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目的探讨Wy14643对急性肺损伤(Acutelung injury,ALI)大鼠肺组织的保护作用及其可能机制。方法将128只雄性Wistar大鼠随机等分为对照组、致伤组、Lw 1 mg组、LW 3 mg组。用LPS(5me/kg)静脉注射复制大鼠Au模型,在静脉注射LPS 15 min后再次静脉注射Wy146431mg/kg和3mg/kg,分别在LPS后1、2、4及8h时活杀大鼠,分别采用酶联免疫吸附分析法及分光光度计法检测用药前、后各时相点大鼠肺组织匀浆及血浆中TNF—α、IL-10浓度及MPO活性。结果LW 1 mg组在2、4及8h,LW 3 mg组在1、2、4及8h血浆及肺组织匀浆上清中的TNF—α、IL-10分别较Au组相应时相点显著下降与升高(P〈0.05);LW 1 mg组在4及8h,LW3mg组在2、4及8h肺组织匀浆上清中的MPO活性均较ALI组相应时相点显著下降(P〈0.05)。结论Wy14643对Au大鼠肺组织具有-定的保护作用,其机制可能是PPARa激活后抑制了TNF-α的释放,增加IL-10的释放,减轻肺部及全身的炎症反应。 相似文献
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大鼠糖皮质激素受体变异体cDNA序列克隆和表达及功能研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:构建大鼠糖皮质激素受体变异体表达载体,研究其表达和功能。方法:运用RT—nested PCR扩增糖皮质激素受体不含有编码LBD结构域的cDNA序列,将PCR产物定向克隆至pEGFP—N2质粒载体,测序筛选重组质粒;荧光显微镜观察重组质粒转染后的表达情况;相对荧光素酶法检测转录激活活性。结果:扩增出长1612bp的cDNA序列,测序证实:克隆片段与Genebank该基因序列同源性为100%;重组质粒表达产物定位于细胞核;转染组细胞转录激活活性增强。结论:成功构建糖皮质激素受体变异体的表达载体,该变异体具有不依赖激素的转录激活活性。 相似文献
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目的:构建重组大鼠γ-干扰素真核表达载体,探讨其转染大鼠肺泡巨噬细胞(AM)和气道上皮细胞的可行性及表达水平。方法:采用RT-PCR技术克隆了大鼠γ-干扰素,并将其定向克隆到逆转录病毒载体pLXSN上,构成真核表达重组载体,将重组载体转染培养的AM和气道上皮细胞,用PCR法鉴定重组载体整合在细胞基因组DNA中,并检测细胞培养上清中γ-干扰素浓度和活性。结果:DNA测序证明,构建的重组载体中γ-干扰素的基因方向正确,DNA序列与Gene Bank中大鼠的γ-干扰素cDNA序列相同,转染后AM和气道上皮细胞基因组DNA的PCR产物电泳可见转染的重组载体DNA片段条带,pLXSN-IFN载体组的AM和气道上皮细胞培养上清中大鼠γ-干扰素学和活性显著高于pLXSN空载体组(P<0.01)结论:本研究构建的大鼠γ-干扰素重组表达载体可成功地转染大鼠AM和气道上皮细胞,整合入基因组DNA,并分泌有活性的γ-干扰素,为进一步的体内基因转染研究奠定基础。 相似文献
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我们的研究拟观察转染Na /H 交换器 1(NHE 1)核酶基因逆转录病毒载体后 ,缺氧培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的增殖和凋亡变化。材料与方法 转染表达NHE 1核酶基因的大鼠PASMCs(PRZ组 )为我们前期实验所获得[1] ,同时设立转染pLXSN空载体的大鼠PASMCs(PX组 )和未转染的大鼠PASMCs为对照组。第 4~ 10代细胞用于实验。细胞准备 :用于细胞内pH值 (pHi)测定和原位细胞凋亡检测的细胞接种于 2 4孔培养板内的玻片上 ,其他实验的细胞接种于培养瓶。各组细胞均用含 0 4 %小牛血清的DMEM培养基培养 4 8h ,使细胞处于静止… 相似文献
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2种酶消化法培养大鼠血管平滑肌细胞生长特性的比较 总被引:21,自引:8,他引:13
目的:应用单纯胶原酶法、复合胶原酶法培养大鼠血管平滑肌细胞,比较其生长特性。方法:采用改良Lowry法测定了蛋白质含量,依照荧光指示剂法测定了细胞内[Ca2+]。结果:2种方法其生长曲线类似,均于7~8d至高峰,其蛋白质含量略有差异,也是在7~8d达最大,钙含量分别为(202.60±15.18)nmol/L和(153.20±11.34)nmol/L。结论:单纯胶原酶法相对经济,复合胶原酶法能更好地保护细胞,可根据具体情况选用。 相似文献
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缺氧肺动脉高压大鼠肺组织中白细胞介素6和Janus激酶表达的变化 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 研究缺氧肺动脉高压 (HPH)肺组织中白细胞介素 6(IL 6)及Janus激酶 (JAKs)表达的变化。方法 雄性Wistar大鼠 60只 ,随机分为缺氧 1周 (H1)、缺氧 2周 (H2 )、缺氧 3周 (H3)、缺氧4周 (H4)和常氧 (N)组 ,每组 12只。常压缺氧舱复制HPH大鼠模型。应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测肺组织IL 6和JAKsmRNA的表达水平 ;免疫组化法检测肺组织JAKs蛋白的含量和细胞形态学变化。结果 (1)H1、H2 和H3 组大鼠肺组织IL 6mRNA水平 (分别为 1 67± 0 0 9、2 2 6± 0 12、1 55± 0 11)显著高于N组 (1 2 0± 0 11,P均 <0 0 1) ;H1、H2 和H3 组大鼠肺组织JAK1mRNA水平 (分别为 2 11± 0 0 9、2 85± 0 12、2 3 6± 0 13 )显著高于N组 (1 62± 0 10 ,P均 <0 0 1) ;H1、H2 和H3 组大鼠JAK2mRNA水平 (分别为 1 41± 0 0 7、2 0 2± 0 13、1 3 6± 0 0 9)显著高于N组 (1 0 1± 0 0 9,P均 <0 0 1) ;H1、H2 和H3 组大鼠肺组织JAK3mRNA水平 (分别为 0 86± 0 11、1 45± 0 10、0 91± 0 13 )显著高于N组 (0 55± 0 0 8,P均 <0 0 1) ;H1、H2 组大鼠肺组织TYK2mRNA水平 (分别为 1.3 6± 0 .10 ,1.76± 0 .11)显著高于N组 (0 .57± 0 .0 7,P均 <0 .0 1) ;其中H2 组大鼠肺组织表达IL 6和J 相似文献
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丹参素对麻醉犬血流动力学的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的观察丹参素钠注射液静注给药对正常麻醉犬心率、血压、心脏收缩舒张功能等血流动力学指标的影响。方法采用心脏导管法直接观察丹参素钠注射液(2、4、8 mg/kg)对麻醉犬心率(HR)、收缩压(SAP)、舒张压(DAP)、平均动脉压(MAP)、左心室收缩压(LVSP)、左心室平均压(MLVP)、左心室收缩压最大变化速率(±dp/dtm ax)、左心室舒张末期压(LV-EDP)等血流动力学的影响。结果丹参素钠注射液显著增加LVSP、±dp/dtm ax,对SAP、DAP、MDP无显著影响;高剂量组显著降低心率。结论丹参素钠注射液可显著改善心功能,具有减轻心脏负荷,降低心肌耗氧量的作用。 相似文献
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15个厂家盐酸二甲双胍片溶出度的比较 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:比较15个厂家盐酸二甲双胍片的体外溶出度,为临床用药提供参考。方法:采用转篮法进行体外溶出度实验,以紫外分光光度法进行含量测定,计算累计溶出百分率。以威布尔方程拟合溶出参数,并用方差分析对组间溶出参数进行统计学分析。结果:15个厂家盐酸二甲双胍片的体外溶出度均符合《中国药典》2005年版的规定,但各厂家盐酸二甲双胍片的溶出参数m、T30、T50、Td和T80间存在显著性差异(P〈0.01)。结论:不同厂家盐酸二甲双胍片的溶出参数存在差异,临床用药时应加以注意。 相似文献
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目的 研究p16 基因产物在NSCLC癌组织的表达及其临床意义。 方法 用链霉抗生物素蛋白过氧化物酶连结法检测64 例NSCLC患者肺癌组织及配对淋巴结标本p16 蛋白表达。 结果 肺癌组织p16 蛋白表达缺失率达488% (31/64),516 % 呈阳性表达(33/64) ,阳性表达中很可能存在突变蛋白。p16 蛋白表达与NSCLC的组织学类型、临床分期、细胞分化无相关性,与淋巴结转移关系密切。淋巴结转移组,肺癌组织p16 蛋白表达高于淋巴结阴性组( P< 005) 。在转移淋巴结中,4286% p16 蛋白阳性。 结论 p16 基因产物的异常表达与NSCLC 的发生、发展关系密切,它在NSCLC 中可能属于迟发事件。 相似文献