医疗中心,入院时右眼无光感,血清水通道蛋白4抗体阳性,首次磁共振成像(MRI)见颅内多发病灶、右侧视神经增粗、胸5~6脊髓病变,诊断视神经脊髓炎谱系病,静脉输注大剂量甲泼尼龙冲击及人免疫球蛋白治疗后视力无改善,且出现左眼视物不清。给予免疫吸附后双眼视力改善,复查MRI病灶吸收好转,免疫吸附过程中无严重并发症。免疫吸附治疗儿童视神经脊髓炎谱系病安全有效。     

心肌微环境对骨髓间充质干细胞的诱导分化作用

目的通过与心肌细胞(CMs)共同培养和采用含有CMs裂解液的培养基两种方法体外模拟心肌微环境,探讨心肌微环境对骨髓间充质干细胞(MSCs)分化的诱导作用。方法自新生乳鼠的心脏分离CMs,自成年大鼠的骨髓分离MSCs,将MSCs与CMs按1∶4的比例共同培养1周,观察细胞形态的改变,并通过免疫荧光方法检测共培养后MSCs表达心脏特异性肌钙蛋白T(cTnT)及CD31的情况;将分离的CMs反复冻融制成CMs裂解液,将MSCs在含有4倍CMs裂解液的培养基中培养1周,观察细胞形态的改变,并通过免疫化学方法检测MSCs表达心脏特异性肌钙蛋白T(cTnT)及CD31的情况;以仅用普通培养基所培养的MSCs作为对照。结果与CMs共培养的MSCs和CMs裂解液培养的MSCs逐渐伸展变长,形成肌细胞形态,培养1周后经抗cTnT和抗CD31免疫染色均呈阳性;对照组MSCs没有明显形态变化,抗cTnT和抗CD31免疫染色成阴性。结论与CMs共培养和采用含有CMs裂解液的培养基两种方法均可在体外模拟心肌微环境,诱导MSCs向心肌样细胞和内皮样细胞方向分化。     

联合非诺贝特与辛伐他汀干预过氧化体增殖激活-α受体表达对兔髂动脉球囊血管成形术损伤后内膜增殖的影响

目的评价过氧化体增殖激活-α(PPAR-α)受体表达对动脉血管球囊损伤术后内膜增殖的影响.方法雄性新西兰兔32只经高脂喂养3周后接受双侧髂动脉内膜剥脱损伤.术后分为4组(每组8只),分别接受辛伐他汀20mg/日(辛伐他汀组),非诺贝特200 mg/日(非诺贝特组),辛伐他汀20mg+非诺贝特200 mg/日(联合治疗组)和安慰剂治疗(对照组).4周后处死动物,对损伤局部血管形态进行计算机图形分析,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术评价局部PPAR-α受体表达水平.结果联合应用辛伐他汀和非诺贝特可以较好地增加血管PPAR-α受体信使核糖核酸(mRNA)的表达(P＜0.05),并使球囊损伤后内膜增殖的面积减少约50%(P＜0.01),减少局部巨噬细胞的浸润(P＜0.01).结论激动PPAR-α受体表达增加可以较好地抑制动脉血管球囊损伤术后新生内膜的增殖.     

血浆脑钠素水平评价左心室收缩功能不全的意义

目的探讨我国正常人群、左心收缩功能不全及和肺源性呼吸困难患者脑钠素(BNP)的血浆浓度,及其与心功能分级的关系.为BNP在心力衰竭(心衰)诊断和呼吸困难鉴别诊断提供理论依据.方法使用BIOSITE公司的TriageBNP干氏快速诊断方法对81例心衰患者、40例正常者和40例肺源性呼吸困难患者的BNP水平进行测量,比较三者间浓度差别;使用射血分数≤45%作为心功能不全诊断的金标准, 绘制ROC曲线,得出BNP诊断的最佳阈值.结果①心衰组与正常对照组及肺源性呼吸困难组的BNP水平差异有统计学意义(P<0.01),正常对照组与肺源性呼吸困难组的BNP水平差异无统计学意义(P>0.05); ②心衰组不同NYHA分级的BNP水平比较差异均有统计学意义(均P<0.01);③ ROC曲线下面积为0.991,选择97.75 ng/L为BNP诊断的最佳阈值,其诊断心衰的敏感性为93.8%,特异性为96.1%.结论BNP对左心收缩功能不全有很高的灵敏度和特异度,可用于呼吸困难的鉴别诊断.     

金黄地鼠胰岛素抵抗和糖尿病动物模型的建立

目的观察血管抑素基因联合氟尿嘧啶腹腔化疗对抗腹腔荷瘤裸小鼠的抗恶病质效应。方法RT-PCR克隆血管抑素基因,建立重组腺病毒载体。建立人结肠癌LoVo细胞腹腔种植的模型,给予血管抑素基因联合氟尿嘧啶腹腔化疗。观察荷瘤裸小鼠的体重和摄食量的改变及血清TNF-?和IL-1水平的变化。结果血管抑素基因联合氟尿嘧啶腹腔化疗组裸小鼠的体重、摄食量、精神和活动情况明显好于对照组;治疗组的血清TNF-?和IL-1水平和肿瘤微血管密度(MVD)明显低于其他各组。结论血管抑素的基因治疗与传统的腹腔化疗联合应用,可明显的改善荷瘤裸小鼠的恶病质症状,增强其抗恶病质的效应.     

冠状动脉扩张的临床表现及影像学特点

目的 研究冠状动脉(冠脉)扩张的临床表现及其影像学特点.方法 收集2005-2007年在北京协和医院行冠脉造影的患者,入选冠脉扩张患者25例进行研究.并按日期配对入选冠脉粥样硬化组25例和冠脉造影正常对照组25例.结果 冠脉扩张患者大部分为男性(72%).只有3例患者合并糖尿病,13例患者合并了高血压.所有患者均以胸痛入院,其中9例有ST段改变,4例为ST段抬高.冠脉扩张患者中最常受累的血管是右冠脉(76%),其次为左前降支(60%),左回旋支(48%)和左主干(8%);其中单支受累的患者占44%,而3支受累者占36%.与粥样硬化相比,冠脉扩张患者中糖尿病的发病率较低(冠脉扩张组合并糖尿病为12%,粥样硬化组为48%,正常组为16%),其他危险因素如高血压、血脂等各组差异无统计学意义.结论 冠脉扩张以男性好发,合并糖尿病较低,右冠脉为最常受累血管,而且以单支受累为主.